1 / 46

Praktiká 5ZS enterobacteriaceae

Praktiká 5ZS enterobacteriaceae. Enterobacteriaceae – charakteristika, štruktúra, typy ochorení, odber materiálu – E. coli, Proteus sp., Klebsiella sp Mikroskopický dôkaz – E. coli podľa Grama, - dôkaz púzdra K. pneumoniae podľa Burriho

amos-myers
Download Presentation

Praktiká 5ZS enterobacteriaceae

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. Praktiká 5ZS enterobacteriaceae • Enterobacteriaceae – charakteristika, štruktúra, typy ochorení, odber materiálu – E. coli, Proteus sp., Klebsiella sp • Mikroskopický dôkaz – E. coli podľa Grama, - dôkaz púzdra K. pneumoniae podľa Burriho • Kultivačný dôkaz – E. coli a K.pneumoniae na krvnom agare a Endovej pôde, - plazivý rast P. mirabilis – Raussov fenomén • Biochemický dôkaz - Enterotesty, - vyhodnotenie Enterotestu E. coli, Kl. Pneumoniae a P. vulgaris., - opakovanie biochemická pôda Hajn • Sérologický dôkaz – dôkaz antigénnej štruktúry neznámeho kmeňa – použitie polyvalentných a monovlaentných sér – sklíčková aglutinácia

  2. G- aeróbne paličky • 1) Fakultatívne anaeróbne fermentujúce paličky:Enterobacteriaceae - E. coli, Salmonella, Schigella, Enterobacter, Citrobacter, Serratia, Klebsiella, Proteus, Morganella, Providencia Vibrionaceae - Vibrio, Aeromonas, Plesiomonas Campylobacter, Helicobacter • Najrozsiahlejšia, najheterogénnejši skupina medicínsky dôležitých baktérií • 27 rodov,102 druhov (95% medicínsky významných patrí do 25 druhov) - odlíšenie na základe DNA homológie, biochemických vlastností, sérologických reakcií, ATB citlivostí • Bežne prítomné v prírode (pôda, voda, rastliny) súčasť normálnej flóry čreva. • Obligátne patogénne(Yersinia pestis), podmienečne patogénne (Klebsiella, E. coli, Proteus) • Prenos zo zvieraťa (Salmonelly), od človeka - nosiča (S. typhi), endogénna infekcia (E.coli)

  3. Miesta infekcie • CNS - E. coli • IDC - Klebsiella, Enterobacter, E. coli • Septikémia - E. coli, Klebsiella, Enterobacter • GIT - Salmonella, Shigella, Yersinia, E.coli • IMC - E. coli, Proteus, Providencia, Klebsiella

  4. Fyziológia a štruktúra • G- paličky, obvykle pohyblivé (bičíky)- okrem Klebsielly, netvoria spóry, fakultatívne anaeróbne, nenáročné nutričné požiadavky, biochemicky aktívne, kataláza +, oxidáza -, cytochromoxidáza COX - = dif.dg.od ostatných G - paličiek • Skvasovanie laktózy + alebo – (patogénne Salmonella, Shigella, Yersinia, a Proteus neskvasujú) rezistencia na žlčové soli (Salmonella), prítomnosť púzdra (Klebsiella) - dif.dg v rámci Enterobacteriaceaei • 3 skupiny antigénov: • - somatický O antigén - najdôležitejší antigén bb. steny, termostabilný, LPS, zložený z 3 súčastí - O polysachrid, kôrový polysacharid a lipid A - s endotoxínovou aktivitou • - púzdrový K antigén - termolabilný, skrížene reagujúci s protilátkami proti iným baktériám. U Salmonella typhi sa nazýva Vi antigén. • - bičíkový H antigén - termolabilný, podlieha antigénnym zmenám

  5. Laboratórna diagnostika • rastú dobre na neselektívnych médiách • Selektívne média na odlíšenie patogénnych - laktóza negatívnych kmeňov Salmonella, Shigella • Biochemická identifikácia – Hajnov test, Enterotesty – súbor biochemických testov • Sérodiagnostika – odlíšenie antigénnej štrukktúry – Salmonelly, Shigelly, E.coli • Interpretácia výsledkov – vo vzorke zo stolice – Salmonella, Shigella, Yersinia – patogénne, ostatné enterobacteriaceae – podľa stavu eubiózy, pri premnožení - z materiálov za fyziologických podmienok sterilných : moč – IMC, ascendentná infekcia, krv – najčastejšie etiol. agens, rana, spútum – v dostatnočnom množstve, TT,TS - monokultúra

  6. Hajn – šikmo naliata, tuhá červená pôda. Obsahuje tri cukry – glukóza, sacharóza, laktóza. Zožltnutie pôdy znamená pozit. skvasovanie.. Pôda obsahuje soli Fe, baktérie tvoriace sírovodík spôsobia sčernanie dolnej časti pôdy. Baktérie, ktoré tvoria plyn, spôsobia trhliny, bubliny v pôde. Pôdu očkujeme kľučkou, naočkujeme vždy iba jednu izolovanú kolóniu.

  7. Šikmá časť – aeróbne prostredie, laktóza negatívne bakktérie – neskvasujú – alkalické, červené Kolmá časť anaeróbne prostredie enterobaktérie skvasujú – kyslé – žlté, alebo H2S - čierne 1 negatívna kontrolka 2 Ps.aeruginosa : nefermentujúca G- palička 3 Shigella sonnei: H2S - negat., plyn – negat., TSI – kyslé/alkal 4 Salmonella typhi: H2S – pozit., plyn –negat., TSI – kyslé/alkal 5 Escherichia coli: H2S – negat., plyn - pozit., TSI – kyslé/kyslé 6 Proteus mirabilis: H2S – pozit, plyn - negat., TSI – kyslé /kyslé

  8. E. coli • Prítomná v GIT • vyvoláva - endogénne infekcie po zlyhaní imunitných bariér, z fyziologickej flóry- bakteriálnu sepsu ( z fokusu v močových cestách alebo GIT najčastejší G- vyvolávateľ sepsí), IMC ( väčšina ambulantných infektov, z GIT, špecifické sérotypy viažúce sa na epitel), - gastroenteritídy – EPEC, EIEC, ETEC - neonatálnu meningitídu - hemolyticko uremický sy – EHEC – O:157, H:7 • Vytvára komplex početných O-somatických, H- bičíkových a K - púzdrových antigénov.

  9. E. coli

  10. Stena močového mechúra s.adherovanými escherichiami

  11. E. coli

  12. E.coli Hemolýza (KA) okolo kolónií je častá, nehodnotí sa ako významný diagnostický znak

  13. p • Endova pôda.

  14. Klebsiella • Opúzdrená – mukózny vzhľad kolónií, zvýšená virulencia, nepohyblivá • Klebsiella pneumoniae – pneumónia u pacientov, ktorí nie sú schopný vykašľávaním vyčistiť aspiráty z ústnej dutiny. Nekrotické deštrukcie alveolárnych priestorov. Sangvinolentné sútum. Infekcie rán, mäkkých tkanív a močového traktu • K. rhinoscleromatis - skleróm • K. ozaenae – atrofické ochorenie nosovej sliznice

  15. Klebsiella sp.

  16. Burriho metóda na dôkaz púzdier • Na podložnom sklíčku sa urobí suspenzia vyšetrovanej kolónie a destilovanej vody • K suspenzii sa pridá kvapka tušu a urobí sa tenký náter • Preparát sa nechá uschnúť a fixuje sa teplom • Potom sa dofarbí kryštálovou violeťou, veľmi opatrne opláchne vodou – ponoriť do kadičky-, nechá odkvapkať a prezerá pod imerziou

  17. Púzdra • Extracelulárne štruktúry obaľujúce baktérie, pevne priliehajúce k bb. • Polysacharidové ( len B. antracis – polypeptidové) • Nástroj patogenity – antifagocytárne vlastnosti, bráni vstupu antibiotík, má funkciu adhezínov • Niektoré baktérie sú vo forme opúzdrených aj neopúzdrených kmeňov (hemofilus influenzae)– opúzdrené sú virulentnejšie • Púzdro sa môže v starých kolóniách strácať, alebo ho neopúzdrené kmene môžu získať transdukciou z opúzdrených

  18. Klebsiella pneumoniae

  19. Klebsiely a escherichie I

  20. klebsielly…

  21. Proteus • Pohyblivá G- baktéria, Raussov fenomén • P. mirabilis – infekcie močového traktu, produkujú ureázu ( rozklad urey – močoviny, zmena pH, alkalinizácia, podpora tvorby kamienkov a toxicita pre epitel • Proteus vulgaris,

  22. Proteus mirabilis

  23. Proteus mirabilis, P. vulgaris (dolu) RAUSSOV FENOMÉN

  24. Proteus

  25. Kultivácia • E. coli na Krvnom agare –šedavé kolónie bez hemolýzy • E. coli na Endovej pôde – vypuklé kolónie s kovovým rastom • K. pneumoniae na KA – lesklé mukózne ťahavé kolónie • K. pneumoniae na Endovej pôde – ružové kolónie bez lesku • Proteus mirabilis – plazivý rast, Raussov fenomén – koncentriký rast od jedinej kolónie

  26. Sklíčková aglutinácia • Na podložnom sklíčku – suspenzia s FR • 1) Suspenzia + kvapka polyvalentných sér • s + poly ABC = aggl+ S+ poly DEF = aggl– • 2) Suspenzia + kvapka monovalentných sér • s + mono A = aggl.+ s + mono B = aggl – s + mono C = aggl.– • Výsledok – testovaný kmeň je typ A

  27. MikroLaTest Identifikácia Klebsiella pneumoniae – Enterotest + /- + - - +- + + + + + + + + + + /+

  28. Kampylobaktery

  29. Campylobacter Čiarkovité , G-, pohyblivé, 11 druhov ,7 poddruhov Vyžaduje mikroerofilné prostredie, teplotu 42*C, prechádza filtrami - selektívne vychytávanie při izolácii Campylobacter jejuni – gastroenteritída, u pacientov so zníženou imunitou –hypogamaglobulinémia, zníženou aciditou žalúdočnej tekutiny. Infikuje sliznicu jejuna, ilea a colon, ktorá je edematózna, krvavá, tvorba krýpt, abscesov.Infiltrácia do lamina propria. Enterotoxín, cytoptický toxín, endotoxín. Hydina, potraviny neutralizujúce pH redukujú inf. dávku. C.coli - gastroenteritis, C. fetus – septikémia, artritída, tromboflebitída, meningitída Lab dg kultivácia na selektívnych pôdach, mikroskopia, biochemická identifikácia., Th.: ERY

  30. Campylobacter jejuni

  31. HELICOBACTER

  32. Helicobacter • Špirálovité paličky, G-, v súvislosti s B gastritídou, žalúdočným a duodenálnym vredom., príp. Ca – Gastrospirillum hominis • Patogenéza – produkcia ureázy – vytvára oblak amoniaku, ktorý chráni baktériu před účinkom žal. kyseliny, - pohyblivosť, - tvorba mucinázy – prienik baktérie do mukóznych vrstiev – adherencia – prichytenie baktérie na intracelulárne spoje – zápal s infiltráciou mononukleárov v lamina propria. Uniká prítomným protilátkam igA – svojou lokalizáciou v mukóze. • Neexistuje zvierací rezervoár – prenos interhumánny • Th. ATB . Bizmutové soli, nitroimidazol a amoxicilin alebo TTC

  33. H. PYLORILaboratórna diagnostika sa robí z bioptického materiálu odobratého sondou zo žalúdočnej sliznice. Transport v 20% roztoku glukózy. Biopsia sa na sterilnom podložnom sklíčku pomocou dvoch ihiel rozdelí na maličké kúsky.

  34. Helicobacter pylori

  35. Helicobacter cinaedi

  36. Salmonella, shigella, • Mikroskopický dôkaz - Gramovo farbenie Salmonella sp. - Gramovo farbenie Haemophilus influenzae • Kultivácia - Salmonella, Shigella, dezoxycholát, krvný agar • Biochemické vlastnosti - fermentácia cukrov - Hajnova pôda a Enterotesty: Salmonella, Shigella, • Widalova reakcia - diagnostické možnosti brušného týfusu

  37. Mikroskopický dôkaz • Mikroskopický dôkaz - Gramovo farbenie • Salmonella sp. Shigella sp.

  38. Kultivácia G- paličiek - Salmonella, Shigella, • Kultivácia - Salmonella, Shigella, • krvnom agare - G - palička, šedavé kolónie neodlíšiteľné, • na Endovej pôde- E.coli laktózu skvasuje - ružové kolónie, Salmonella laktózu neskvasuje - žlté, priesvitné - s tvorbou sirovodíka, • Shigella - laktózu neskvasuje, bez sirovodíka, • na DC - dezoxycholátovom agare - selektívna pôda - rastie Salmonella (laktóza negat. so sírovodíkom) a Shigella (laktóza negat. bez sírovodíka). - E. coli nerastie

  39. p • kolonie gramnegatívnych paličiek na KA a Endovej pôde

  40. Salmonela Endo

  41. Šikmá časť – aeróbne prostredie, laktóza negatívne bakktérie – neskvasujú – alkalické, červené Kolmá časť anaeróbne prostredie enterobaktérie skvasujú – kyslé – žlté, alebo H2S - čierne 1 negatívna kontrolka 2 Ps.aeruginosa : nefermentujúca G- palička 3 Shigella sonnei: H2S - negat., plyn – negat., TSI – kyslé/alkal 4 Salmonella typhi: H2S – pozit., plyn –negat., TSI – kyslé/alkal 5 Escherichia coli: H2S – negat., plyn - pozit., TSI – kyslé/kyslé 6 Proteus mirabilis: H2S – pozit, plyn - negat., TSI – kyslé /kyslé

  42. Salmonella typhi

  43. Widalova reakcia - diagnostické možnosti brušného týfusu • Kultivácia (priama diagnostika) krvi (7.-10. deň), stolice (od 2. týždňa), kostnej drene, moču (od 3. týždňa) a zisťovanie aglutinínov v sére - Widalova reakcia (nepriama diagnostika) - protilátky proti O a H antigénom S. typhi - štvornásobný vzostup titra protilátok - akútne ochorenie alebo - vyhľadávanie nosičov - skrížená reaktivita, dostatočne vysoký titer • Znalosti klinického obrazu a patogenézy - Ochorenie začína ingesciou baktérií.Inkubačný čas je 1-2 týždne. Pri väčšom inokule sa môže vyskytnúť akútna gastroenteritída. Baktérie prenikajú cez mukózu tenkého čreva ( invázia) endocystózou do submôukózy. Množia sa v submukózze a sú vychytávané do lymfatických uzlín, kde sa množia v makrofágoch, dostávajú sa do krvi (perzistujúca bakterémia) a orgánov RES a ostatných orgánov (hemorhagie, kožná rozeola, orgánové komplikácie)

  44. Znalosti klinického obrazu a patogenézy - Ochorenie začína ingesciou baktérií.Inkubačný čas je 1-2 týždne. Pri väčšom inokule sa môže vyskytnúť akútna gastroenteritída. Baktérie prenikajú cez mukózu tenkého čreva ( invázia) endocystózou do submôukózy. Množia sa v submukózze a sú vychytávané do lymfatických uzlín, kde sa množia v makrofágoch, dostávajú sa do krvi (perzistujúca bakterémia) a orgánov RES a ostatných orgánov (hemorhagie, kožná rozeola, orgánové komplikácie)

  45. Widalova reakcia - diagnostické možnosti brušného týfusu (graf) týždeň

More Related