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PCR 的反應有三個基本步驟: (1) 變性:加熱至 92~95 ℃ ,將雙股螺 旋解開,使單股 DNA 作為複製的模版 (2) 連接:降溫至 40~60 ℃ ,令引子附著 於模版 DNA 兩端 (3) 擴大:提昇溫度至 70~75 ℃

PCR 的反應有三個基本步驟: (1) 變性:加熱至 92~95 ℃ ,將雙股螺 旋解開,使單股 DNA 作為複製的模版 (2) 連接:降溫至 40~60 ℃ ,令引子附著 於模版 DNA 兩端 (3) 擴大:提昇溫度至 70~75 ℃ ,加入聚 合酶,進行另一股 DNA 之合成. PCR 的應用: (1) 鑑定(或檢出)特定基因 (2) 檢測基因是否異常 (3) 複製基因的生產線 (4) 協助進行 DNA 指紋比對 (5) 器官移植相容性分析( HLA ; 人類白血球抗原分析)

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PCR 的反應有三個基本步驟: (1) 變性:加熱至 92~95 ℃ ,將雙股螺 旋解開,使單股 DNA 作為複製的模版 (2) 連接:降溫至 40~60 ℃ ,令引子附著 於模版 DNA 兩端 (3) 擴大:提昇溫度至 70~75 ℃

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Presentation Transcript


  1. PCR的反應有三個基本步驟: (1)變性:加熱至92~95℃,將雙股螺 旋解開,使單股DNA作為複製的模版 (2)連接:降溫至40~60℃,令引子附著 於模版DNA兩端 (3)擴大:提昇溫度至70~75℃,加入聚 合酶,進行另一股DNA之合成

  2. PCR的應用: (1)鑑定(或檢出)特定基因 (2)檢測基因是否異常 (3)複製基因的生產線 (4)協助進行DNA指紋比對 (5)器官移植相容性分析(HLA ; 人類白血球抗原分析) (6)RT-PCR(反轉錄聚合酶連鎖反應)將mRNA翻成 cDNA,再利用PCR放大特定片段 (7)即時聚合酶連鎖反應(real-time PCR)是一種藉 著PCR操作協助定量DNA濃度的方法

  3. There was a time when to amplify DNA, 有段時間需要大量複製某段DNA的時候You had to grow tons and tons of tiny cells. 你必須培養成千上萬個小細胞Then along came a guy named Dr. Kary Mullis, 之後出現一位名叫凱瑞慕理斯博士的傢伙Said you can amplify in vitro just as well.他說你也可以進行細胞外的大量複製Just mix your template with a buffer and some primers, 只要DNA模版、緩衝液跟起始端混合Nucleotides and polymerases, too. 還要加上核酸跟聚合酶Denaturing, annealing, and extending. 變性、黏合及延伸Well it‘s amazing what heating and cooling and heating will do. 加熱、冷卻、再加熱的結果讓人驚異PCR, when you need to detect mutations.  PCR,當你需要偵測突變的位置時 PCR, when you need to recombine. PCR,當你需要進行基因重組時PCR, when you need to find out who the daddy is. PCR,當你需要知道誰是孩子的爹時,PCR, when you need to solve a crime. PCR,當你需要知道誰是兇手時。。。

  4. 請自行連結下列網址 http://61.63.17.241/panasia/pages/index.php?Ipg=news&show=1&id=124

  5. 動物基因轉殖技術 • 基因顯微注射:1980成功迄今 • 基因槍:將外源性特定DNA包在微小的鎢金屬微粒表面(1~4μm),目前國人更開發低壓基因槍 • 反轉錄病毒感染法:(1)先選殖基因(2)基因嵌入反轉錄酶(3)植入細胞胚(4)胚移植入 • 胚幹細胞法:(1)外源基因轉殖至幹細胞(2)注入早期囊胚腔,與宿主細胞嵌合,進而分化(3)嵌合胚移植 • 精子載體法(1)精子與外源基因在體外共同培養(2)精子帶著外源基因與卵進行體外受精。(此法尤其適合水產養殖) • 體細胞核轉置法:(1)體細胞導入外源基因(如第八、第九因子)(2)運用桃莉羊的核轉殖技術,與去卵核細胞融合(3)胚移植入 • 基因轉殖植物之建立(1)基因槍(2)農桿菌接種

  6. 質體(plasmid):質體是分子生物的一種工具,質體上有一段tDNA,可被插入目標基因,再由細菌複製出許多目標基因,然後再把這些目標基因藉著農桿菌或基因槍轉殖入植物的細胞核內:質體(plasmid):質體是分子生物的一種工具,質體上有一段tDNA,可被插入目標基因,再由細菌複製出許多目標基因,然後再把這些目標基因藉著農桿菌或基因槍轉殖入植物的細胞核內:

  7. 重組DNA的步驟: • 選取目標基因及選取載體( vector ) • (1)選用病毒或細菌質體(Plasmid)的DNA作為載體 • :以限制酶閱讀特定的DNA序列,並將其切開。 • 使3’端是OH-基,5’端是磷酸基(PO42-),由此 • 而產生粘性末端 • (2)以限制酶切割目標基因及載體 • (3)以DNA連接酶連接DNA片段及質體間隙 • 2. 重組DNA • 3. 送回細菌體內:最常用大腸桿菌來生產我們所需的 • 蛋白質 • 篩選轉形細胞:加入某些特定基因,以便篩選轉殖 • 成功的細胞:如加入抗抗生素基因、抗重金屬基因、螢光基因

  8. 蘇力菌是一種昆蟲病原細菌,會產生具有專一性殺蟲效果的結晶毒蛋白,對目標昆蟲以外的生物完全無副作用,是一種既安全無殘毒又環保的植物保護劑蘇力菌是一種昆蟲病原細菌,會產生具有專一性殺蟲效果的結晶毒蛋白,對目標昆蟲以外的生物完全無副作用,是一種既安全無殘毒又環保的植物保護劑

  9. 基因轉殖動物之應用 • 研究DNA在活體中所扮演的角色與功能 • 瀕臨絕種動物之復育 • 生產環保豬:將植酸酶轉移到豬,使豬糞 • 中能少去75%的磷,避免水質優氧化 • 藉由動物乳汁生產高價位醫藥蛋白質 • 異種移植器官的來源:將人類基因轉植入 • 動物體內,減少移植時的排斥 • 生產生物鋼:將蜘蛛的絲基因轉殖到山羊 • 的泌乳基因中,使乳汁中有蜘蛛絲蛋白 • 提高動物抗病力 • 提高動物產質與產能 • 生產創造健康食品

  10. 微生物與生物復育 • 分解多氯聯苯(PCB)、戴奧辛、二氯乙烯(TCE)、二甲苯、2,4-D、DDT等 • 吞食有毒金屬,如汞、鋁、鎘 • 吞食石油,海上拖布 • 產生酒精,取代燃油 • 生物礦化:已有細菌能將廢棄鉛、鋅加以硫化,成礦物微粒(硫化鋅),此法有助於地下水整治,及某些礦石之貯存

  11. 生物晶片 A=TC≡G 生物晶片利用此項原理, 將設計好的核甘酸引子(primer)或探針(probe)以不同的方式排列固定在晶片上, 使得樣本(sample or target)能夠與其反應, 並產生獨特的雜交結果。

  12. 生物晶片雖以“晶片”為名, 其實其材質與半導體矽晶片並無相似之處。 以cDNA生物晶片來說, 其基本載台多半以類似戴玻片的玻璃材質為主流

  13. 睿嘉「豬隻基因檢測晶片套組」係針對高肉質基因(HFABP) 、多產基因 (ESR ) 及緊迫基因 (Hal-1843) 設計之基因型鑑定晶片套組,能快速有效篩選肉質基因的二十七種基因型 (HH6-LL0)、多產基因的三種基因型 (EAA、EAB及EBB) 及緊迫基因的三基因型 (CC、CT及TT)。可幫助育種及現場人員鑑定豬隻肉質與胴體性狀,提升台灣豬肉品質。

  14. 台灣榮總賽亞研發生物晶片 篩檢高膽固醇家族 生物晶片的應用 基因表現的藍圖 毒理學上的分析 基因的定序 單一核醣核酸的多形性的檢定 法醫學上的應用 免疫反應分析 蛋白質晶片 生物武器的偵測 藥物的篩選 電腦硬體上的應用

  15. 心肌梗塞微型生醫晶片檢測系統

  16. 奈米生物晶片:唾液診斷法幫你檢查是否患有心臟病奈米生物晶片:唾液診斷法幫你檢查是否患有心臟病

  17. 環保署環境檢驗所於2008.4月底成功研發出新式生物晶片,為室內空氣品質把關,使得台灣成為第一個研發出空氣品質檢測晶片的國家。環保署環境檢驗所於2008.4月底成功研發出新式生物晶片,為室內空氣品質把關,使得台灣成為第一個研發出空氣品質檢測晶片的國家。

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