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Prote nas totais e s ricas

Prote

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Prote nas totais e s ricas

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Presentation Transcript

    1. Proteínas totais e séricas

    2. Proteínas totais e séricas Proteínas totais Albumina Globulinas

    3. Proteínas totais Existem mais de 300 proteínas diferentes já identificadas no plasma sanguíneo. Apenas algumas são avaliadas rotineiramente Amostras mais usadas: sangue, urina, LCR, líquido amniótico, peritonial, pleural ou sinovial, saliva ou fezes.

    4. Proteínas totais Funções: - transporte - manutenção da pressão coloidosmótica - tamponamento de ?pH - imunidade humoral - atividade enzimática - coagulação - resposta da fase aguda

    5. Proteínas totais A concentração das proteínas plasmáticas é determinada por três fatores: - Velocidade de síntese: A maioria produzida no fígado. Cerca de 25g/dia num indivíduo de 70kgs - Volume de líquido: Cerca de 250g de proteínas são encontradas no compartimento vascular de um homem de 70kgs, dando uma concentração ao redor de 7,0g/dl

    6. Proteínas totais - Velocidade do catabolismo: As proteínas totais são degradadas, liberando aminoácidos para a síntese de proteínas celulares.

    7. Proteínas totais Determinação das proteínas totais: - Método do Biureto: O cobre, em meio alcalino, reage com a ligação peptídica. O produto apresenta bandas de absorção. Interferentes: Substâncias que possam reagir com o íon cúprico. Ex: Bilirrubina aumentada, triglicerídeos acima de 500mg/dl VR soro: 6,0 – 8,0g/dl

    8. Proteínas totais Outros métodos: - Método de Lowry - Método de Bradford - Método de Smith Paciente: Jejum de 8 horas Amostra: soro sem hemólise e não lipêmico

    9. Proteínas totais Hiperproteinemia - Desidratação (vômito, diarréia ou acidose diabética) - Mieloma múltiplo - Cirrose hepática - Hepatite ativa crônica - Lupus eritematoso sistêmico - Infecções bacteriana crônica Hipoproteinemia - Hemodiluição - Perda renal de proteínas - Queimaduras severas -Desnutrição (Kwashiorkor) -Hipertireoidismo -Hemorragia grave

    10. Albumina Representa cerca de 60% das proteínas do plasma humano. Meia vida de 15-19 dias Velocidade de síntese depende da ingestão protéica e regulada por feedback negativo pelo teor de albumina circulante Produção de cerca de 15g/ dia

    11. Albumina Funções - Regulação osmótica - Transporte e armazenamento : Ácidos graxos e esteróides; bilirrubina; fármacos Síntese : no fígado, na forma de pro-albumina. Degradação: mecanismo desconhecido, degradadas aleatoriamente (novas e velhas), provavelmente pelos endotélio dos capilares, medula óssea e sinusóides hepáticos.

    12. Albumina Determinação da albumina - Métodos de corantes: Metil orange, HABA, verde de bromo cresol(VBC) e púrpura de bromocresol VR: 3,5 a 5,5g/dl - Eletroforese - Fracionamento salino

    13. Albumina Paciente : Não consumir dieta rica em gordura por 48hr antes da prova Amostra: soro, observar postura dos pacientes, pois em pacientes ambulatoriais o teor de albumina é cerca de 0,3g/dL maior que em pacientes hospitalizados. Interferências: Elevação? ACO, agentes citotóxicos. Redução ? Paracetamol, aspirina, ACO, ampicilina

    14. Albumina Hiperalbuminemia - É rara - Encontrada em casos de carcinomatose metastática, desidratação aguda, diarréia, estresse, febre reumática, meningite, osteomielites, traumatismo, tuberculose, hemoconcentração, entre outros.

    15. Albumina Hipoalbuminemia - Redução da síntese: Cirrose - Ingestão inadequada de proteínas: A síntese é reduzida a um terço durante um jejum de 24hr - Perda protéica extravascular: Síndrome nefrótica (proteinúria massiva) e enteropatia perdedora de proteínas

    16. Albumina - Queimaduras extensas : a pele é o maior local de armazenamento extravascular da albumina. - Hemodiluição: Ascites, ICC -Estresse - Analbuminemia - Bisalbuminemia

    17. Albumina Conseqüências da hipoalbuminemia - Edema facial, macroglossia, icterícia conjuntival - Bradicardia, hipotensão, cardiomegalia - Hepato-esplenomegalia, ascites - Encefalopatias - Atrofia testicular - Ginecomastia, hipotermia

    18. Fracionamento eletroforético A eletroforese de proteínas (EFP) no soro é uma técnica simples para separar as proteínas do soro. É o teste de triagem mais utilizado para investigação de anormalidades das proteínas séricas. Em condições normais, são separadas cinco bandas do soro: albumina, alfa-1, alfa-2, beta e gamaglobulinas. Eventualmente, pode ser observada a presença da pré-albumina.

    19. Fracionamento eletroforético

    20. Eletroforese

    21. Fracionamento eletroforético

    22. Globulinas Região a1 -Alfa1-antitripsina (AAT) Tem como função a inibição de várias proteases provenientes dos neutrófilos. Proteção contra destruição da parede alveolar VR: 20 - 60µmol/L

    23. Globulinas - Alfa1-glicoproteína ácida(AAG) Tem como função primária inativar a progesterona, alem de interagir com alguma drogas. Aumentada na artrite reumatóide, Lúpus, queimaduras e infarto. O papel exato da AAG não é conhecido -Alfa1-Fetoproteína (AFP) Usada para detectar defeitos de tubo neural em fetos, examinado através do líquido amniótico VR líquido amniótico: 5 a 25mg/dl -Alfa 1- Lipoproteína Transportadora de lipídeos

    24. Globulinas Região a2 -Haptoglobina (HAP)? Transportadora de Hb para o retículo endotelial para ser degradada. Aumentada durante os processos inflamatórios e diminuída em síndromes hemolíticas. - Alfa2-macroglobulina?inibidora de proteases. Aumentada durante a infância e na síndrome nefrótica e está diminuída em hepatopatias crônicas. - Ceruplasmina (CER)?é fixadora de cobre. Está diminuída nas anemias e aumentada em neoplasias malignas; proteína de fase aguda tardia.

    25. Globulinas Região ß1 -Transferritina(TRF)?Transporta o ferro do intestino até a medula óssea. Está aumentada na depleção de ferro e diminuída nas perdas protéicas e hepatopatias crônicas. -Hemopexina (HX) ?Transporta o grupamento Heme até o fígado -Beta-lipoproteína? Transportadora de lipídeos -Complemento C4? Resposta humoral, participa da via clássica do complemento. A deficiência resulta redução da resposta a infecções.

    26. Globulinas Região ß2 - Fibrinogênio? Substrato da trombina, não encontrado em fracionamentos eletroforéticos pois a amostra usada é o soro -Complemento fração C3? Atua na resposta imunológica humoral - Beta2- microglobulina (BMG)? Proteína usada para testar a função tubular renal. Elevada em IR

    27. Globulinas Região ? -Proteína C reativa? Marcador não-específico de lesão tecidual, infecção ou necrose celular associada com infarto ou malignidade VR: 80-800µg/dl

    28. Globulinas Região ? - Imunoglobulinas?Sintetizadas pelo sistema imune em resposta a uma partícula estranha. -Reconhecem,reagem,neutralizam bactérias, vírus e proteínas estranhas. -Constituídas por proteínas com estrutura em y. -4 cadeias: 2 leves(L) e 2 pesadas(H) - Antígeno se liga a região variável das cadeias. - IgG, IgM, IgA, IgD e IgE

    29. Globulinas Imunoglobulinas IgG (1,2,3,4)?85% das Ig totais, atravessa a barreira placentária VR:800-1800mg/dl IgM? 5-10% das Ig totais VR: 50-150mg/dl IgE? importante papel na atopia e imunidade antiparasitária VR:0-0,2mg/dl

    30. Globulinas Hipogamaglobulinemia -Imunodeficiências hereditárias -Imunodeficiência adquirida: neoplasias linfóides, IR, terapia imunossupressiva -Mieloma múltiplo, leucemia linfocítica crônica -Crianças prematuras -Fármacos: Fenitoína, carbamazepina, ác. Valpróico

    31. Globulinas Gamopatias policlonais -Aumentos difusos das gamaglobulinemias -Causado por: lepra, tuberculose, cirrose biliar primária, cirrose portal, hepatite crônica ativa, doença de Crohn, lúpus eritematoso sistêmico Gamopatias monoclonais -Encontrada em: Mieloma múltiplo, macroglobulinemia de Waldenström, doença da cadeia pesada (doença de Franklin)

    32. Globulinas Eletroforese de proteínas séricas em gel de agarose, (1) hipergamaglo-bulinemia em processo inflamatório; (2) e (3): fracionamento normal; (4) gama monoclonal no mieloma múltiplo.

    33. Globulinas Perfis eletroforéticos patológicos: -Mau fornecimento protéico: albumina? , ?1 e ?2?, ??, ?? -Perdas protéicas – Síndrome Nefrótica: albumina?? , ?1?, ?2??, ??, ? (varia) -Hepatite crônica: albumina?, ?? -Hepatite aguda: albumina? ou normal, ?1?, ?2 normal ou ?, ? e ?? -Cirrose: albumina?? , ?1?,?2 normal ou ?, ??, fusão das frações ? e ?

    34. Globulinas

    35. Proteínas totais e séricas Palavras chave - proteínas séricas - albumina - globulina - eletroforese - imunoglobulina Key words - serum proteins - albumin - globulin - electrophoresis - immunoglobulin

    36. Proteínas totais e séricas Bibliografia - Motta, Valter Bioquímica clínica para o laboratório: princípios e interpretações – 4ªed. Porto Alegre: Editora Médica Missau;2003 -Ravel, Richard Laboratório clínico- 6ªed.Rio de Janeiro: Editora Guanabara Koogan; 1997 - Zaia,D.A.M et al Determinação de proteínas totais via espectrofotometria: vantagens e desvantagens dos métodos existentes. Química nova 21(6), 1998. -Laboratório AutoLab. Disponível em: www.laboratorioautolab.com Acesso em 25/07/2007 - LabTest. Disponível em: www.labtest.com.br Acesso em 23/08/2007

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