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龙眼保鲜功能微生物的 筛选与应用. 姓 名: 付 萍 专 业:分子生物学 指导老师:刘波 院长、研究员. 1. 研究背景与总体思路. 龙眼致腐菌的分离及其保鲜功能微生物的筛选. 2. 3. 龙眼果实腐烂过程的生理特性. 4. 保鲜功能微生物对龙眼果实酶活性的影响. 龙眼保鲜功能微生物对龙眼保鲜的应用. 5. 6. 结果与分析. 7. 后续研究. 主 要 内 容. 一、研究背景及总体思路.
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龙眼保鲜功能微生物的筛选与应用 姓 名:付 萍 专 业:分子生物学 指导老师:刘波 院长、研究员
1 研究背景与总体思路 龙眼致腐菌的分离及其保鲜功能微生物的筛选 2 3 龙眼果实腐烂过程的生理特性 4 保鲜功能微生物对龙眼果实酶活性的影响 龙眼保鲜功能微生物对龙眼保鲜的应用 5 6 结果与分析 7 后续研究 主 要 内 容
一、研究背景及总体思路 龙眼产于高温高湿的夏季,采后生理代谢旺盛,鲜果易变色、变质、不耐贮运,在28℃室温下,一周左右全部变质腐烂,严重影响了龙眼的食用和商品价值。找到一种有效的龙眼保鲜方法尤为重要。 采后常温六天
一、研究背景及总体思路 设备条件、操 作技术等限制 水果保鲜方法 低 温 SO2处理和气调保鲜 主要 途径 化学 保鲜 国内研究 较少 生物 保鲜
一、研究背景及总体思路 • 龙眼腐烂的主要原因 产后病害 产后生理 采后生理变化是关键 • 筛选酶的抑制因子 • 应用于田间试验
二、龙眼果实菌的分离及保鲜功能微生物的筛选二、龙眼果实菌的分离及保鲜功能微生物的筛选 • 龙眼果实致腐菌的分离 • 利用传统的平板分离方法从采后龙眼腐烂果实中共分离了54株细菌和11株真菌, 细菌分离 真菌分离
二、龙眼果实菌的分离及保鲜功能微生物的筛选二、龙眼果实菌的分离及保鲜功能微生物的筛选 • 龙眼果实致腐细菌的鉴定
二、龙眼果实菌的分离及保鲜功能微生物的筛选二、龙眼果实菌的分离及保鲜功能微生物的筛选 • 龙眼果实致腐菌拮抗菌的筛选 对峙 作用 抑菌率 抑菌圈 JK-2 5581 JK-2 5581 • JK-2 链霉素 以龙眼致腐菌为指标菌,从芽孢杆菌资源库筛选拮抗菌,最终筛选到两株对龙眼果实致腐真菌和细菌均有拮抗作用的芽孢杆菌“JK-2”,5581。
三、龙眼果实腐烂过程的生理特性 1、龙眼不同等级划分标准 0级 1级 2级 4级 3级 5级
2、龙眼果实不同等级的POD活性 三、龙眼果实腐烂过程的生理特性 龙眼果皮的POD活性 龙眼果肉的POD活性 • 龙眼采后在自然状态下(室温29~30℃ 湿度60~70%),随着龙眼的逐渐腐烂,龙眼果皮、果肉POD活性基本先降低再逐渐升高。
三、龙眼果实腐烂过程的生理特性 3、龙眼果实不同等级的PPO活性 龙眼果皮的PPO活性 龙眼果肉的PPO活性 • 龙眼采后在自然状态下,随着龙眼的逐渐腐烂,龙眼果皮、果肉PPO活性基本逐渐升高。
三、龙眼果实腐烂过程的生理特性 4、龙眼果实不同等级的SOD活性 龙眼果皮的SOD活性 龙眼果肉的SOD活性 • 龙眼采后在自然状态下,随着随着龙眼的腐烂,龙眼果皮、果肉SOD活性基本逐渐降低。 • 龙眼果皮的SOD活性明显高于果肉。
四、保鲜功能微生物对龙眼抗氧化酶系活性的影响 • 使用保鲜剂 JK-2后,龙眼果皮POD和POD活性显著低于对照和保鲜剂5581。 • 龙眼果皮SOD活性显著高于保鲜剂5581,和对照(处理6)相当。 注:处理5:NA液体培养基作对照, 处理6:水做对照
五、龙眼保鲜功能微生物对龙眼保鲜的应用 微生物保鲜剂田间应用
五、龙眼保鲜功能微生物对龙眼保鲜的应用 • 不同保鲜剂处理对龙眼的保鲜效果 • 不同贮存方式对龙眼的保鲜效果 • 不同施用方法对龙眼的保鲜效果 • 测定指标:外观测定,好果、落果数等的调查。计算好果率、脱粒率、可溶性固形物含量的测定
不同保鲜剂处理对龙眼的保鲜效果 五、龙眼保鲜功能微生物对龙眼保鲜的应用 (处理1:9#-5%唏唑醇;处理2:高浓度钙;处理3:JK-2;处理4:对照(CK) • JK-2处理可以显著提高 龙眼果实的好果率 • 可以显著降低龙眼果实的脱粒率。
不同保鲜剂处理对龙眼可溶性固形物含量的影响不同保鲜剂处理对龙眼可溶性固形物含量的影响 五、龙眼保鲜功能微生物对龙眼保鲜的应用 JK-2 较好 (处理1:9#-5%唏唑醇;处理2:高浓度钙;处理3:JK-2;处理4:对照CK)
五、龙眼保鲜功能微生物对龙眼保鲜的应用 不同贮存方式对龙眼的保鲜效果 树叶覆盖 草纸包裹 (处理1:9#-5%唏唑醇;处理2:高浓度钙;处理3:JK-2;处理4:对照CK)
五、龙眼保鲜功能微生物对龙眼保鲜的应用 不同使用方法对龙眼的保鲜效果 • JK-2采后处理的龙眼“福眼”好果率最高,为83.33%,脱粒率最低,为24.42%,可溶性固形物含量与对照相差不大 • JK-2采后处理的龙眼“石硖”好果率最高,为86.67%,脱粒率最低。可溶性固形物含量与对照相差不大。 龙眼品种:福眼 龙眼品种:石硖
六、结果与分析 • 利用传统的抑菌圈、抑菌带的方法筛选到一株对龙眼致腐菌具有很强抑制作用的拮抗菌株JK-2,为短短芽孢杆菌(Breivbacillus brevis)。 • 龙眼采后在自然状态下,随着龙眼的逐渐腐烂,龙眼果实的POD和PPO活性逐渐升高。SOD酶活性降低。 JK-2可以明显降低龙眼果实的POD和PPO活性,提高SOD活性从而达到保鲜的目的。 • 采用纸包裹的龙眼其效果远远好于用树叶覆盖的效果, JK-2采后处理的保鲜效果好于采前处理和对照。
七、后续研究 • JK-2保鲜剂抑制龙眼果皮过氧化物酶POD和多酚氧化酶PPO的活性,这种抑制作用也可能只是表型上的,可能还与其它酶有关,还需要进一步研究。 • JK-2保鲜剂对龙眼的保鲜机理还需要进一步的研究。 • 龙眼微生物保鲜剂对不同时期龙眼成熟度果实的保鲜效果。
致 谢 • 衷心感谢我的导师刘波院长、研究员对我的精心指导,刘波导师严谨的治学态度及认真负责的工作作风,都给我留下了深刻的印象,从他那我学到了很多东西,同时也让我受益匪浅; • 感谢实验室的车建美老师在试验和论文撰写过程中给予的指导和帮助;实验室肖荣风、刘丹莹、林营志、苏明星等工作人员的热心帮助; • 感谢我的同学和实验室的兄弟姐妹们对我试验和生活上的帮助; • 感谢我的父母和家人;