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Projeto Proteoma de Trichoderma stromaticum

Universidade Estadual de Santa Cruz - UESC Departamento de Ciências Biológicas - DCB. Projeto Proteoma de Trichoderma stromaticum. Dr. Marcio G. C. Costa mcosta@labbi.uesc.br. antagonistas fungos fitopatogênicos. simbiontes de plantas. colonizadores de solo. Trichoderma.

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Projeto Proteoma de Trichoderma stromaticum

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Presentation Transcript

  1. Universidade Estadual de Santa Cruz - UESC Departamento de Ciências Biológicas - DCB Projeto Proteoma de Trichoderma stromaticum Dr. Marcio G. C. Costa mcosta@labbi.uesc.br

  2. antagonistas fungos fitopatogênicos simbiontes de plantas colonizadores de solo Trichoderma • Espécies de fungos • Importância do gênero • Secreção de grande quantidade de proteínas • Atividade de biocontrole

  3. Trichoderma • Atividade de biocontrole • Competição por nutrientes e espaço • Antibiose • Micoparasitismo • Resistência induzida na planta hospedeira • Redução da disseminação de esporos • Supressão dos fatores de patogenicidade dos patógenos

  4. Trichoderma • Micoparasitismo • Principal mecanismo de biocontrole • Envolve a produção de enzimas de lise da parede celular • Etapas: • Quimiotropismo • Reconhecimento • Ligação e enrolamento • Penetração na parede celular e digestão do conteúdo celular do hospedeiro

  5. Trichoderma O mecanismo molecular pelo qual Trichoderma reconhece e ataca fungos fitopatogênicos é desconhecido, embora alguns determinantes deste mecanismo têm sido identificados

  6. Objetivo Verificar quais os produtos gênicos de Trichoderma envolvidos na interação com Crinipellis perniciosa utilizando uma abordagem proteômica

  7. Trichoderma x Crinipellis Histórico 1988 Isolamento de Trichoderma de vassouras secas de cacau em Belém, PA (Bastos, 1988) 1988 Identificado inicialmente como Trichoderma viride (Bastos, 1988) 1994 Identificado posteriormente como Trichoderma polysporum (Costa et al., 1996) 1995 Primeiro experimento de campo com Trichoderma na Bahia (Costa et al., 1996) 1999 Inauguração da Unidade de Biocontrole da CEPLAC/CEPEC 2000 Descrito como uma nova espécie de Trichoderma, T. stromaticum (Samuels et al., 2000) 2001 Avaliação de risco ecotoxicológico de T. stromaticum (Castro et al., 2001) 2002 Teste de campo com a nova formulação de T. stromaticum (Tricovab) 2003 Técnica de AFLP demonstrou a ocorrência de dois grupos genéticos distintos de T. stromaticum: Grupo I (Bahia) e Grupo II (Amazônia) (JT de Souza)

  8. Isolados de Trichoderma stromaticum utilizados nos experimentos

  9. Curva de crescimento

  10. Otimização do protocolo de extração de proteínas totais de T. stromaticum para aplicação em eletroforese bidimensional Protocolo Otimizado Protocolo Original

  11. 10 10 3,5 3,5 pI pI kDa 97,0 66,0 45,0 30,0 20,1 14,4 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelo isolado ALF 64 de T. stromaticum crescido em diferentes fontes de carbono Glicose Quitina

  12. 10 10 3,5 3,5 pI pI kDa 97,0 66,0 45,0 30,0 20,1 14,4 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelos isolados ALF 64 e ALF 658 (GII) crescidos em quitina ALF 658 ALF 64

  13. 10 10 3,5 3,5 pI pI kDa 97,0 66,0 45,0 30,0 20,1 14,4 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelos isolados ALF 643 e ALF 647 (GI) crescidos em quitina ALF 647 ALF 643

  14. 10 10 3,5 3,5 pI pI kDa 97,0 66,0 45,0 30,0 20,1 14,4 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelos isolados ALF 64 (GII) e ALF 643 (GI) crescidos em quitina ALF 643 ALF 64

  15. 10 10 3,5 3,5 pI pI kDa 97,0 66,0 45,0 30,0 20,1 14,4 Comparação do perfil de proteínas secretadas pelo isolado ALF 658 crescido em quitina ou parede celular de C. perniciosa como fonte de carbono Parede celular de C. perniciosa Quitina

  16. Agradecimentos Estudantes: Candice M. B. Santos (IC, UESC) Gislaine M. Coelho (IC, UESC) Fernanda B. Cupertino (AT, UESC) Grupo de Pesquisa em Genética e Biologia Molecular (UESC) Colaboradores: Alan Pomella (Almirante Cacau) Dr. Carlos R. Felix (UnB) Dra. Janice Lisboa de Marco (UnB) Dra. Karina P. Gramacho (CEPLAC) Financiamento: Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado da Bahia (FAPESB)

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