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諾貝爾報告 --2008 年諾貝爾生醫獎 -- 發現 HPV 和 HIV

諾貝爾報告 --2008 年諾貝爾生醫獎 -- 發現 HPV 和 HIV. 組別 : 第五組. 組員 : 吳佩璇 B9702025 沈孟暵 B9702025 林威佑 B9702032 何宜軒 B9702006 沈玉華 B9702024 林琬錤 B9702036 林栢生 B9702038 吳東霖 B9702012. 目錄. HPV: 科學家簡介 HPV 簡介 How did he find the HPV ?

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諾貝爾報告 --2008 年諾貝爾生醫獎 -- 發現 HPV 和 HIV

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  1. 諾貝爾報告 --2008年諾貝爾生醫獎 --發現HPV和HIV 組別:第五組 組員:吳佩璇B9702025 沈孟暵B9702025 林威佑B9702032 何宜軒B9702006 沈玉華B9702024 林琬錤B9702036 林栢生B9702038 吳東霖B9702012

  2. 目錄 • HPV: • 科學家簡介 • HPV簡介 • How did he find the HPV ? • HPV病毒E6,E7基因致癌機制 • HPV疫苗 • 2. HIV: • 研究者簡介 • HIV簡介 • 感染機制 • HIV疫苗及其發展

  3. 報告人:吳佩璇 學號:B9702025 主題:科學家簡介

  4. Harald zur Hausen哈拉爾德 楚爾 郝森 • 德國人 • 德國海德堡癌症研究中心的榮譽教授、前主任和科學主管 • 畢生研究乳頭狀瘤病毒 • 獲得2008年生理醫學諾貝爾獎

  5. 貢獻 • 發現致瘤人類乳頭狀瘤病毒(HPV)導致子宮頸癌在子宮頸癌切片發現了可致癌的HPV16、18型病毒 • 發現致瘤人類乳頭狀瘤病毒屬於一個異種病毒家族

  6. 報告人:沈孟暵 學號:B9702025 主題:HPV簡介

  7. HPV簡介 • 至少有70多型 • 感染人類的皮膚及黏膜

  8. 感染方式 • 直接接觸皮膚及黏膜的小傷口感染 • 性接觸 • 新生兒經產道感染 • 摳弄疣

  9. HPV結構 • 種類:DNA病毒 • 大小:45至50nm間 • 病毒體不具套膜為二十面體的殼體 • DNA為雙股環狀

  10. HPV的基因 (A)The early region:E1-8 1.Transcription 2.transformation (B)The late region : L1,L2 1.major (L1) and minor (L2) capsid proteins

  11. HPV的基因 Transforming protein, interacts with growth factor receptors Initiation of DNA replication binds to pRB Transcriptionalregulation/DNA replication binds to p53

  12. L1蛋白和五聚體

  13. Nobel Prize in Physiology or Medicine 2008 How did he find the HPV ? Reporter:林威佑 學號:B9702032

  14. Hybridization He used

  15. Nuclear Acid Hybridization What’s that?

  16. Nuclear Acid Hybridization • combining (1)complementary (2)single‐stranded nucleic acids into a single molecule – a new “hybridized” DNA molecule. ProbeDNA Gene ofinterest Single-strandedDNA from cell

  17. Do you remember? Southern Blotting

  18. Southern Blotting = Nucleic acid hybridization + Gel electrophoresis

  19. Southerrn Blotting Heavyweight I II III Restrictionfragments Nitrocellulosemembrane (blot) DNA + restriction enzyme Gel Sponge Papertowels Alkalinesolution 2 1 3 Preparation of restriction fragments DNA transfer (blotting) Gel electrophoresis Radioactively labeledprobe Probe base-pairswith fragments I II III I II III Fragment Film overblot Fragment Nitrocellulose blot 4 5 Probe detection Hybridization with radioactive probe

  20. Let’s take a look at His research

  21. Problems • Originally, he attempted to find HPV DNA in cervix carcinoma(子宮頸癌) by hybridizing tumor DNA with cRNA from planta wart(足部疣) HPV DNA • But the result is “negative” • He suspected “genetic heterogeneity(異質性)”among HPV DNA type

  22. After problems • He than hybridized samples at *reduced stringency *Reduced stringency: screen for “related” but not “identical(the same)” HPV types • He really found other types of HPV DNA after that

  23. Illustrate-how was the research done? Reduced stringency = with cervical cancer = healthy

  24. After problems • He once found a type called HPV11 • 2 samples from invasive cervix carcinoma showed weak but persistent cross hybridization • This typed was then named HPV16 • Later, HPV18 was also found • HPV16 & HPV18 present in 82% of the patients with invasive cervical cancer

  25. Illustrate-Blot hybridizaition with labeled HPV16 DNA probe (positive) Low stringency High stringency 1.invasively growing cervical carcinomas -(lanes 2, 4, 5, 7, 9), 2.one dysplasia(發育障礙) (lane 6), 3.two carcinomas in situ of the cervix (lanes1 and 5) 4.one vulval(外陰) carcinoma (lane 3) (All above were cleaved by BamHl. )

  26. 報告人:何宜軒 學號:B9702006 主題:HPV病毒E6,E7基因致癌機制

  27. 報告人:吳佩璇 學號:B9702025 主題:HPV疫苗

  28. 子宮頸癌疫苗 • 藍圖 人工培養HPV病毒，減低其毒性或讓其失 去複製的能力，就可當成疫苗注射進人體， 使人體免疫系統記住這個病毒 • 困境 HPV病毒只能存活於活的皮膚或黏膜組織 上，沒辦法人工培養

  29. 子宮頸癌疫苗 • 1984年，德國科學家季斯曼已成功複製出HPV的DNA • 1988年選出一段L1基因到細菌中表現，合成L1蛋白 • 此L1蛋白無法用來組裝HPV殼蛋白 。

  30. 子宮頸癌疫苗 • 利用聚合酶連鎖反應自行複製子宮頸癌病患檢體DNA並從中找出L1基因，然後嵌入酵母菌DNA中，讓酵母菌合成L1蛋白 • 利用比較基因學組學合成出來的L1蛋白可以組裝成HPV的殼蛋白 • 酵母菌合成的L1蛋白就會自行聚合，組成類病毒微粒，為最佳的疫苗材料

  31. 報告人:沈玉華 學號:B9702024 主題:研究者簡介

  32. 研究者 Luc Montagnier Françoise Barré-Sinoussi

  33. Luc Montagnier • 簡介 • 法國病毒學家 • 巴黎巴斯德研究所 • 研究動機

  34. Françoise Barré-Sinoussi • 簡介 • 法國病毒學家 • 主要研究寄主本身對ＡＩＤＳ的自主防禦能力 • 研究動機

  35. 研究實驗

  36. 發現病毒過程 • 早期被誤認為是男同性戀病 • 開始被關注 • 累積流行病學數據→有傳染性致因 • 非同性戀的病例越來越多 • 調查傳染性病原 • 發現新的逆轉錄病毒─IDAV • 觀察到CD4+ T細胞迅速消失 • 1986年統一命名「人類免疫缺陷病毒」（Human Immunodeficiency Virus, HIV

  37. 發現一個新病毒 找到了　壞病毒

  38. 辨識LAV/IDAV和HTLV • 實驗： • 一對有血友病的兄弟　一個有卡波　　　　　西氏肉瘤一個沒有 • 現象：有愛滋病病症的─IDAV • 　　　沒有愛滋病的─HTLV • 差別：特別的p24蛋白質 HIV病毒

  39. 報告人:林琬錤 學號:B9702036 主題:HIV簡介

  40. The Origin of HIV Kinshasa

  41. 演變 • From SIV(Samian Immunodeficiency Virus) • Chimpanzees

  42. Retroviruses • Oncornavirinae致癌病毒亞科(HTLV) • Lentivirinae慢性病毒亞科(HIV) • Spumavirinae泡沫病毒亞科

  43. Lentivirus • enti-, Latin for "slow“ • 和神經及免疫抑制性疾病有關 • deliver a significant amount of genetic information into the DNA of the host cell

  44. HIV(Human Immunodeficiency Virus)$ • 0.1 microns • 72 little spikes proteins gp120 and gp41 • RNAvirus

  45. Retrovirus gene • 9 genes • Gag(group specific antigen)殼體蛋白 • Pol(polymerase)聚合酶、蛋白酶、整合酶 • Env(envelope)醣蛋白

  46. Retrovirus gene • tat • Rev • Nef • Vif • Vpr • vpu control the ability of HIV to infect a cell, produce new copies of virus, or cause disease.

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