dr. Tri Lestari Bagian Patologi Klinik Jurusan Kedokteran FKIK UNSOED

1. Lipid dan Lipoprotein dr. Tri Lestari BagianPatologiKlinik JurusanKedokteran FKIK UNSOED

2. Learning Objectives • Menjelaskan macam-macam parameter pemeriksaan profil lipid : kolesterol, trigliserid, HDL dan LDL • Menjelaskan persiapan sampling penderita dan penanganan sampel pada pemeriksaan profil lipid • Menjelaskan prinsip pemeriksaan profil lipid Referensi : Burtis CA, Ashwood ER. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry. 5th ed. Philadelphia. WB Saunders. 2001 : p 462-493

3. Definisi Lipid adl senyawa yg menghasilkan asam lemak melalui hidrolisis/ kompleks alkohol yg dpt bergabung dgn asam lemak utk membentuk ester • Fungsi • sintesis hormon/prekursor hormon • Membantu pencernaan • Simpanan energi • Komponen fungsional & struktur membran • Sifat tidak larut dalam air, larut dalam pelarut organik

4. KOLESTEROL Dijumpaidiseluruhsel & cairantubuh • Fungsi : • metabolismevit D • Sintesishormon steroid • Metabolismeasamempedu • Sintesis hati & usus >>>, sel organ

5. Struktur kolesterol

6. Kolesterol (dariasupanmakanan) Kolesterolkolesterol ester Bebas >>> kolesterol esterase Usus soluble : • kolesterol ester • asamlemak • monogliserida • fosfolipid • as. empedu conjugated

7. Absorbsi 30% kolesterol diabsorbsi di ileum  + TG, fosfolipid, lipoprotein  kilomikron  pemb limfe  vena Esterifikasi Di dalam sel Acyl coA sintetase Asam lemak-CoASH Acyl-CoA ACAT Acyl-CoA + kolesterol kolesterol ester + CoASH Di plasma LCAT Lecithin+kolesterol kolesterol ester + lysolecithin LCAT : lecithin cholesterol acyltranserase, ACAT : acylcholesterol acyltranserase, CoASH : thio coenzim A

8. Pemeriksaan Persiapanpenderita : • Disarankanpuasa 10-14 jam (bolehtdkpuasa) • Menghentikanmerokok, OR berat • Tidakmendapatobatygmempengaruhikdr lipid 2 mg terakhir • Stabil BB, polamakan, kebiasaanmerokok/kopi/alkohol 2 mg terakhir • Tdksedangstresataupenyakitakut • Saatpengambilansampel : posisiduduk, torniquet < 1 menit

9. Cara pemeriksaan - Jenis sampel : serum atau plasma EDTA serum = 1,03 x plasma EDTA • Prinsip pem : enzimatik kolesterol esterase kolesterol ester + H2O kolesterol+ RCOOH kolesterol oksidase kolesterol + O2 4-cholestone-3-one + H2O2 peroksidase 2H2O2 + 4-aminophenazone+phenol 4-(p-benzoquinone-monoimino)-phenazone + 4H2O (merah) - Sampel  lipemik, ikterik, hemolisis - Nilai rujukan : 140-199 mg/dl (3,63–5,15 mmol/L

10. Penanganan serum lipemik Dihangatkan dengan waterbath 370C Diencerkan dengan NaCl Plasma EDTA  diamkan 16 – 18 jam , 4°C Ultrasentrifugasi

11. Pembentukanketon Kelaparan Gangguanmetab KH  ß oksidase Asamlemakasetylcoenzim A (dihati) as asetoasetat keton bodies ß hidroksibutirat aseton ketosis

12. ASAM LEMAK Td : asamlemakjenuh (saturated) asamlemaktakjenuh (unsaturated) Manusiadptmensintesiskeduanya, kecualiasamlinoleat & asamlinolenik Katabolisme Dalammitokondria oksidasi As lemakenergi

13. GLISERIDA/GLISEROL ESTER Terdiri dr 3 molekul karbon yg berikatan dgn alkohol Terbagi atas : 1. Monogliserida : as lemak terikat pd C1 @ C2 2. Digliserida : as lemak terikat pd C1,2 @ C1,3 3. Trigliserida : as lemak terikat pd C1,2 & 3  paling banyak (95%)

14. Metabolisme lipase TG gliserol + asam lemak Dicerna di duoenum & ileum proksimal Setelah diabsorbsi  resintesa di epitel  TG + kolesterol + apolipoprotein  kilomikron  pemb limfe  duktus thorasikus  vena jugularis

15. Gambaran plasma ≈ kadar TG 200 mg/dl  normal jernih  300 mg/dl  keruh  600 mg  seperti susu

16. PEMERIKSAAN Persiapanpenderita : • Puasa 10-14 jam • Menghentikanmerokok, OR berat • Tidakmendapatobatygmempengaruhikdr lipid 2 mg terakhir • Stabil BB, polamakan, kebiasaanmerokok/kopi/alkohol 2 mg terakhir • Tdksedangstresataupenyakitakut • Saatpengambilansampel : posisiduduk, torniquet < 1 menit

17. Cara pemeriksaan • Sampel : serum @ plasma EDTA • Prinsip pem : enzimatik (lipase) lipase TG + 3H2O gliserol + 3RCOOH gliserol kinase gliserol + ATP gliserol-3-fosfat + ADP GPO gliserol-3-phosphate + O2 dihidroksiaseton fosfat + H2O2 peroksidase H2O2 + 4 aminophenazone + 4-klorofenol 4-(p-benzoquinone-mono-imino)-phenazone + 2H2O + HCl (merah) • Faktor pengganggu : detergent, gliserol, serum lipemik • Nilai rujukan : < 150 mg/dl ( < 1,70 mmol/L) - Jk kadar > 700 mg/dl  encerkan dg NaCl @ plasma EDTA didiamkan 16 – 18 jam , 4°C

18. APOLIPOPROTEIN & LIPOPROTEIN Lipid sulit ditransportasikan krn sifatnya hidrofobik, shg perlu zat hidrofilik yg disebut lipoprotein Apolipoprotein adl protein yang menyusun lipoprotein, td : apolipoprotein A, B, C, D dan E

19. Struktur lipoprotein

20. HDL (High Density Lipoprotein) Komposisi : Lipid : TG 3-6% Phospholipid 20-30% Cholest 3-5% Cholesteryl ester 14-18% Protein 45-50% (Apo A I, A II, C, E) Metabolismebelumjelas dr VLDL ? atau kilomikron?

21. Berperan pd eflux kolesterol dari jar perifer , dibawa ke hepar sbg asam empedu Terdiri dr : - HDL 1 paling kecil molekulnya - HDL 2 & 3 Pemisahan dgn cara : density gradient centrifugation, ion exchange chromatography, ultrasentrifugasi

22. Cara pemeriksaan - Prinsip : mengendapkan VLDL & LDL dgnmetodapresipitasi HDL ygadadisupernatandihitungkadarnya - Sampellipemik  ultrasentrifugasidulu - Nilairujukan : ♂ 35-65 mg/dl ( 0,91-1,68 mmol/L) ♀ 35-80 mg/dl (0,91-2,07 mmol/L)

23. LDL (Low Density Lipoprotein) Katabolisme dihati & jar perifer Pentingutksistesishormon Komposisi : Lipid : TG 8-12% Phospholipid 20-25% Cholest 5-10% Cholesteryl ester 35-40% Protein 20-24% (Apo B)

24. Cara pemeriksaan ♪ Formula Friedewald pemtdklangsung - diukurkolest, TG, HDL  asumsibahwa VLDL = 1/5 TG & kadar TG max 400 mg/dl - Rumus : LDL = kolest – ( HDL + TG/5 ) ♫ Direk diperiksalangsung Nilairujukan : < 130 mg/dl (<3,4 mmol/L)

25. Pemeriksaan Apolipoprotein Metoda imunokimia : ELISA, RIA, FIA, elektroimunoassay  lebih baik Metoda non imunologis : molecular sieve chromatography, iso electric focusing, elektroforesis, poliacrylamide

26. Faktor yang berpengaruh dalam pemeriksaan lipid dan lipoprotein • Puasa  10 – 14 jam (kecuali kolesterol), puasa 12-24 jam utk TG & lipiprotein • Diet & aktivitas spt biasa • Tidak sakit (akut, cedera, operasi) • Tidak menggunakan obat yg mempengaruhi lipid • Tidak tjd penurunan berat badan drastis dlm 4 mg terakhir (BB stabil dlm 2 mg terakhir)

27. Lipid & lipopreteindiperiksa pd seseorangdlmkeadaanstabil Istirahat 5 menitsebelumdiambildarahnya Bendungantorniquetjanganterlalu lama Kolest & TG : plasma EDTA x 1,03 = serum Pemfraksi lipoprotein  mengunakan plasma EDTA

28. DISLIPOPROTEINEMIA Hiperlipoprotein  kriteria Fredricson : 1. Tipe I kilomikron & TG   2. Tipe II : 3. Tipe III  kolesterol & TG   4. Tipe IV  TG & VLDL   5. Tipe V  TG, VLDL, kilomikron  - IIa  VLDL & TG normal IIb  VLDL & TG  - homozigot  kolesterol > 600 mg heterozigot  kolesterol > 300 mg

30. Hipolipoprotein - LDL   hipo β lipoproteinemia  hipo α lipoproteinemia - HDL tdk ada  abetalipoproteinemia - LDL tdk ada  an alfa lipoproteinemia

31. TERAPI • Diet : merupakan tindakan pertama. Cholesterol dan lemak jenuh merupakan faktor utama meningginya kadar lipid darah . • Alkohol meningkatkan VLDL. • Obat : • Resins • HMG-CoA reductase inhibitor, • Release lipoprotein  m/ niacin • Meningkatkan clearance lipoprotein di perifer  m/ gemfibrozil • Bekerja dg cara lain  m/ probucol

32. TERAPI KOMBINASI • Langkah pertama : diet. • Obat tunggal  sulit menurunkan kadar serum hiperlipidemia  perlu kombinasi  menurunkan kadar lipid, toksisitas minimal