1 / 45

εργαστηριακη διαγνωση και ΑΞΙΟΛΟΓΙΣΗ Ι o ΓΕΝΩΝ ΛΟΙΜΩΞΕΩΝ ΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟΥ

ΜΠΟΓΙΑ ΕΥΤΕΡΠΗ ΕΔΕΙΚ/ΜΕΝΗ ΒΙΟΠΑΘΟΛΟΓΙΑΣ ΣΥΝΤΟΝΙΣΤΡΙΑ ΓΚΙΟΥΛΑ ΓΕΩΡΓΙΑ. εργαστηριακη διαγνωση και ΑΞΙΟΛΟΓΙΣΗ Ι o ΓΕΝΩΝ ΛΟΙΜΩΞΕΩΝ ΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟΥ. Λοιμώξεις. Λαρυγγοτραχειοβρογχίτιδα ( croup) Οξεία βρογχίτιδα Οξεία βρογχιολίτιδα Πνευμονία - βρογχοπνευμονία. Κοινό κρυολόγημα Φαρυγγίτιδα

jeroen
Download Presentation

εργαστηριακη διαγνωση και ΑΞΙΟΛΟΓΙΣΗ Ι o ΓΕΝΩΝ ΛΟΙΜΩΞΕΩΝ ΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟΥ

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. ΜΠΟΓΙΑ ΕΥΤΕΡΠΗ ΕΔΕΙΚ/ΜΕΝΗ ΒΙΟΠΑΘΟΛΟΓΙΑΣ ΣΥΝΤΟΝΙΣΤΡΙΑ ΓΚΙΟΥΛΑ ΓΕΩΡΓΙΑ εργαστηριακηδιαγνωση και ΑΞΙΟΛΟΓΙΣΗ ΙoΓΕΝΩΝ ΛΟΙΜΩΞΕΩΝ ΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟΥ

  2. Λοιμώξεις Λαρυγγοτραχειοβρογχίτιδα (croup) Οξεία βρογχίτιδα Οξεία βρογχιολίτιδα Πνευμονία - βρογχοπνευμονία Κοινό κρυολόγημα Φαρυγγίτιδα Αμυγδαλίτιδα Παραρρινοκολπίτιδα - μέση ωτίτιδα Γρίπη

  3. ΓΝΩΣΤΟΙ ΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟΙ ΙΟΙ RNA DNA PICORNAVIRIDAE ΡΙΝΟΪΟΙ ΕΝΤΕΡΟΪΟΙCoxsackie A,B-ECHO ADENOVIRIDAE (1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14) MYXOVIRIDAE ΟΡΘΟΒΛΕΝNΟΪΟΙ Γρίπη Α(Η1),(H2),(Η3), Β, C ΠΑΡΑΒΛΕΝNΟΪΟΙPIV ( 1-3 ) ΠνευμοϊοίRSV CORONAVIRIDAE

  4. ΝΕΟΙΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟΙΙΟΙ PICORNAVIRIDAE Parecho3,4 RNA DNA PARVOVIRIDAE hBoV POLYOMAVIRIDAEBKV (1-4) MYXOVIRIDAE ΟΡΘΟΒΛΕΝΝΟΪΟΙ Γρίπη Α (Η5)(Η7)(Η9) ΠΑΡΑΒΛΕΝΝΟΪΟΙhPIV-4 , Nipah ΠνευμοϊοίhMPV CORONAVIRIDAE SARS coV, NL63, HKU1, OC43, 229E REOVIRIDAEBYD1

  5. Τρόποι εργαστ. διάγν. 4. Μοριακή διάγνωση Εργαστηριακή διάγνωση ιώσεων • Άμεση ή ταχεία διάγνωση • 2. Καλλιέργεια, απομόνωση, τυποποίηση ιών • 3. Ορολογική διάγνωση

  6. Τρόποι άμεσης διάγν.  Ανεύρεση των σωματιδίων του ιού με ηλεκτρονικό μικροσκόπιο.  Ανίχνευση αντιγόνωντου ιού 1.ΑΜΕΣΗή ΤΑΧΕΙΑ διάγνωση

  7. ΤΙΥΛΙΚΟ? Ρινοφαρυγγικό επίχρισμα (swab) ή Ρινοφαρυγγικό έκλπυμα (wash) πτύελα Βρογχικέςεκκρίσειςμεπροστατευμένηβούρτσα(PSB) Βρογχοκυψελιδικόέκπλυμα(BAL):

  8. Πότε? Τα πρώτα 2-3 24ωρααπό την έναρξη των συμπτωμάτων του ασθενούς

  9. ? Ολικό αίμα?

  10. Πολυμορφισμός Γρίππη ΠΟΛΥΜΟΡΦΙΣΜΟΣ Ιοί Γρίππης

  11. Corona Ιοί Corona

  12. SARS SARSCoV

  13. Αδενο Αδενοϊοί

  14. ELISA γνωστό Αb σημασμένο με ένζυμο Υπόστρωμα ενζύμου X ιός (δείγμα) Χρώμα + + ΑΜΕΣΗ ΔΙΑΓΝΩΣΗ :ΑνίχνευσηAgμεELISA Απαιτείται φωτόμετρο

  15. Πολύς λόγος κατά την διάρκεια της πανδημίας. Μέθοδος ανοσοχρωματογραφίας. Χρησιμοποιήθηκαν ευρέως. Από διάφορες μελέτες έχουμε χαμηλά ποσοστά ευαισθησίας. ΆΡΑ:μπορεί να χρησιμοποιηθεί σαν ένα 1οscreening test. Rapid Tests

  16. 2 . Καλλιέργεια Πειραματόζωα Κυτταροκαλλιέργειες Εμβρυοφόρααυγά όρνιθας

  17. Ι . Εμβρυοφόρααυγά όρνιθας για ιούς Γρίπης-Παρωτίτιδας-Έρπητα απλού Ανεμευλογιάς-Ζωστήρα

  18. Επώαση 2ημ.Χ37οC Συλλογή

  19. Ορατή συγκόλληση των ερυθρών Κατάλληλα ερυθρά X ιός + Ανίχνευση Ιώνμε αιμοσυγκόλληση Ιοί Γρίππης, Ερυθράς, Ιλαράς, Παραϊνφλουέντζας κ.ά.

  20. Ανάγνωση αποτελέσματος Αιμοσυγκόλληση

  21. Τυποποίηση ιών Αναστολή αιμοσυγκόλλησης με γνωστό αντίσωμα

  22. - Πρωτογενής κυτταρική σειρά + Κυτταροπαθολογικές αλλοιώσεις MonkeyKidneycells Εμβολιασμός δείγματος Επώαση 3-7 ημέρες + Συνεχής κυτταρική σειρά Madin-DarbyCanineKidneycells - Απουσία κυττ/παθ/κών αλλοιώσεων ΚυΙΙτΙΙτ/καλλ. ΙΙ .ΚΑΛΛΙΕΡΓΕΙΑ ΣΕ ΚΥΤΤΑΡΑ ΚΑΛΛΙΈΡΓΕΙΑ Συλλογή υπερκειμένου υγρού του καλλιεργήματος

  23. Συνεχόμενη σειρά

  24. Ιοί REO Αδενοϊός

  25. Corona σε Vero

  26. Ιός RS HΕp-2

  27. Τίτλος 3 . Ορολογική διάγνωση Ιώσεων

  28. Ορισμός ΠΟΥ ; ΟΡΟΣ ΑΙΜΑΤΟΣ Ορολογική διάγνωση Ανίχνευση αντισωμάτων =

  29. Τι Αb; Τι αντισώματα ;

  30. Πορεία IgM, IgG IgM ; IgG ; Ολικά ;

  31. Πρόσφ. λοίμ. Πρόσφατηλοίμωξη: IgM Ένα δείγμα  Θετικό ή ≥ 4πλάσια αύξηση Αναστολή αιμοσυγκόλησης 2 δείγματα σε 2 εβδομάδες Δύο δείγματα με διαφορά ~2 εβδ ΟΛΙΚΑ ΑΝΤΙΣΩΜΑΤΑ :  IgG

  32. Παλιά λοίμ. Παλιά λοίμωξη: IgM Αρνητικά Δύο δείγματα με διαφορά ~2εβδ. 4πλάσια αύξηση ή και καμία IgG 

  33. 4.Μοριακέςτεχνικές Στόχος  Γενετικό Υλικό

  34. ΤΙΥΛΙΚΟ? Πτύελα Βρογχικέςεκκρίσεις μεπροστατευμένηβούρτσα (PSB) Βρογχοκυψελιδικόέκπλυμα (BAL) Ρινοφαρυγγικό επίχρισμα (swab) ή έκλπυμα(wash)

  35. Πότε? Τα πρώτα 2-3 24ωρα από την έναρξη των συμπτωμάτων.

  36. Μοριακά Προσοχή ΠΡΟΣΟΧΗ ! ( ΜΟΡΙΑΚΕΣ ΤΕΧΝΙΚΕΣ) Λήψη, μεταφορά, συντήρηση κατάλληλου δείγματος (2 το πολύ 3 24ωρα στην κοινή ψύξη). Απολύμανση χώρου Διαφορετικοί χώροι για απομόνωση & πολλαπλασιασμό γενετικού υλικού Επιλογή κατάλληλων εκκινητών(primers) Χρήση θετικών & αρνητικών μαρτύρων

  37. Αρχή της PCR Αρχή μεθόδου PCR

  38. Reverse-transcription Reverse Transcription Μετατροπή RNA σε cDNΑ Ανάστροφη μεταγραφή Ένζυμο : Ανάστροφη μεταγραφάση

  39. MultiplexPCR

  40. REAL TIME PCR RT-PCR για A(H1N1) Γονίδιο της μητρικής πρωτεΐνης νουκλεοπρωτεΐνης αιμοσυγκολλητίνης

  41. Ανάλυση αλληλουχίας γωνιδιώματος(SEQUENCE ) προϊόντων της PCR α pp • Αρκετά εξειδικευμένα διαγνωστικά κέντρα δεν σταματούν σ ‘αυτό το σημείο( αρνητικό ή θετικό δείγμα) αλλά συνεχίζουν με την ανάλυση του γωνιδιώματος με στόχο: • Επιδημιολογική διερεύνηση στελεχών. • Ανεύρεση τυχόν μεταλλαγμένων στελεχών • Ταυτοποίηση νέων παθογόνων • Σύγκριση με τα υπάρχοντα στελέχη και διαφορές • από τα στελέχη που συμπεριλαμβάνονται στα εμβόλια .

More Related