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微生物快速检测系统

微生物快速检测系统. Bactrac 4300. 常规微生物检测. 细菌总数 大肠菌群 酵母菌数 霉菌总数 乳酸菌数 …………. 企业为什么需要常规微生物快速检测？. 市场销售环节要求快速出货。尤其是一些保质期较短的产品。 减少物流的压力，尽可能减少仓存，加快资金周转 节约人力资源成本（这在国外尤其突出） 对于运行 HACCP 质量保证体系的企业来说，快速检测方法尤其重要。. 目前市场上常见的常规微生物快速检测方法. 各种预制琼脂平板、纸片、显色培养基等。如3 M， 法国的科码嘉等。 电化学方法－ SY-LAB( 欧洲最好的定量快速检测常规微生物的方法） 。

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微生物快速检测系统

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Presentation Transcript

  1. 微生物快速检测系统 Bactrac 4300

  2. 常规微生物检测 • 细菌总数 • 大肠菌群 • 酵母菌数 • 霉菌总数 • 乳酸菌数 • ………….

  3. 企业为什么需要常规微生物快速检测？ • 市场销售环节要求快速出货。尤其是一些保质期较短的产品。 • 减少物流的压力，尽可能减少仓存，加快资金周转 • 节约人力资源成本（这在国外尤其突出） • 对于运行HACCP质量保证体系的企业来说，快速检测方法尤其重要。

  4. 目前市场上常见的常规微生物快速检测方法 • 各种预制琼脂平板、纸片、显色培养基等。如3M，法国的科码嘉等。 • 电化学方法－SY-LAB(欧洲最好的定量快速检测常规微生物的方法） 。 • ATP法：用做过程监控及成品检测。如CHARM,Biotrace,Celsis,Promicol

  5. Sy-lab快速检测技术的原理 • 微生物生长过程，将大分子的营养物质如蛋白质、糖类等降解成小分子的单糖或双糖，并且进一步代谢产生许多带电离子，导致培养基电导率变化，电信号经放大后显示并记录。 • 检测系统每10分钟检测一次电导率的变化。 • 同一类微生物利用同一配方的培养基，其变化曲线是基本一致的。因此只要用已知菌数的样品先做好标准曲线，就可以达到快速定量检测菌数的目的。 • 计算机实时监控并自动给出结果

  6. 微生物生长与电导率变化的典型曲线 电导率单位 稳定期 界限值 对数期 Detection Time (DT)

  7. 2种电导率的变化曲线 电极电导率信号更强，灵敏度更高

  8. 结果重现性好

  9. 菌数与临界点的培养时间（DT）呈线性倒数关系菌数与临界点的培养时间（DT）呈线性倒数关系 • DT与样品中的菌数呈线性倒数关系 • 校准曲线表示菌数与DT的关系 • 校准时，计算机线性回归软件自动计算线性回归方程及相关系数 (R)

  10. 校准曲线 大肠菌群－－原奶 细菌总数－－原奶

  11. 关键技术－培养瓶和培养基 培养瓶分可反复使用和一次性的2种。培养瓶底部已经固化了2种电极，用用于测量培养基电导率和电极电导率。 培养基可选用专用干燥培养基或已经分装灭菌好的培养基。

  12. 与传统的平板培养法比较 • 一个微生物要形成一个肉眼可见的菌落必须生长到108－109个。而用电导率测定方法，一个微生物生长到106－107个时，就可以明显测量出电导率的变化。因此电导率方法更省时、更灵敏。

  13. 与其它同类产品比较 • 目前市场上同类产品只测量培养基电导率的变化。培养基电导率有时会受样品的浓度、浊度及杂质的干扰。 • Sy-lab同时测量培养基电导率（M值）和电极电导率（E值）。电极电导率更灵敏，时间更快。两条曲线比一条曲线更准确，更安全。

  14. 灵敏度 • 上限: 106-107 • 下限: 1 个/瓶子 • 例如: • 1:10 稀释, 1 ml = 10 org/g（取样量为1mL时） • 1:10 稀释, 5 ml = 2 org/g （取样量为5mL时） • 液体样品, 1 ml = 1 org/ml （取样量为1mL时） • 液体样品, 5 ml = 0.2 org/ml （取样量为5mL时）

  15. 培养基特点 • 10－20 ml 容量 • 样品量1－5mL • 不同检测项目使用不同培养基 • 培养基无需冷藏（一次性瓶子） • 无需制备培养基（一次性瓶子） • 样品无需梯度稀释 • 无需倾注平板 • 培养基无需进行QC

  16. 嗜冷菌 嗜温菌 嗜热菌 革兰氏阴性菌 肠杆菌 肠球菌 乳酸杆菌 大肠杆菌 大肠菌群 枯草芽胞杆菌 酵母和霉菌总数 目前可用的检测项目 沙门氏菌 李斯特菌 金黄色葡萄球菌 啤酒污染菌 梭菌 好氧产孢菌

  17. 通过的认证 Austria澳地利官方认证 ÖNORM-DIN 10115General Impedance Standard, part of the official Codex for testing of foods C.I.S.GHOSSTANDARDSTATE SANITARY SURVEILLANCE ORGANISATION, approved method

  18. 通过的认证 France　法国官方认证AFNOR, NF V08-105for the use of impedance technology in the ananlysis of food and animal feeds　　食品或动物饲料AFNOR NF V08-106impedance detection of E.coli in seafood　海产品中大肠杆菌 Germany德国官方认证 　 DIN Standards and §35 LMBG official method for foodsDIN 10115 General Impedance Standard, §35 LMBG: L00.00-53DIN 10120 Salmonella Standard, §35 LMBG: L00.00-67E DIN 10122 Enumeration of microorganisms by means of impedance method-Determination of aerobic mesophile bacterial count (draft standard) United Kingdom　英国认证 　The processed Animal Protein Order 1989, Salmonella in animal feeding stuffs

  19. 发表的相关文献40多篇 • (1) • Asperger, H. & Pless, P. (1994): Zum Salmonellennachweis in K鋝e - Methodenvergleich unter besonderer Ber點ksichtigung der Begleitfloraproblematik. Wien. Tier鋜tl. Mschr. 81, 12-17. • (2) • Baumgart, J., Sieker, S. & Vogelsang, B. (1994): Listeria monozytogenes in Hackfleisch. Nachweis mit der Impedanz-Methode und einem neuen Selektivmedium. Fleischwirtschaft 74, 647-648. • (3) • Colquhoun, K.O., Timms, S. & Fricker, C.R. (1995): Detection of Escherichia coli in potable water using direct impedance technology. J. Appl. Bacteriol. 79, 635-639. • (4) • Curda, L., Plockova, M. & Svirakova, E. (1995): Growth of Lactococcus lactis in the presence of nisin evaluated by impedance method. Chem. Mikrobiol. Technol. Lebensm. 17 (1/2), 53-57. • ........................... • (44) • Parkar, S.G., Flint, S.H., Brooks, J.D. (2004): Evaluation of the effect of cleaning regimes on biofilms of thermophilic bacilli on stainless steel: Journal of Applied Microbiology 96, 110-116.

  20. 快速检测项目与时间 1、获取定量结果的时间与初始菌数有关。初始菌数越高，越快获取结果。 2、一般细菌的检测时间是2－24小时。酵母和霉菌的检测时间为1－2天。

  21. 型号之一- Bactrac 4300 • 64 个检测位置同时监控 • 2个温度加热单元，分开控温 • 专用键盘控制温度 • 温度范围 0－65 0C • 适用于检测量大且检测项目多的用户

  22. 型号之二- μ-trac 4200 • 最多同时放21个样品 • 单个培养箱 • 温度范围 0-56 0C • 适用于样品量不大且检测项目较单一的用户。更适合研究用。

  23. 测试容量可调整 • 一台计算机最多可以台同时控制12台Bactrac 4300,　达到768个检测量 • 可重复使用的样品管为10mL装，标准的样品量为1mL，但可以灵活调整至5mL加样量 • 一次性样品管容量为20mL。 • 可以灵活组合

  24. 功能强大的应用软件支持 • 基于Windows系统的软件，即插即用 • 自动读数及贮存数据 • 直观显示检测结果 • 数据可输出用其它软件进行统计及趋势分析

  25. 三个简单的步骤 • 加样品至培养管 • 将培养管放入仪器 • 启动程序，输入相关参数，仪器自动监测并给出结果。 当遇到微生物超标的样品，仪器自动报警

  26. 与传统的平板法比较 平板计数法： 必须制作很多平板 样品必须进行梯度稀释 必须逐个倾注平板 必须逐个进行计数，按 CFU/g计数

  27. 节省人力资源

  28. 特点总结 • 1）电导率检测方法是世界上公认的成熟的检测方法 • 2）灵敏度高。最小可检测出1个/mL(克)样品。 • 3）检测速度快。当样品含菌量越高时，出结果越快。 • 4）检测步骤简单，厂家提供特殊配方的培养基，您只需将样品加入培养基中，放入仪器，然后启动程序即可自动出结果。对于液体样品无需任何前处理，固体样品只需进行必要的均质和稀释即可。不需要将样品进行梯度稀释，不需要人工计数，一个人即可完成每天繁琐的微生物检测工作，省时省力。 • 5）针对中国市场，厂家可以只提供干粉培养基，单次检测成本只需3－10元/测试。 • 6）基于Window界面的智能化软件，自动化程度高； 　7）该方法通过欧洲各国的认证。

  29. 用　途 • TVC determinations　总活菌数检测 • pathogen screening　致病菌初筛 • sterility tests　消毒测试 • identification and enumeration of index and indicator organisms • environmental monitoring 环境监测 • preservative efficacy testing　防腐效果测试 • inhibitor tests and microbial bioassays　抑菌测试及生物测定 • evaluation of sterilisation processes　消毒方法评价 • inactivation studies　灭活研究 • antimicrobial agent screening and characterization抗菌素初筛及描述 • toxicity and mutagenicity tests　毒性及诱变测试 • activity and vitality tests　活力测试

  30. 主要客户 • Food- Cosmetic-and Pharmaceutical industry 食品、化妆品及药品加工业 • Control laboratories　控制实验室 • Biotechnology and Environmental testing 生物技术及环境测试 • Research laboratories　研究实验室

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