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Impact des traitements préventifs sur le diagnostic chez le nouveau-né

Impact des traitements préventifs sur le diagnostic chez le nouveau-né. Laboratoire de Virologie, Hopital Necker. Conséquences d’un traitement anti-viral sur le virus circulant. Traitement antiviral. Absent. Totalement efficace. LYMPHOCYTES: PCR ADN VIH. PCR ADN VIH. ADN du virus latent.

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Impact des traitements préventifs sur le diagnostic chez le nouveau-né

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  1. Impact des traitements préventifs sur le diagnostic chez le nouveau-né Laboratoire de Virologie, Hopital Necker EPF assemblée générale du 24/10/2003

  2. Conséquences d’un traitement anti-viral sur le virus circulant Traitement antiviral Absent Totalement efficace LYMPHOCYTES: PCR ADN VIH PCR ADN VIH ADN du virus latent ADN du virus latent ADN du virus en cours de réplication PCR ARN VIH: négative PLASMA: PCR ARN VIH EPF assemblée générale du 24/10/2003

  3. Objectif • Evaluer l’influence du traitement anti-viral préventif de la mere et de l’enfant sur la capacité à détecter le virus • à la naissance et à 1 mois • par PCR ADN VIH dans les lymphocytes et PCR ARN VIH dans le plasma. • Comparer ces resultats au diagnostic fait chez les enfants nés avant 1994 • Détection du VIH à la naissance chez 30-40% des enfants infectés signant une infection in utero. • Détection du VIH à 1 mois chez 100%. EPF assemblée générale du 24/10/2003

  4. Patients et méthodes • 67 enfants infectés nés depuis 1994 dont les prélèvements ont été reçus à Necker. • 40 nouveau-nés prélevés avant 7 jours dont la mère avait été traitée pendant la grossesse • 60 enfants prélevés à l’age de 1 mois (+/- 2 semaines) durant le traitement préventif. • PCR ADN VIH dans les lymphocytes, gène LTR, PCR en temps réel Taqman • PCR ARN VIH plasmatique, Roche, gène gag (meme technique que charge virale). EPF assemblée générale du 24/10/2003

  5. Naissance ADN VIH lymphos Positive Negative ARN VIH Plasma Positive 21 2 Negative 1 16 • Sensibilité équivalente de la PCR ADN VIH (58%) et de la PCR ARN VIH (55%). • Virémie positive signant une infection in utero chez 60% des enfants infectés. • En fonction du traitement de la mère par AZT seul (26) ou par bi ou tri-thérapie (14) • Même fréquence d’infections in utero • Même Sensibilité de la PCR ADN VIH et de la PCR ARN VIH. EPF assemblée générale du 24/10/2003

  6. 6 5,5 5 4,6 4,5 4 3,5 3 3 2,5 2 1,5 ZDV Dual / Triple Therapy Mother therapy Median value ARN VIH plasmatique chez le nouveau-né infecté in utero • Fréquence des valeurs faibles: 29% < 1000 copies/ml • Charge virale plus faible lorsque la mère a été traitée par bi ou tritherapie que par AZT seul (Mann-Whitney, p 0,01) Plasma HIV RNA (log) EPF assemblée générale du 24/10/2003

  7. A l’age de 1 mois ADN HIV lymphos Positive Negative ARN HIV plasma Positive 50 1 Negative 3 6 • 6 enfants infectés (10%) non détectés par aucune des 2 méthodes. • Seulement 83% des enfants infectés sont détectés par les 2 méthodes. (100% en l’absence de traitement préventif). EPF assemblée générale du 24/10/2003

  8. Moins bonne sensibilité de l’ARN VIH en cas de bi/tri-thérapie préventive à 1 mois ADN HIV Lymphos • AZT (53) Positive Negative ARN HIV PlasmaSensibilité ARN Positive 46 1 89% Negative 1 5 Sensiilité ADN 89% • Bi/tri-therapie (7) Positive Negative ARN HIV PlasmaSensibilité ARN Positive 4 0 57% Negative 2 1 Sensiilité ADN 86% EPF assemblée générale du 24/10/2003

  9. A l’age de 3 mois • 10 enfants avec difficultés de diagnostic: Réplication virale importante apres l’arret du traitement préventif • PCR ADN VIH: Positive 10/10 • ARN VIH plasmatique élevé: • Médiane 300 000 copies/ml • Minimum: 10 000 copies/ml EPF assemblée générale du 24/10/2003

  10. Exemples de problèmes de diagnostic • Rachel, née en 2000, à 32 sa, apres rupture prolongée poche, • mère: AZT à partir de 25 sa, NVP; • enfant: AZT jusqu’à J45; NVP à J2 • 3 prélèvements à J3, J16 et J30 PCR ADN VIH négative et PCR ARN VIH négative (<50 copies/ml) • à J93: PCR ADN VIH positive et ARN VIH=70 000 copies/ml. • Marvin, né en 97, à 37 sa • Mère: AZT (17 sa) + 3TC (33 sa) • Enfant AZT+3TC jusqu’à J62 • J4: PCR ADN VIH Positive, ARN VIH plasma. 480 copies/ml • 3 prélèvements à J31, J41 et J65 PCR ADN VIH négative et PCR ARN VIH négative (<50 copies/ml) • à J93: PCR ADN VIH positive et ARN VIH=2 800 000 copies/ml. EPF assemblée générale du 24/10/2003

  11. Conclusions • A l’age de 1 mois, le traitement préventif empéche la détection de 10% des enfants infectés, même en cas de monotherapie par AZT. • Importance des 2 prélèvements testés en PCR apres un délai de 3-4 semaines apres l’arret du traitement préventif. • La PCR ADN VIH dans les lymphos et la PCR ARN VIH dans le plasma ont la même sensibilité à la naissance et à 1 mois, sauf à 1 mois pendant un traitement par bi ou tri-thérapie (PCR ARN VIH: sensibilité 57%). • La sensibilité diagnostique peut se modifier si des traitements antiviraux plus puissants sont donnés à l’enfant. • Dans cette série: fréquence élevée d’infections in utero (60%), semblant differente de l’histoire naturelle : 30-40%. L’exploration des facteurs maternels est en cours. EPF assemblée générale du 24/10/2003

  12. 2° difficulté: Virus non-B • 70% des enfants nés de mère d’origine Africaine • Afrique: Virus tres hétérogene (10 sous-types non-B) Europe et USA: virus beaucoup plus homogene : 1 sous-type HIV-1 majoritaire: B • Fréquence croissante des infections à virus non-B en France: 24% des primo-infections en 2002. • PCR: région tres conservée du genome mais il n’esxiste pas de PCR qui permette de détecter 100% des virus (LTR: 98%) • Pour éviter les faux négatifs par non-détection du virus maternel • PCR faite dans 2 régions différentes • PCR ADN chez mere (ARN VIH plasmatique négatif) à l’accouchement. • Controle de la négativation de la sérologie à 18 mois. EPF assemblée générale du 24/10/2003

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