医学微生物学实验四

医学微生物学实验四

主要内容： • 录像（肠道杆菌分离与鉴定) • 肠道杆菌形态、培养特性及生化反应 • 粪便标本分离与鉴定 • 肥达氏反应

一、肠道杆菌形态、培养特性及生化 反应 1. 形态: 大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌 2. 培养（中国兰平板）大肠杆菌、变形杆菌、伤寒杆菌、乙型副伤寒杆菌、痢疾杆菌

3. 生化反应：（示） 双糖铁基培养基尿素培养基蛋白胨水培养基

双糖铁基培养基 固体斜面培养基半固体培养基

成分： 硫酸亚铁铵硫代硫酸钠乳糖酚红 H2S试验乳糖发酵试验

成分： 琼脂(0.35%)(动力观察) 蛋白胨水葡萄糖酚红葡萄糖发酵试验

3. 生化反应：（示） 双糖铁基培养基尿素培养基蛋白胨水培养基

尿素培养基 ★　成份：20%尿素水溶液 0.6%酚红溶液 ★　原理尿素酶分解尿素产氨气

二、肠道杆菌分离鉴定步骤

细菌检查常用的鉴定方法： 镜检（ G+球菌）培养（ G+球菌）生化反应（ G-杆菌）血清学诊断动物实验核酸诊断等快速诊断

二、肠道杆菌分离鉴定步骤 1.粪便→中国兰平板兰色、较大、不透明菌落----- 大肠菌无色、较小，半透明菌落----- 致病菌 2.生化试验：双糖铁基、尿素、吲哚 3.血清诊断

三、肥达氏反应 1.原理：根据凝集反应的原理，用已知的标准菌液（伤寒杆菌菌体及鞭毛抗原，甲型副伤寒杆菌鞭毛抗原及乙型副伤寒杆菌鞭毛抗原）测定病人血清中有无相应抗体存在，以协助伤寒，副伤寒病的诊断。

2.抗原：伤寒菌“O”、伤寒菌“H”、 副甲“H”、副乙“H” 3.方法

1:1280 1:1280 1:1280 1:1280 1:2560 1:2560 1:2560 1:40 1:40 1:40 1:40 1:80 1:80 1:80 1:80 1:160 1:160 1:160 1:160 1:320 1:320 1:320 1:320 1:640 1:640 1:640 1:640 O抗原伤寒H抗原副甲H抗原 1:2560 副乙H抗原

4.凝集判断（上清液、沉淀） “＋＋＋＋”：强，完全凝集，液体澄清，轻摇大片凝集块。 “＋＋＋”：大部分凝集，液体轻度浑浊，凝集块小。 “＋＋”：中强，部分凝集，液体半澄清，凝集块颗粒状。 “＋”：弱，少量凝集，液体浑浊。 “－”：不凝集，液体浑浊，和对照相同。

+++ ++++

++ +++ —

++++ —

++++ +++ —

5、凝集效价 • 能出现明显凝集（++）的血清最高稀释度 • 例： • 测定某病人O凝集效价结果如下： 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560 ++++ +++ +++ ++ ++ + --

IgG IgM • 6.结果分析 • 正常抗体水平 • O与H抗体在诊断上的意义： H抗体 O抗体

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