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林洁 南方医科大学基础医学院病理学系 南方医科大学南方医院病理科

结直肠癌 Tiam1 高表达与其启动子低甲基化相关. 林洁 南方医科大学基础医学院病理学系 南方医科大学南方医院病理科. 背景 Tiam1: T 淋巴瘤侵袭转移诱导因子 1 Tiam1 与肿瘤 的增殖、侵袭和转移 Tiam1 的表达调控机制尚未完全阐明 表观遗传学： DNA 异常甲基化. 蓝色区域为 CpG 岛，该 CpG 岛长 2183bp ，跨越启动子和第一外显子，存在 256 个 CpG 位点. Tiam1 基因 5’ 端 CpG 岛预测.

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Presentation Transcript

  1. 结直肠癌Tiam1高表达与其启动子低甲基化相关 林洁 南方医科大学基础医学院病理学系 南方医科大学南方医院病理科

  2. 背景 Tiam1: T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1 Tiam1与肿瘤的增殖、侵袭和转移 Tiam1的表达调控机制尚未完全阐明 表观遗传学：DNA异常甲基化

  3. 蓝色区域为CpG岛，该CpG岛长2183bp，跨越启动子和第一外显子，存在256个CpG位点蓝色区域为CpG岛，该CpG岛长2183bp，跨越启动子和第一外显子，存在256个CpG位点 Tiam1基因5’端CpG岛预测

  4. marker 1 2 3 c GAPDH(580bp) Tiam1(252bp) 去甲基化药物处理HT29细胞前后Tiam1 mRNA表达 1.SW620 2.HT29(5-aza-dC ) 3.HT29(对照 ) C.空白对照

  5. Ⅰ. 116例配对结直肠癌组织中 Tiam1蛋白的表达

  6. *Z= -4.608，P＝0.000 #Z＝-3.115，P＝0.002 Tiam1蛋白在结直肠癌配对组织中的表达分布

  7. Z＝-2.584，P＝0.01 Tiam1蛋白表达与结直肠癌转移的关系

  8. Tiam1蛋白在癌组织中的表达与临床病理资料之间的关系Tiam1蛋白在癌组织中的表达与临床病理资料之间的关系

  9. Ⅱ. 结直肠癌组织中 Tiam1基因异常甲基化的研究

  10. MSP原理

  11. C M U 2n 2t 12n 12t 31n 31t 48n 48t 83n83t116n116t m u 2 12 31 48 83 116 n t 部分配对组织中Tiam1 DNA甲基化及其蛋白表达情况

  12. MSP扩增产物测序部分结果 m u o o.未转化的原始序列 m.甲基化引物扩增产物 u.未甲基化引物扩增产物

  13. r=-0.494, P<0.001 116例配对组织中Tiam1基因的甲基化状况 Z= -2.244, P=0.025 232例组织中Tiam1蛋白表达与甲基化之间的相关性

  14. 肿瘤组织Tiam1甲基化状态与临床病理资料之间的关系肿瘤组织Tiam1甲基化状态与临床病理资料之间的关系

  15. Ⅲ. 结直肠癌细胞株中 Tiam1基因异常甲基化的研究

  16. Tiam1高表达结直肠癌细胞株：LoVo细胞、 SW620细胞 Tiam1低表达结直肠癌细胞株：LS174T细胞 Tiam1不表达结直肠癌细胞株： HT29 细胞

  17. 1 2 3 4 c marker GAPDH(580bp) Tiam1(252bp) 5-aza-dC处理对Tiam1 mRNA在HT29及LS174T中表达的影响 LS174T (+) LS174T (-) HT29 (+) HT29 (-) 5-aza-dC

  18. 免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对HT29细胞中Tiam1蛋白表达的影响免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对HT29细胞中Tiam1蛋白表达的影响 5-aza-dC（-） X200 5-aza-dC（+） X200

  19. 免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对LS174T细胞中Tiam1蛋白表达的影响免疫细胞化学检测5-aza-dC处理对LS174T细胞中Tiam1蛋白表达的影响 5-aza-dC（-） X200 5-aza-dC（+） X200

  20. 1 2 3 4 5 6 Tiam1 GAPDH Western blot法检测5-aza-dC处理对HT29、LS174T细胞中Tiam1蛋白表达的影响 1.SW620 2.HT29 3. HT29(5-aza-dC) 4.SW620 5.LS174T 6.LS174T (5-aza-dC)

  21. Tiam1是一种促进结直肠癌增殖及转移的重要基因Tiam1是一种促进结直肠癌增殖及转移的重要基因 DNA异常甲基化可能是结直肠癌Tiam1基因表达改变的重要调控机制之一 结论

  22. 致谢： 丁彦青教授 李建明教授 金贺博士 张香梅博士 李婷婷硕士 谢谢！

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