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第二章 核酸

第二章 核酸. ◆ 第一节 核酸通论 ◆ 第二节 核酸的组成 ◆ 第三节 核酸的结构 ◆ 第四节 核酸的性质. 第二章 核酸. Nucleic Acid. 一、核酸的发现和研究简史 1 、早期的发现 2 、核酸化学的研究 3 、 DNA 双螺旋结构模型的提出建立了统一的分子生物学 4 、 DNA 重组技术带来生物技术重大突破 5 、当前生命科学已进入后基因组的时代. 第一节、 核酸通论.

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第二章 核酸

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  1. 第二章 核酸 • ◆第一节 核酸通论 • ◆第二节 核酸的组成 • ◆第三节 核酸的结构 • ◆第四节 核酸的性质

  2. 第二章 核酸 Nucleic Acid

  3. 一、核酸的发现和研究简史 1 、早期的发现 2 、核酸化学的研究 3、DNA 双螺旋结构模型的提出建立了统一的分子生物学 4、DNA 重组技术带来生物技术重大突破 5 、当前生命科学已进入后基因组的时代 第一节、核酸通论

  4. 1868 － 69 F. Miescher从脓细胞核中提出含 磷量高的 核素（nuclein），其后从鲑鱼精子中提取出鱼精蛋白和核素。 1885 0. Hertwig提出核素可能负责受精和遗传。 1889 R. Altmann从酵母和动物组织中提取出不含蛋白质的核酸。 1894. Kossel和A. Neumann 从胸腺中提取 核酸，表明胸腺核酸与酵母核酸不同。 Hammars 证明酵母核酸中的糖是戊糖。 （一）、早期的发现

  5. 1902 E. Fischer研究糖和嘌呤而获诺贝尔化学奖。 核酸中的嘌呤和嘧啶主要由Kossel等人所鉴 定。 1909 P. A. Levene 和 W. A. 等人鉴定 D-核糖。 1910 Kossel 因核酸化学研究中的成就而获诺贝尔 生理学奖。 1912 P. A. Levene 认为核酸由四种核苷酸等量聚 合而成。 1929 Levene 确定胸腺核酸中的糖是 D-2-脱氧核糖。 （二）、核酸化学的研究

  6. 1931 Levene 在 “Nucleic 酸” 一书中仍主张核酸 分为动物核酸（ zoonucleic 酸）和植物核 酸 （ phytonucleic 酸）。 1933 J. Brachet发展了组织化学的方法。 1938 T. Caspersson显微紫外分光光度技术。 1943 J. N. Davidson 用化学分析方法支持上述组 织化学和紫外分光光度法得出的结论：动、 植物组织均含有两类核酸。 1946 E. Chargaff测定了DNA碱基，提出Chargaff 法则。 （三）、核酸化学的研究

  7. 1944 T. Avery 肺炎双球菌转化实验。 1952. Hershey证明噬菌体感染时只有 DNA 进入细菌 细胞。 1953 J. D. Watson 和 F。 H. C。 Crick提出DNA双螺旋结构模型。1962年与M. H. F. Wilkins 共获诺贝尔生理学奖。 1969 年噬菌体小组的 M. Delbrük、A. D. Hershey和S. E。 Luria也获诺贝尔奖。 1958 M. Meselson和F. W. Stahl用超速离心同位素 标记的DNA，证明了DNA的双螺旋结构。 F. H. C.Crick提出中心法则。 （四）、DNA 双螺旋结构模型的提出建立了统一的分子生物学

  8. 1959 S. Ochoa和A. Kornberg 由于酶促合成 RNA 和 DNA 而获诺贝尔奖。 1960 － 61 F. Jacob和J. Monod 发现 mRNA 并提出操纵子学说， 1965 年与 P. Rous一起获诺贝尔奖。 1965 M. W. Nirenberg 等破译了遗传密码 1968 年R. W. Holley .H. G. Khorana 和 M. W. Nirenburg 共获诺贝尔 奖。 1970 H. Temin和D. 巴尔的摩发现逆转录病毒。 （五）.DNA 双螺旋结构模型的提出建立了统一的分子生物学

  9. 1970 H. O. 史密斯和 K. W. Wilcox 发现类型 Ⅱ限制 性内切酶。 1971 K. Danna和D. Nathans 作出 SV40 DNA 的限 制性图谱 1978 年诺贝尔化学奖授予发现。 限制酶的 W. Arber、H. O. Smith和D. Nathans 。 1972 P. Berg与其工作者将SV40 DNA与λ噬菌体 DNA重组。 1973 S. Cohen等获得第1个DNA重组体克隆。 1975 F. Sanger和A. R. Coulson发明酶法DNA快速 测序。 （六）、DNA 重组技术带来生物技术重大突破

  10. 1977. M. Maxam 和 W. Gilbert发明化学DNA测序。 1980年 Berg、Gilbert和Sanger共获诺贝尔化学奖。 1985 K Mullis发明PCR技术。1993年与发明定位诱变的M. 史密斯共获诺贝尔化学奖。 DNA 重组技术引起分子生物学第二次革命，使生命科学进入大科学工程的时代，并带动了生物技术产业的迅猛发展。 （七）、DNA 重组技术带来生物技术重大突破

  11. 1990 － 2005 年人类基因组计划提前完成，科学家们提出了后基因组时代（在 genome 之後的时代）的设想，于是产生了功能基因组学（功能的 genomics ）和结构基因组学（结构的 genomics ）的新学科由于基因产物需要经过一系列加工修饰才能执行功能，基因产物间的相互作用十分复杂，这些过程只从基因组本身进行研究是不足以揭示细胞功能的，因此又提出了蛋白质组学（ proteomics ）和 RNA 组学（ RNomics ）的计划。 生物化学与分子生物学发展的主要方向有 3 个：结构分子生物学、神经分子生物学、以及发育分子生物学 21 世纪这些领域将会取得巨大成果。 （八）、当前生命科学已进入后基因组的时代

  12. 二、 核酸的分类和组成 （一）、核酸的分类 • 核酸分为两大类. • 脱氧核糖核酸（DNA） • Deoxyribonucleic Acid • 核糖核酸（RNA） • Ribonucleic Acid。

  13. 1、脱氧核糖核酸（DNA） • DNA分子含有生物物种的所有遗传信息，分子量一般都很大。 • DNA为双链分子，其中大多数是链状结构大分子，也有少部分呈环状结构。 DNA主要存在于细胞核、线粒体、叶绿体和DNA 病毒。

  14. 2、核糖核酸（RNA） • RNA主要是负责DNA遗传信息的翻译和表达，分子量要比DNA小得多。RNA为单链分子。少数RNA病毒RNA为双链分子。主要存在于细胞核、细胞质。

  15. RNA的类别 • 根据RNA的功能，可以分为 mRNA、tRNA、rRNA、hnRNA、snRNA、asRNA。

  16. Messenger RNA （1）、mRNA (信使RNA) • 约占总RNA的5%。 • 不同细胞的mRNA的链长和分子量差异很大。 • 它的功能是将DNA的遗传信息传递到蛋白质合成基地 –核糖核蛋白体。

  17. Transfer RNA （2）tRNA (转移RNA) • 约占总RNA的10-15%。 • 它在蛋白质生物合成中起翻译氨基酸信息，并将相应的氨基酸转运到核糖核蛋白体的作用。 • 已知每一个氨基酸至少有一个相应的tRNA。 • RNA分子的大小很相似，链长一般在73-78个核苷酸之间。

  18. Ribosome RNA （3）rRNA (核糖体RNA) • 约占全部RNA的80%， • 是核糖核蛋白体的主要组成部分。 • rRNA 的功能与蛋白质生物合成相关。 返回

  19. 第二节 核酸的组成 • 核酸（DNA和RNA）是一种线性多聚核苷酸，它的基本结构单元是核苷酸。 • 核苷酸本身由核苷和磷酸组成, • 而核苷则由戊糖和碱基形成 • DNA与RNA结构相似，但在组成成份上略有不同。

  20. 一．核苷酸 1、组成核酸的碱基 • 腺嘌呤Adenine

  21. 核苷酸 1、组成核酸的碱基 • 鸟嘌呤guanine

  22. Structure A and G

  23. 核苷酸 1、组成核酸的碱基 • 尿嘧啶uracil

  24. 核苷酸 1、组成核酸的碱基 • 胞嘧啶cytosine

  25. 1．核苷酸 1、组成核酸的碱基 • 胸腺嘧啶thymine

  26. Structure of T and C

  27. 核苷酸 2、碱基的结构特征 • 碱基都具有芳香环的结构特征。嘌呤环和嘧啶环均呈平面或接近于平面的结构。 • 碱基的芳香环与环外基团可以发生酮式—烯醇式或胺式—亚胺式互变异构。

  28. 胺式亚胺式互变异构

  29. 酮式烯醇式互变异构

  30. 核苷酸 碱基的结构特征 • 嘌呤碱和嘧啶碱分子中都含有共轭双键体系，在紫外区有吸收（260 nm左右）。

  31. 核苷酸 3、戊糖 • 组成核酸的戊糖有两种。DNA所含的糖为β-D-2-脱氧核糖；RNA所含的糖则为β-D-核糖。

  32. 1．核苷酸 4、核苷 nucleoside • 糖与碱基之间的C-N键，称为C-N糖苷键。

  33. 核苷酸 5、核苷酸nucleotide • 核苷酸是核苷的磷酸酯。作为DNA或RNA结构单元的核苷酸分别是5′-磷酸-脱氧核糖核苷和5′-磷酸-核糖核苷。

  34. 核苷酸 6、修饰成分 • 核酸中也存在一些不常见的稀有碱基。稀有碱基的种类很多，大部分是上述碱基的甲基化产物。

  35. 二．核苷酸的衍生物 1、 ATP (腺嘌呤核糖核苷三磷酸) • ATP是生物体内分布最广和最重要的一种核苷酸衍生物。它的结构如下：

  36. ATP的性质 • ATP 分子的最显著特点是含有两个高能磷酸键。ATP水解时, 可以释放出大量自由能。 • ATP 是生物体内最重要的能量转换中间体。ATP 水解释放出来的能量用于推动生物体内各种需能的生化反应。 • ATP 也是一种很好的磷酰化剂。磷酰化反应的底物可以是普通的有机分子，也可以是酶。磷酰化的底物分子具有较高的能量（活化分子），是许多生物化学反应的激活步骤。

  37. 2、GTP (鸟嘌呤核糖核苷三磷酸) • GTP是生物体内游离存在的另一种重要的核苷酸衍生物。它具有ATP 类似的结构, 也是一种高能化合物。 • GTP主要是作为蛋白质合成中磷酰基供体。在许多情况下, ATP 和 GTP 可以相互转换。

  38. 3、cAMP 和 cGMP • cAMP(3’,5’- 环腺嘌呤核苷一磷酸)和 cGMP( 3’,5’-环鸟嘌呤核苷一磷酸)的主要功能是作为细胞之间传递信息的信使。 • cAMP 和 cGMP 的环状磷酯键是一个高能键。在 pH 7.4 条件下, cAMP 和 cGMP 的水解能约为43.9 kj /mol，比 ATP 水解能高得多。

  39. 三．多聚核苷酸 • 多聚核苷酸是通过核苷酸的5’-磷酸基与另一分子核苷酸的C3’-OH形成磷酸二酯键相连而成的链状聚合物。 • 由脱氧核糖核苷酸聚合而成的称为DNA链； • 由核糖核苷酸聚合而成的则称为RNA链。

  40. 多聚核苷酸的特点 • 在多聚核苷酸中，两个核苷酸之间形成的磷酸二酯键通常称为5′—3′磷酸二酯键。 • 多聚核苷酸链一端的C5′带有一个自由磷酸基，称为5′-磷酸端（常用5’-P表示）；另一端C3’带有自由的羟基，称为3′-羟基端（常用3’-OH表示）。 • 多聚核苷酸链具有方向性，当表示一个多聚核苷酸链时，必须注明它的方向是5′→3′或是3′→5′。

  41. 方向性 • 在多聚核苷酸（DNA或RNA）链中，由于构成核苷酸单元的戊糖和磷酸基是相同的，体现核苷酸差别的实际上只是它所带的碱基，所以多聚核苷酸链结构也可表示为： C A G T 3' 3' 3' 3' P P P P P 5' 5' 5' 5'

  42. 在讨论有关核酸问题时，一般只关心其中碱基的种类和顺序，所以上式可以进一步简化为：在讨论有关核酸问题时，一般只关心其中碱基的种类和顺序，所以上式可以进一步简化为： 5′PAPCPGPCPTPGPTPA 3′ • 或5′ ACGCTGTA 3′ 返回

  43. 第三节 核酸的结构 • 一、核酸的一级结构 • 多聚核苷酸是由四种不同的核苷酸单元按特定的顺序组合而成的线性结构聚合物，因此，它具有一定的核苷酸顺序，即碱基顺序。 • 核酸的碱基顺序是核酸的一级结构。 • DNA的碱基顺序本身就是遗传信息存储的分子形式。生物界物种的多样性即寓于DNA分子中四种核苷酸千变万化的不同排列组合之中。 • 而mRNA(信息RNA)的碱基顺序，则直接为蛋白质的氨基酸编码，并决定蛋白质的氨基酸顺序。

  44. （一）、RNA一级结构的特点 • RNA一级结构研究最多的是tRNA、rRNA以及一些小分子的RNA。其中 • tRNA分子具有以下特点： • 分子量25000左右，大约由70－90个核苷酸组成，沉降系数为4S左右。 • 分子中含有较多的修饰成分。 • 3'-末端都具有CpCpAOH的结构。

  45. 1、mRNA一级结构的特点 • 真核细胞mRNA的3‘-末端有一段长达200个核苷酸左右的聚腺苷酸(polyA)，称为 “尾结构” ，5’ -末端有一个甲基化的鸟苷酸，称为 “帽结构 ” 。

  46. 极大多数真核细胞mRNA在3‘-末端有一段长约200核苷酸的polyA。polyA是在转录后经polyA聚合酶的作用而添加上去的。原核生物的mRNA一般无polyA，但某些病毒mBNA也有3’-polyA,polyA可能有多方面功能,与mRNA从细胞核到细胞质的转移有关；与mRNA的半寿期有关，新合成的mRNA,．polyA链较长，而衰老的mRNA，polyA链缩短极大多数真核细胞mRNA在3‘-末端有一段长约200核苷酸的polyA。polyA是在转录后经polyA聚合酶的作用而添加上去的。原核生物的mRNA一般无polyA，但某些病毒mBNA也有3’-polyA,polyA可能有多方面功能,与mRNA从细胞核到细胞质的转移有关；与mRNA的半寿期有关，新合成的mRNA,．polyA链较长，而衰老的mRNA，polyA链缩短

  47. 动物细胞核糖体rRNA有四类：5SrRNA，5.8SrRNA，18SrRNA，28SRNA。许多rRNA的一级结构及由一级结构推导 出来的二级结构都已阐明，但是对许多rRNA的功能迄今仍不十分清楚。

  48. 2、RNA的高级结构特点 • RNA是单链分子，因此，在RNA分子中，并不遵守碱基种类的数量比例关系，即分子中的嘌呤碱基总数不一定等于嘧啶碱基的总数。 • RNA分子中，部分区域也能形成双螺旋结构，不能形成双螺旋的部分，则形成突环。这种结构可以形象地称为“发夹型”结构。

  49. 在RNA的双螺旋结构中，碱基的配对情况不象DNA中严格。G 除了可以和C 配对外，也可以和U 配对。G-U 配对形成的氢键较弱。不同类型的RNA, 其二级结构有明显的差异。 • tRNA中除了常见的碱基外，还存在一些稀有碱基，这类碱基大部分位于突环部分.

  50. （1）、tRNA的二级结构 • A、tRNA的二级结构 • tRNA的二级结构都呈” 三叶草” 形状，在结构上具有某些共同之处，一般可将其分为五臂四环：包括氨基酸接受区、反密码区、二氢尿嘧啶区、TC区和可变区。除了氨基酸接受区外，其余每个区均含有一个突环和一个臂。

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