1 / 15

PAS farvning (Periodsyre-Schiff)

PAS farvning (Periodsyre-Schiff). Formål: Påvisning af PAS-positive elementer i væv. Fremgangsmåde:. Afparaffinering 0,5% periodsyre 10 minutter Rindende vand 2 minutter Schiff’s reagens 15 minutter Rindende vand 5 minutter Mayers sure hæmatein 2 minutter

rollin
Download Presentation

PAS farvning (Periodsyre-Schiff)

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. PAS farvning(Periodsyre-Schiff) Formål:Påvisning af PAS-positive elementer i væv

  2. Fremgangsmåde: • Afparaffinering • 0,5% periodsyre 10 minutter • Rindende vand 2 minutter • Schiff’s reagens 15 minutter • Rindende vand 5 minutter • Mayers sure hæmatein 2 minutter • Rindende vand 5 minutter • Dehydrering

  3. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Mayers sure hæmatein Rindende vand Dehydrering Oxiderer nabostillede OH-grupper i glukogen. Derved dannes aldehydgrupper. Fremgangsmåde:

  4. Oxidation af OH-grupper: Lyon, Hans: Farvning af væv på basis af covalente bindinger og redoxprocesser, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998.

  5. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Mayers sure hæmatein Rindende vand Dehydrering Fremgangsmåde:

  6. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Mayers sure hæmatein Rindende vand Dehydrering Schiff’s reagens laver kovalente bindinger til aldehydgrupper i glukogen. Fremgangsmåde:

  7. Aldehydgruppe fra glukogen Ny kovalent binding Schiff’s reagens Kovalent binding af Schiff’s reagens:

  8. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Mayers sure hæmatein Rindende vand Dehydrering Hæver pH hvorved sulfolfonsyregruppen til det centrale C-atom fraspaltes. Fremgangsmåde:

  9. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Mayers sure hæmatein Rindende vand Dehydrering Kernefarvning med Al-hæmatein. Fremgangsmåde:

  10. Bindinger af ”delvist kompleks karakter” Phosforgruppe i DNA-kæde Al-hæmatein: Kompleksbindinger

  11. Afparaffinering 0,5% periodsyre Rindende vand Schiff’s reagens Rindende vand Mayers sure hæmatein Rindende vand Dehydrering Hæver pH til 7. Dette fraspalter en H+ fra hæmatein. Hæmatein skifter farve fra vinrød til blå. Fremgangsmåde:

  12. Resultater: • Glycoproteiner, neutrale proteoglycaner og glykogen – røde • Basofile granulocytter - røde • Kerner - blå

  13. Kontroller: • Ved rutine farvning medtages ikke kontroller.

  14. Kommentarer: • Sure glycosaminoglykaner (GAG’er) danner ikke aldehydgrupper, da periodsyre frastødes af de mange negative ladninger.

  15. Litteratur: • Lyon, Hans: Farvning af væv på basis af covalente bindinger og redoxprocesser, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998, side 3-8. • Prentø, Poul: Vævsfarvning og farvningsmekanismer, Bioanalytikeruddannelsen København, 1998, side 35, 56-57. • Farveopskrift fra speciallab. • www.stainsfile.info

More Related