病原生物学教研室 Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University

1. 医学微生物学 Medical Microbiology 病原生物学教研室 Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University

2. 第十一章 肠道感染细菌 传播途径：粪-口 包括：肠杆菌科细菌、幽门螺杆菌、霍乱弧菌、 副溶血性弧菌、弯曲菌属等

3. 肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属 菌族 菌属（菌种数） 代表种 埃希菌族 埃希菌属 大肠杆菌 志贺菌属 痢疾志贺菌 爱德华菌族 爱德华菌属 迟钝爱德华菌 沙门菌族 沙门菌属 伤寒沙门菌 枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌 克雷伯菌族 克雷伯菌属 肺炎克氏菌 肠杆菌属 产气肠杆菌 哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌 沙雷菌属 粘质沙雷菌 变形杆菌族 变形杆菌属 普通变形杆菌 摩根菌属 摩氏摩根菌属 普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌 耶尔森菌族 耶尔森菌属 鼠疫耶尔菌 欧文菌族本 欧文菌属 草原居民欧文菌

4. 肠杆菌科细菌的共同特性 1、相似的形态染色 中等大小，G –杆菌，无芽胞，多数有动力 2、简单的培养条件 3、活泼的生化反应 乳糖发酵试验 初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌 肠道致病菌 不发酵乳糖 肠道非致病菌 发酵乳糖

5. 4、抗原构造复杂 鞭毛抗原（H） K或Vi抗原 菌体抗原（O）

6. 5、抵抗力 不强 6、易变异 通过 接合 转导 耐药性变异 溶源性转换 引起 毒力性变异 生化反应性变异

7. 第一节埃希菌Escherichia 一、生物学性状 • 形态染色 • 0.4-0.7 µm 1-3µm • 短杆菌 • 革兰染色阴性 • 有鞭毛 • 有菌毛

8. 培养特性与生化反应 • 兼性厌氧 • 营养要求不高，S型菌落 • 生化反应活泼，发酵多种糖类 • 绝大多数发酵乳糖 • 吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐（IMViC）试验结果为+ + - - • 抗原结构 • O抗原：菌体抗原，170多种 • H抗原：鞭毛抗原，56种以上 • K抗原：荚膜抗原，100种以上 • 大肠杆菌血清型以O：K：H表示

9. 二、致病性 荚膜 大肠埃希菌的毒力因子 粘附素(定植因子抗原；Bpf;P菌毛、 紧密粘附素等) 侵袭力： Ⅲ型分泌系统 内毒素： 耐热肠毒素a,b(STa,STb) 不耐热肠毒素Ⅰ和Ⅱ（LT-Ⅰ，LT-Ⅱ） 外毒素： 志贺毒素Ⅰ和Ⅱ（Stx-Ⅰ,Stx-Ⅱ） 溶血毒素

10. 不耐热肠毒素和耐热肠毒素的比较

11. LT-Ⅰ作用机制：（与霍乱肠毒素作用相似） B亚单位与肠粘膜上皮细胞表面GM1神经节苷脂结合 A亚单位穿过细胞膜 作用于腺苷环化酶 cAMP增高 肠粘膜细胞内水、氯、碳酸氢钾过度分泌至腹腔，钠吸收减少 腹泻

12. 不耐热肠毒素的作用机理

13. STa的作用机制 作用于鸟苷环化酶 cGMP增高 肠粘膜细胞过度分泌至腹腔 腹泻

14. 志贺毒素(Stx) • 分Stx-Ⅰ和 Stx-Ⅱ两型 • 由1个A亚单位和5个B亚单位组成 • 作用机制：B亚单位与宿主细胞表面特异糖脂受体结合 A亚单位穿过细胞膜 裂解60S核糖体亚单位的28S rRNA 蛋白质合成受阻

15. 2、所致疾病 • 肠道外感染 机会感染，内源性感染 • 泌尿道感染最多见 • 化脓性感染 • 脑膜炎 • 败血症等 • 肠胃炎 外源性感染，某些特殊血清型的大肠埃希菌引起

16. 引起肠胃炎的大肠埃希菌 • 肠产毒素型大肠埃希菌 enterotoxigenic E.coliETEC • 肠侵袭型大肠埃希菌 enteroinvasive E.coliEIEC • 肠致病型大肠埃希菌 enteropathogenic E.coliEPEC • 肠出血型大肠埃希菌 enterohemorrhagic E.coliEHEC • 肠集聚型大肠埃希菌 enteroaggregative E.coliEAggEC

17. 肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC） • 致病物质 • 定植因子 • 肠毒素:LT、ST • 内毒素 • K抗原 • 所致疾病 • 5岁以下婴幼儿腹泻 • 旅游者腹泻 • 水样便，恶心、呕吐，腹痛，低热

18. 肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC） • 致病物质 • 不产生肠毒素 • 侵袭结肠粘膜上皮细胞并在其中生长繁殖 • 所致疾病 • 主要侵犯较大儿童和成人 • 腹泻呈脓血便，有里急后重 • 致病类似菌痢，较少见 • 诊断 • EIEC无动力、生化反应和抗原结构与志贺菌相似

19. 肠致病型大肠埃希菌（EPEC） • 致病物质 • 不产生肠毒素及其他外毒素 • 无侵袭力 • 所致疾病 • 婴幼儿腹泻

20. 肠出血型大肠埃希菌（EHEC）亦称为vero毒素大肠埃希菌肠出血型大肠埃希菌（EHEC）亦称为vero毒素大肠埃希菌 • 致病物质 • 菌毛：粘附作用 • 毒素：产志贺毒素Stx-Ⅰ，Stx-Ⅱ，破坏肠绒毛结构（干扰蛋白质合成） • 所致疾病 • 出血性结肠炎 • 溶血性尿毒综合征

21. 肠集聚型大肠埃希菌（EAggEC） • 致病物质 • 毒素：肠集聚耐热毒素（EAST） • 粘附素 • 所致疾病 • 引起婴儿持续性腹泻，脱水，偶有血便

22. 菌株 作用部位 疾病与症状 致病机制 ETEC 小肠 旅行者腹泻；婴幼儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，腹痛，低热 质粒介导LT和（或）ST肠毒素，大量分泌液体和电解质 EIEC 大肠 水样便，继以少量血便，腹痛，发热 质粒介导侵袭和破坏结肠粘膜上皮细胞 28ac、29、112ac、1244、152、164、167 EPEC 小肠 婴儿腹泻；水样便，恶心，呕吐，发热 质粒介导粘附和破坏上皮细胞 2、55、86、111、114、119、125、126、127、128、142、158 EHEC 大肠 水样便，继以大量出血，剧烈腹痛，低热或无，可并发HUS、血小板减少性紫癜 溶原性噬菌体编码SLT-I或SLT-II，中断蛋白质合成 157、26、111 EAggEC 小肠 婴儿腹泻；持续性水样便，呕吐，脱水，低热 质粒介导集聚性粘附上皮细胞，阻止液体吸收并产生毒素 42、44、3、86等 引起腹泻的大肠埃希菌 常见O血清型 6、8、15、25、 27、78、148、159

23. 微生物学检查法 • 卫生细菌学检查 • 大肠菌群指数 • 每1000毫升样品中的 大肠菌群近似数 • 细菌总数 临床标本的检查 • 标本 • 分离培养与鉴定 • 肠道外感染 • 涂片染色检查 • 分离培养 • 鉴定 • 肠道内感染 • ETEC • EIEC • EPEC • EHEC • EAggEC 大肠菌群：指在37℃，24小时内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属等。

24. 防治原则 • 疫苗免疫预防已在畜牧业领域中开展了广泛研究 • 大肠埃希菌很多菌株都已获得耐一种或几种抗生素的质粒，耐药性非常普遍。进行药敏试验。

25. 第二节 志贺菌（Shigella） • 形态染色 • G-杆菌 • 0.5-0.7 µm  2-3µm • 无鞭毛，无荚膜 • 有菌毛 • 培养及生化反应 • 营养要求不高 • 不分解乳糖 • ss选择培养基 • 克氏双糖管

26. 抗原构造及分类 • 由O和K抗原组成 • 分类： 菌种 群 型 亚型 甘露醇 鸟氨酸脱羧酶 痢疾志贺菌 A 1~10 - - 福氏志贺菌 B 1~6，X，Y变种 + - 鲍氏志贺菌 C 1~15 + - 宋氏志贺菌 D 1 + + • 抵抗力 • 比其他肠道杆菌弱 • 对酸和一般消毒剂敏感：

27. 致病物质 1、侵袭力： 菌毛—有利于菌粘附至肠粘膜 2、毒 素： 通透性增加 局部 作用于肠壁 内毒素 粘膜炎症、溃疡 自主神经 全身 内毒素血症 外毒素（A群1型） 与内毒素协同作用 加重局部和全身症状

28. 志贺菌侵袭肠粘膜上皮细胞过程 1：侵入M细胞；2：诱导吞噬；3～4：逃逸；5～7：从粘膜上皮细胞基底部侵入胞浆中并增殖；8～10：侵入邻近粘膜上皮细胞胞浆中，并生长繁殖。

29. 所致疾病 • 菌痢 • 患者和带菌者 • 粪-口 • 感染灶局限于结肠粘膜层，一般不入血 • 表现： • 急性： • 潜伏期数小时至7d • 发热、腹痛、腹泻、里急后重、粘液脓血便 • 中毒性菌痢 • 慢性：病程迁移二月以上 • 免疫性 • 免疫期短，不稳固

30. 中毒性痢疾病人

31. 微生物学检查 新鲜脓血便/肛拭 及时送/暂用3%甘油缓冲水保存 快速诊断 分离培养 SS平板（无色透明小菌落） 双糖培养基（生化反应） 荧光菌球试验 血清学反应（玻片凝集） 协同凝集试验 明确诊断

32. 防治原则 • 隔离患者、彻底治疗 • 切断传播途径 • 试用的口服菌苗： • 链霉素依赖株重组活菌苗。双价疫苗，具有广谱保护作用。 • 磺胺药、氯霉素、青霉素、痢特灵等均有效，亦可选用环丙沙星、菌必治等 Handwashingafter defecation is the best way to prevent the spread of shigellosis.

33. 第三节 沙门菌 • 是一群革兰阴性杆菌 • 菌种繁多，血清型超过2400个 • 多对动物致病 • 对人类致病的占少数 • 伤寒沙门菌 • 甲型副伤寒沙门菌 • 肖氏伤寒沙门菌 • 希氏伤寒沙门菌 • 动物沙门菌也可对人致病 • 肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌

34. 形态染色 • G-杆菌 • 0.6-1.0µm╳ 2-4µm • 周身鞭毛，有菌毛 • 培养和生化反应 • 兼性厌氧 • 营养要求不高 • 不分解乳糖

35. 抗原构造与分类 Vi抗原

36. 抵抗力 • 较差 • 水中能存活2-3W • 粪便中可活1-2个月 • 冰冻土壤中可过冬 • 耐受胆盐、煌绿及其他染料 • 对热耐力差 • 5％石炭酸5min杀死

37. 致病物质 • 侵袭力 • 菌毛、O和Vi抗原抗吞噬 • 内毒素 • 引起体温升高、白细胞数下降。大剂量可导致中毒和休克 • 炎症 • 肠毒素 • 某些沙门菌如鼠伤寒沙门菌

38. 所致疾病-------人类沙门菌病 • 肠热症 • 伤寒、副伤寒 • 伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起 • 胃肠炎（食物中毒） • 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌 • 败血症 • 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌 • 无症状带菌者

39. 全身疼痛、不适、发热（前驱期） 伤寒沙门菌 副伤寒沙门菌 菌血症 胸导管 肠系膜淋巴结 （潜伏期） 肝、脾、肾及胆囊等 肠热症 吞噬细胞吞噬 孤立和集合淋巴结坏死溃疡 进入肠壁淋巴组织 胆囊 粪便 肾脏 菌血症 尿 2-3W （典型病例病程为3-4W） 持续高热、肝脾肿大、全身中毒、玫瑰疹 （发病的第1W） 并发症：肠穿孔、血栓性静脉炎、胆囊炎

40. 伤寒 • 伤寒表现： • 持续高热 • 伤寒病容 • 玫瑰疹 • 肝脾肿大 • 相对缓脉 Thomson’s theories on typhoid, a major killer, were derided.

41. 所致疾病-------人类沙门菌病 • 肠热症 • 伤寒、副伤寒 • 伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起 • 胃肠炎（食物中毒） • 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌 • 败血症 • 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌 • 无症状带菌者

42. 免 疫 性 • 肠热症后，能获得牢固免疫 • 即使发生，症状也轻，很少发生再感染 • 细胞免疫较重要

43. 微生物学检查法 • 标本 • 胃肠炎取粪便呕吐物或可疑食物 • 肠热症在病程不同阶段采取不同标本：第1w取血和骨髓；第2w后取粪便、尿 • 分离培养和鉴定 • 血液和骨髓穿刺液先增菌培养 • 粪、尿（沉渣）可直接接种选择培养基。置37℃ 24h；挑选可疑菌落，生化反应和血清学鉴定 • 血清学诊断 • 肥达反应 • 带菌者检查

44. 肥达反应（Widal reaction） • 用已知伤寒沙门菌O、H和甲型副沙寒沙门菌和肖氏沙门菌H抗原与病人血清做定量凝集试验，用以辅助诊断肠热症。 Georges Widal in 1896.

45. 判定结果时，应着重考虑： • 正常凝集价 • 伤寒沙门菌O抗体的凝集价应在1：80以上，H抗体凝集价在1：160以上 • 甲型副伤寒、肖氏沙门菌H抗体凝集价在1：80以上 • 动态观察 • O与H抗体的诊断意义 • 其他少数病例

46. H与O抗体的性质及其消长意义

47. 判定结果时，应着重考虑： • 正常凝集价 • 伤寒沙门菌O抗体的凝集价应在1：80以上，H抗体凝集价在1：160以上 • 甲型副伤寒、肖氏沙门菌H抗体凝集价在1：80以上 • 动态观察 • O与H抗体的诊断意义 • 其他少数病例

48. 防治原则 • 加强水源和食品卫生管理 • 疫苗 • 伤寒、甲及乙型副伤寒3联菌苗（死菌苗） • Ty2la伤寒沙门菌口服活菌苗，有显著保护作用，有效期可达3年 • 伤寒Vi荚膜多糖疫苗 • 治疗 • 以氯霉素效果较好

49. 第四节 霍乱弧菌V.cholerae 弧菌属细菌的特点： 菌体短小，弯曲成弧形，革兰阴性菌 广布于自然界，水表面最多 氧化酶试验阳性 有单鞭毛