1 / 39

第三章 中药制剂的检查

第三章 中药制剂的检查. 制剂通则检查 一般杂质检查 特殊杂质检查 微生物限度检查. §1 中药制剂杂质检查. 杂质 : 指能危害人体健康或影响药物质量的物质。 杂质的分类 一般杂质(如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐) 特殊杂质 杂质来源 中药材原料中带入 生产制备过程中引入 贮存过程中引起的中药制剂自身理化性质的改变. 注射用双黄连(冻干)中砷盐限量检查 取本品 0.4g ,加 2% 硝酸镁乙醇溶液 3ml ,点燃,燃尽后,先用 小火炽灼使炭化,再在 500 ~ 600℃ 炽灼使完全灰化,放冷,加

Download Presentation

第三章 中药制剂的检查

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript


  1. 第三章 中药制剂的检查

  2. 制剂通则检查 • 一般杂质检查 • 特殊杂质检查 • 微生物限度检查

  3. §1 中药制剂杂质检查 杂质:指能危害人体健康或影响药物质量的物质。 • 杂质的分类 • 一般杂质(如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐) • 特殊杂质 • 杂质来源 • 中药材原料中带入 • 生产制备过程中引入 • 贮存过程中引起的中药制剂自身理化性质的改变

  4. 注射用双黄连(冻干)中砷盐限量检查 取本品0.4g,加2%硝酸镁乙醇溶液3ml,点燃,燃尽后,先用 小火炽灼使炭化,再在500~600℃炽灼使完全灰化,放冷,加 盐酸5ml与水21ml使溶解,依法检查(中国药典2000版附录Ⅸ F)。 如果标准砷溶液(1µgAs/ml)取用量为2ml,杂质限量的计算如下: §1 中药制剂杂质检查 • 杂质的限量检查 杂质限量:指药物中所含杂质的最大允许量,通常用% 或ppm来表示。 • 杂质限量检查及计算方法 取一定量与被检杂质相同的纯物质或其它对照品配制成标准溶液,与一定量供试药物的溶液,在相同处理条件下,比较反应结果,从而确定杂质限量是否超过规定。

  5. §1 中药制剂杂质检查 • 杂质的限量检查 不用标准溶液,直接在供试品溶液中加入试剂进行检查。 肉桂油中重金属检查 取肉桂油10ml,加水10ml与盐酸1滴,振摇后,通硫化氢气使 饱和,水层与油层均不得变色。

  6. §2 一般杂质检查方法 • 重金属检查法 • 重金属:在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。 • 重金属检查法基本原理 CH3CSNH2+H2O CH3CONH2+H2S↑ Pb2++H2S→PbS↓+2H+ pH3.5

  7. §2 一般杂质检查方法 • 重金属检查法 • 检查方法

  8. §2 一般杂质检查方法 • 重金属检查法 • 检查方法

  9. §2 一般杂质检查方法 • 重金属检查法 • 注意事项 • 方法灵敏度 适用于含铅量在10µg-30µg之间。标准铅液的用量以20µg(相当于标准铅溶液2ml)为宜。 • 反应条件 硫代乙酰胺试液与重金属反应的最佳pH值是3.5,硫代乙酰胺试液加入量以2ml时呈色最深,最佳显色时间为2分钟。 • 有色供试液的处理 供试品在加硫代乙酰胺试液以前如带色,可用稀焦糖液或加常用的指示剂调整标准溶液,使两者颜色一致。 • 其他离子的干扰 • Fe3+---加抗坏血酸。 • 当使用盐酸超过1.0ml、氨试液超过2 ml,以及用硫酸或硝酸进行有机破坏,或加入其他试剂进行处理者,对照溶液应取同样量试液蒸干后,依法检查。 • 铁盐供试品,可利用Fe3+在比重为1.103-1.105的盐酸(盐酸9ml与蒸馏水6ml的混合液)中成为HFeC162-,可用乙醚提取而除去,再将酸性溶液加氨试液使呈碱性后,用氰化钾作为微量铁盐的掩蔽剂,再加硫化钠试液测定。

  10. §2 一般杂质检查方法 • 重金属检查法 • 注意事项 • 前处理 需将药品灼烧破坏,使有机物分子中的重金属游离。灼烧时炽灼温度必须控制在500~600℃。 • 其他 • 标准铅溶液应在临用前精密量取标准铅贮备液新鲜稀释配制 • 硫化钠试液应采用分析纯的硫化钠配制,贮存在棕色瓶中可保存1~2个月。 • 含有Pb2+的中性或弱酸性溶液,如需过滤,可加入对酚酞呈微碱性的饱和醋酸铵溶液,温热后用直径较小的定量滤纸滤过,或者选用玻砂漏斗过滤。 • 如供试品本身能生成不溶性硫化物时,影响重金属的检查,可加入适当的掩蔽剂。

  11. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查:药品中微量砷(以As计算)的限量检查 • 古蔡氏法 • 基本原理 ① AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H2O ② AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2 (黄色) (溴化汞试纸) AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3 (棕色) ※ As(V)反应慢,须将As(V)还原成As(III) 初生态的氢

  12. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查: • 古蔡氏法 AsO43-+2I-+2H+ →AsO33-+I2+H2O AsO43-+Sn2++2H+→AsO33-+Sn4++H2O I2+Sn2+→2I-+ Sn4+ 4I-+Zn2+→[ZnI4]2- Sn2++Zn →Sn+Zn2+ 促进反应向右进行 形成锌锡齐,有利于反应平稳的进行

  13. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查: • 古蔡氏法 HgBr2试纸 古蔡氏法检查砷装置 A: 100ml标准磨口锥形瓶 B: 中空的标准磨口塞 C: 导气管(外径8.0mm,内径 6.0mm),全长约180mm D/E :具孔(孔径6.0mm)的有机玻璃旋塞 醋酸铅棉60mg (装管高度6-8cm)

  14. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查: • 古蔡氏法 标准砷斑的制备 ① A瓶:标准砷溶液(1µg/ml )2ml+盐酸5ml+水21ml+KI试液5ml+酸性SnCl2试液5滴,室温10min ② A瓶+锌粒2g,接导气管C ③ 25℃ -40℃水浴45min 检查法

  15. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查 • 古蔡氏法 • 注意事项 • 方法灵敏度 约为0.75µg(以As计)。2ml标准砷溶液(相当于2 µgAs)所形成的砷斑色度适中,清晰,便于辨认。 • 酸度及各种试液用量 反应液的酸度相当于2mol/L的盐酸液。含KI浓度为2.5%,SnC12浓度为0.3%,加入锌粒以2g为宜。 • 反应温度和时间: 25~40℃,时间为45分钟。 • 锌粒选用2 mm左右粒径(能通过一号筛)的为宜。 • 汞试纸的选择 选用质量较好,组织疏松的中速定量滤纸;溴化汞试纸一般宜新鲜制备。 • 采用醋酸铅棉花吸收除去H2S。2000版药典规定称取60mg醋酸铅棉花,装管高度约80mm。

  16. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查: • 古蔡氏法 • 注意事项 • 中药制剂的前处理:常用酸破坏法、碱破坏法及直接炭化法等使有机砷游离出来,以氢氧化钙破坏法较为常用。 • 干扰物质:如硝酸、磷、锑化合物或硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐、碘、氯、汞、银、镍、钴、铜、铁、铋等的干扰。 • 其他 A 所用仪器、试液等的影响 B 同一套仪器应能辨别出标准砷溶液1.5ml与2.0ml所呈砷斑的深浅。 C 标准砷溶液应于实验当天配制,标准砷贮备液存放时间一般不宜超过一年。 D 砷斑不稳定,反应应保持干燥及避光,并立即比较。 E 配制成的酸性氯化亚锡试液3个月后不宜使用。

  17. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查: • 二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法) • 基本原理 ※ 既可做限量检查,又可做含量测定。 红色胶态银

  18. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查: • 二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法) • 检查方法 • 目视检测 • 分光光度计, λ=510 Ag-DDC 5ml

  19. §2 一般杂质检查方法 • 砷盐检查: • 二乙基二硫代氨基甲酸银法(Ag-DDC法) • 注意事项 吡啶(DL=0.5 µgAs/30ml) • 有机碱液的选择 三乙胺 (0.75-7.5 µg范围内, A∝C) • 温度和时间:25~40℃水浴,45min

  20. §2 一般杂质检查方法 • 铁盐检查法 • 硫氰酸盐法(CP) • 原理 Fe3++6SCN-→[Fe(SCN)6]3- • 检查方法 供试品 标准铁溶液 • 方法灵敏度20-50 µg Fe3+ /50ml H+ +H20至25ml, +稀HCl4ml, +(NH4)2S2O850mg, +H20至35ml, +30%NH4SCN3ml, +H20至50ml

  21. §2 一般杂质检查方法 • 铁盐检查法 • 巯基醋酸法(EP) 2Fe3++2HS·CH2COOH → 2Fe2++HOOCCH2-S-S-CH2COOH+2H+ Fe2++2HS·CH2COOH → Fe(S·CH2COOH)2 +2H+ Fe(S·CH2COOH)2 +2OH-→ [Fe(S·CH2COO)2]2-+2H2O

  22. §2 一般杂质检查方法 • 硫酸盐检查法 SO42- + Ba2+→ BaSO4 (白色混悬液) (pH ~1,25-30℃,+25%BaCl2) ※ 适宜的浓度范围:100-500 µg SO42- /50ml • 氯化物检查法 Cl-+Ag+→ AgCl(白色混悬液) (5ml HNO3/50ml,30-40℃,置暗处反应) ※ 适宜的浓度范围:50-80 µg Cl- /50ml

  23. §2 一般杂质检查方法 • 干燥失重:药品在规定的条件下,经干燥后所减失 的重量,包括水分及其他挥发性成分。 • 检查方法 • 常压恒温干燥(烘干法)--受热较稳定的中药制剂 恒重:连续2次干燥后的重量差异不超过0.3mg • 干燥剂干燥 –受热易分解或挥发的供试品 • 硅胶,五氧化二磷,硫酸等干燥剂 • 减压干燥—熔点低、受热不稳定及较难赶除水分的供试品

  24. §2 一般杂质检查方法 • 水分测定法 • 烘干法—不含或含少量挥发性成分的供试品 • 甲苯法--含挥发性成分的供试品 • 减压干燥--含挥发性成分的贵重药品 干燥剂:P2O5 • 气相色谱法--散剂、颗粒剂、丸剂、 片剂等各类型中药制剂中微量水分的测定 • 费休法 甲苯法装置

  25. §2 一般杂质检查方法 • 炽灼残渣检查法(硫酸灰分,EP) 700℃-800℃ +硫酸 ※ 取样量由炽灼残渣限量决定,一般1~2 g ※ 缓慢灼烧 ※ 将残渣留作重金属检查时, 500℃-600℃ • 灰分测定 • 总灰分 500℃-600℃灰烬+盐酸溶解过滤 滤渣 灼烧 (+10% NH4NO3) • 酸不溶性灰分 有机物→炭化,分解 非挥发性无机杂质→硫酸盐

  26. §3 特殊杂质检查方法 • 特殊杂质:指在该药品的生产和贮存过程中,根据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。 大黄流浸膏中土大黄苷的检查 取本品适量,加甲醇2 ml,温浸10分钟,放冷,取上清液 10µl,点于滤纸上,以45%乙醇展开,取出,晾干,放置 10分钟,置紫外灯(365nm)下检视,不得显持久的亮紫 色荧光。 大黄素 土大黄苷

  27. §4 农药残留量的检查 • 常用农药 • 有机氯类:艾氏剂、六六六、氯丹、DDT、狄氏剂等 • 有机磷类:三硫磷、氯硫磷、蝇毒磷、内吸磷、敌敌畏、乐果等 • 苯氧羧酸类除草剂:2,4-D;2,4,5-T • 氨基甲酸酯类:西维因(甲萘威) • 二硫代氨基甲酸酯类:福美铁、代森锰、代森钠、福美双等 • 无机农药:磷化铝、砷酸钙、砷酸铅 • 植物性农药:烟叶和尼古丁;除虫菊花提取物和除虫菊酯(合成除虫菊酯);毒鱼藤根和鱼藤根 • 其他:溴螨酯、氯化苦、二溴乙烷、环氧乙烷、溴甲烷。

  28. §4 农药残留量的检查 • 农药残留量的测定 • 供试品的制备 • 残留农药的提取 • 提取溶剂:乙腈、丙酮 • 提取方法:索氏提取法和振荡提取法 • 样品纯化—液-液分配+柱层析分离 • 检测方法—色谱分离法

  29. §4 农药残留量的检查 • 农药残留量的测定 • 检测方法 • 薄层色谱法 • 气相色谱法和液相色谱法

  30. §4 农药残留量的检查 • 农药残留量的测定 • 有机氯农药残留量检查 • 色谱条件与系统适用性试验——弹性石英毛细管柱SE-54(或DB-1701) 、电子捕获检测器,进样口温度:230℃,检测器温度:300℃,不分流进样,程序升温 • 对照品储备液——六六六(BHC)[α-,β-,γ-,δ-BHC],滴滴涕(DDT)[PP’-DDE,-DDD,-DDT,OP’-DDT]及五氯硝基苯(PCNB)+石油醚(60-90℃)分别制成每1ml约含4-5µg的溶液 • 混合对照品储备液的制备——对照品储备液0.5ml →10ml • 混合对照品溶液的制备——取混合对照品储备液制成每1L含0µg、1µg、5µg、10µg、50µg、100µg、500µg浓度系列。

  31. §4 农药残留量的检查 • 农药残留量的测定 • 有机氯农药残留量检查 • 供试品溶液制备——供试品研细,称取适量(相当于药材2g),置100ml具塞锥形瓶中,+水20ml浸泡过夜,+丙酮40ml,称定,超声处理30min,放冷,用丙酮补足减失的重量,+氯化钠约6g及二氯甲烷30ml,称定,超声处理15min,用二氯甲烷补足减失的重量,静置使分层,将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100ml具塞锥形瓶中,放置4小时。精密量取35ml,于40℃水浴减压浓缩至近干,加少量石油醚(60~90℃)如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净,用石油醚(60-90℃)溶解并转移至10ml具塞刻度离心管中,加石油醚(60~90℃)至5ml。+硫酸1ml,振摇1分钟,离心(3000转/分)10分钟。精密量取上清液2ml置具刻度的浓缩瓶(见图3-5)中,连接旋转蒸发器, 40℃下(或用氮气)将溶液浓缩至适量,精密稀释至1ml ,即得。 • 测定

  32. §4 农药残留量的检查 • 农药残留量的测定 • 有机磷农药残留量检查 • 色谱条件与系统适用性试验——弹性石英毛细管柱DB-17MS(或HP-5)、氮磷检测器,进样口温度:230℃,检测器温度:300℃,不分流进样,程序升温 • 对照品储备液——对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷,+用乙酸乙酯,制成每1ml约含100µg的溶液 • 混合对照品储备液的制备——对照品储备液1ml →20ml • 混合对照品溶液的制备——取混合对照品储备液制成每1ml含0.1µg、0.5µg、1µg、2µg、5µg浓度系列。

  33. §4 农药残留量的检查 • 农药残留量的测定 • 有机磷农药残留量检查 • 供试品溶液制备——供试品研细,称取适量(相当于药材5g),+无水硫酸钠5g,+乙酸乙酯50-100ml,冰浴超声处理3min,放置,取上层液滤过,药渣加乙酸乙酯30-50ml,冰浴超声处理3min,放置,滤过,合并滤液, 40℃减压浓缩至干,+乙酸乙酯5ml,使溶解。精密量取1ml,加到活性炭小柱(120-400目,0.25g),置多功能真空样品处理器上,用正己烷-乙酸乙酯(1:1)5ml洗脱。洗脱液置氮吹仪上浓缩至近干。+乙酸乙酯1ml,溶解。 • 测定

  34. §4 农药残留量的检查 • 农药残留量的测定 • 有机磷农药残留量检查 1-敌敌畏 2-速灭磷 3-久效磷 4-甲拌磷 5-巴胺磷 6-二嗪农 7-乙嘧硫磷 8-甲基嘧啶硫磷 9-甲基对硫磷 10-稻瘟净 11-水胺硫磷 12-氧化喹硫磷 13-稻丰散 14-甲喹硫磷 15-克线磷 16-乙硫磷 十六种有机磷农药的气相色谱图

  35. §6 黄曲霉毒素的检查 • 黄曲霉毒素(aflatoxin) • 极强的毒性和致癌性 • 在紫外线照射下,能发出荧光 • 耐热,在280℃时发生裂解 • 低浓度时易受紫外线破坏,被氧化或遇碱被破坏 • 在水中溶解度低,易溶于油及氯仿、丙酮、甲醇等有机溶剂 • 测定方法 • 微柱色谱法、薄层色谱法、高效液相色谱法、荧光分析法、免疫化学分析法等

  36. §6 黄曲霉毒素的检查 • 测定方法 • 微柱色谱法 (测定黄曲霉毒素的总量) • 原理及分析方法 杂质 → 氧化铝吸附 aflatoxin → 硅镁型吸附剂吸附 对照品溶液:每1ml含0.005µg、0.01µg、0.025µg、0.05µg、 黄曲霉毒素B1氯仿溶液 供试品溶液:氯仿提取 微柱色谱:上样1ml,+1ml 丙酮-氯仿(10:90)展开,365nm 波长紫外光下观察荧光 ※ 本法测定的是黄曲霉毒素的总量,灵敏度为10µg/kg。 ※ 使用的试剂和棉花中不得含有荧光物质。 ※ 无水硫酸钠、中性氧化铝、硅镁型吸附剂应为60-120目,使用前应灼烧脱水或活化。 ※ 实验完毕后,应及时消毒(安替福民溶液或5%次氯酸钠溶液) 中性氧化铝 硅镁型吸附剂

  37. §6 黄曲霉毒素的检查 • 测定方法 • 薄层色谱法 • 原理:黄曲霉毒素B1在365nm紫外光照射下产生蓝紫色荧光 • 分析方法 • 黄曲霉毒素标准液的制备 每1ml含0.04µg、0.2 µg、0.5 µg、1µg,溶剂为苯-乙腈(98:2) • 样品处理 • 薄层层析(两次展开) • 首先:无水乙醚, 展开12 cm • 然后:氯仿-丙酮(92:8),展开10 cm ※ 本法最低检出量为0.0004µg,灵敏度为5µg/kg。 ※ 如样品中杂质干扰严重,可采用双向展开。 ※ 层析硅胶可加入热盐酸(1:4)处理,使得斑点集中,且黄曲霉毒素B1荧光不易消失。

  38. §6 黄曲霉毒素的检查 • 测定方法 • 高效液相色谱法 • 原理:黄曲霉毒素经衍生后得到能产生强荧光的物质,可用 荧光检测器进行检测。 • 衍生的方法:柱前三氟乙酸(TFA)衍生,柱后碘衍生和柱后过溴化溴化吡啶(PBPB)衍生 • 分析方法 • 标准溶液的配制 • 黄曲霉毒素衍生标样的配制 • 样品提取、净化 • 衍生物的制备 • 色谱条件(甲醇-水的磷酸缓冲体系) ※ 本法灵敏度为0.2μg/kg

  39. §5 黄曲霉毒素的检查 • 测定方法 • 荧光分析法 黄曲霉毒素B1α-香豆素钠盐 (荧光) (无荧光) • 激发波长360nm,发射波长450nm • 免疫化学分析法 • 放射免疫法 • 亲和层析法 • 酶连免疫法(ELISA) NaOH HCl

More Related