De l’étable au laboratoire Une nouvelle méthode d’analyse au lycée : la conductimétrie

1. De l’étable au laboratoireUne nouvelle méthode d’analyse au lycée : la conductimétrie Dosage des ions chlorure du lait par conductimétrie

2. La détection des mammites cliniques par mesure de la conductivité • Les mammites constituent une pathologie majeure en élevage laitier. Leur coût économique est considérable. La précocité de détection des infections conditionne l’efficacité des traitements curatifs mis en œuvre. Une voie de diagnostic rapide non contraignante pour les trayeurs est la mesure de la conductivité électrique du lait. Cette mesure pendant la traite permet la détection d’un certain nombre de mammites cliniques mais toutes les mammites ne peuvent pas être décelées par ce procédé car d’autres facteurs d’élevage peuvent intervenir. Se référer uniquement à un seuil de conductivité pour détecter une infection mammaire semble à priori difficile. • La conductivité d’une substance dépend de sa résistance électrique. Pour le lait, cette caractéristique est déterminée par sa concentration en ions Na+, K+ et Cl-. Les mammites provoquent un changement important des équilibres ioniques entre le lait, le sang et le liquide extracellulaire, qui se traduit par une diminution de sa concentration en lactose et en ion K+ et par une augmentation de sa concentration en ions Na+ et Cl-, ceci afin de maintenir l’équilibre osmotique de la mamelle. Ce changement d’équilibre ionique se traduit par une brusque augmentation de la conductivité du lait. D’après « Intérêt de la mesure de la conductivité du lait pour la détection des mammites cliniques chez la vache laitière » Institut de l’élevage. Chambre d’agriculture de Loire Atlantique. Mars 2001

3. Dosage des ions chlorure du lait • Principe • Protocole • Matériel • Les conductimètres utilisés • La burette • Le matériel d’acquisition des données • Un exemple d’acquisition avec un conductimètre avec RS 232 • Deux exemples d’acquisition avec un conductimètre à sorties analogiques : - utilisant la platine ESAO 3.1 et le logiciel Généris - utilisant la carte d’acquisition Candiplus et le logiciel WinlaboII • Résultats obtenus

4. Principe On réalise le titrage conductimétrique d’une solution diluée de lait introduite dans un becher par une solution de nitrate d’argent de concentration C0 connue contenue dans une burette. L’équation chimique de la réaction, support du titrage est Ag+ + Cl- AgCl K = 1/Ks = 5.109 • Avant l’équivalence, les ions Cl- disparaissent et sont remplacés par des ions NO3-. Les conductivités molaires à dilution infinie à 25°C sont : 0(Cl-) = 7,63 mS.m2.mol-1 et 0(NO3-) = 7,14 mS.m2.mol-1 : la conductivité de la solutiondiminue très légèrement. Elle est une fonction affine du volume de la solution titrante tant que ce volume reste très inférieur au volume initial de la solution diluée de lait. • Après l’équivalence, la transformation chimique est terminée, on ajoute des ions Ag+ et NO3- en excès. La conductivité de la solution augmente. Elle est aussi une fonction affine du volume de la solution titrante tant que ce volume reste petit devant le volume de la solution à l’équivalence. • L’équivalence du titrage intervient pour un volume versé Véq. Ce volume est repéré par l’intersection des deux portions de droite d’équation  = f(v) • La quantité d’ions chlorure présente initialement dans le becher est égale à C0Véq.

5. Quelques informations • Dans le lait frais de vache la teneur moyenne des ions chlorure se situe entre 0,8 et 1,2 g/L. Dans le cas de laits dits « mammiteux », la valeur moyenne avoisine 1,4 g/L. • Dans l’industrie laitière, les ions chlorure sont dosés à l’aide d’un chloruremètre. [L’échantillon à doser de 0,5 mL est ajouté à une solution tampon acide (acides nitrique et acétique), un courant constant et continu circule entre 2 électrodes d’argent : il y a libération régulière d’ions argent qui précipitent avec les ions chlorure . Après l’équivalence, l’apparition d’ions argent libres modifie la tension entre les électrodes.] • Il existe une norme nationale (NF V04-212) fondée sur la potentiométrie : après défécation du lait, on réalise un dosage potentiométrique des ions chlorure dans le filtrat par une solution titrée de nitrate d’argent en milieu acide fort (électrode d’argent et une électrode de référence).

6. Protocole Une solution de 20 mL de lait entier et 250 mL d’eau distillée dans un bécher à température constante. Une solution de nitrate d’argent à 0,080 mol.L-1 à la même température dans une burette. On mesure la conductivité de la solution contenue dans le becher au cours de l’addition de la solution de nitrate d’argent. On trace la courbe donnant la conductivité  de la solution en fonction du volume v de solution de nitrate d’argent versé.

7. 1-Conductimètre portable avec RS 232 (Lutron CD-4303) Fonction conductimètre: 3 gammes de mesure : 0,1 à 199,9 S.cm-1 0,2 à 1,999 mS .cm-1 et 2 à 19,99 mS. cm-1 Précision :  (1% de la valeur lue + 2 unités de résolution). Fonction thermomètre : gamme de 0 à 60°C, précision de 0,8°C. Compensation de température automatique. Affichage à cristaux liquides. Logiciel + câble.Remarque : ce logiciel (sous DOS) ne fonctionne pas avec tous les micro ordinateurs). 2- Conductimètre CTM Initio Alimentation par pile ou 230 V. 2 gammes de mesure: 0 à 1,999 mS.cm-1 et 2 à 19,99 mS.cm-1. Précision :  (1% de la valeur lue + 2 unités de résolution). Etalonnage en un point par potentiomètre. Sortie analogique : -2,5V/+2,5V compatible avec tous type d’intreface Ex.A.O. Affichage à cistaux liquides. les 2 conductimètres utilisés

8. La burette Deux types de burette peuvent être utilisées : • une burette de Mohr • une burette automatique (Titronic de Schott par exemple) que l’on peut relier à un port série du micro-ordinateur.

9. L’acquisition des données Pour le conductimètre Lutron et la burette automatique (avec liaison RS232) • sans logiciel particulier : le fichier Hyperterminal de Windows permet de lire les données sur un port série (COM 1 par exemple). On peut donc acquérir soit les valeurs de la conductivité soit les valeurs du volume (selon que l’on relie à ce port le conductimètre ou la burette automatique). Ces valeurs sont ensuite exportées vers un tableur. paramétrage du port série pour le conductimètre Lutron paramétrage du port série pour la burette fil de liaison burette-unité centrale • avec le logiciel dédié au conductimètreLutron : la lecture des données (dates, température, conductivité, unités) est enregistrée sur le port série. Ces données de conductivité sont ensuite exportées vers un tableur. On y rajoute « manuellement » la donnée manquante (le volume) pour tracer la courbe représentant la conductivité en fonction du volume. Pour le conductimètre Initio Une carte d’acquisition (Esao, Candiplus, …) permet l’acquisition, après étalonnage, de la conductivité. Le tableur associé à cette carte permet de rajouter « manuellement » le volume et de tracer la courbe.

10. Le conductimètre Lutron : paramétrage du port série Paramétrage du port série pour utiliser hyperterminal et le conductimètre Lutron

11. La burette automatique: paramétrage du port série Paramétrage du port série pour utiliser la burette avec hyperterminal

12. La burette : câble de liaison avec l’ordinateur Câble de liaison entre la burette et le port série: à droite connecteur 4 pôles mini DIN. à gauche: douille 9 bornes sub-miniature.

13. Procédure d’acquisition du conductimètre Lutron avec son logiciel dédié. 1- Paramétrage du port série 2- Lancement du logiciel d’acquisition 3- L’acquisition des mesures de conductivité 4- Lecture des mesures avec un tableur 5- Tracé de la courbe conductivité en fonction du volume 6- La compensation de température

14. Paramétrage du port série Dans le panneau de configuration/système/ gestion de périphériques /port COM / paramètres port COM1 : choisir option par défaut

15. Lancement du logiciel d’acquisition Recopier le logiciel dédié fourni (Up232) dans un répertoire du disque dur. Eteindre l’ordinateur. Relier avec le câble fourni le port COM1 et le conductimètre . Allumer l’ordinateur, mettre la sonde au milieu de la solution de lait (veiller à l’abscence de bulle d’air). Mettre en marche l’agitateur magnétique. Mettre en marche le conductimètre, choisir le bon calibre (l’affichage est faux : il faut lire 2 mS/cm au lieu de 2 mS) et appuyer sur « record » pour éviter son arrêt automatique au bout de 10 min. Lancer Up232 , choisir « micro_P » et compléter les demandes :

16. Paramétrage de l’acquisition (1)

17. « file name » : entrer le nom du fichier qui stockera les données « max value » : valeur inutile « Sample rate » : choisir la durée entre 2 mesures (30 secondes par ex). « total record » : choisir le nombre de mesures à enregistrer. Il vaut mieux en prévoir davantage. « begin time » : renseignement inutile « mini value » : entrer 0 « com port » : entrer le n° du port : 1 « end of data input? Taper y et valider Sur le moniteur apparaissent les valeurs de la conductivité et de la température. Un « top » est entendu alors correspondant à l’enregistrement dans le fichier de la valeur mesurée. Un second top est émis 30 secondes après; il indique que la mesure n° 2 est à son tour enregistrée. Sur l’écran apparaît 3 secondes avant ce top « record » 1 : ce nombre est égal au nombre de tops émis depuis le début moins 1. Attention : après un échec de la communication, il faut redémarrer l’ordinateur. Paramétrage de l’acquisition (2)

18. L’acquisition des mesures de conductivité • A chaque top émis, un enregistrement de la valeur de la conductivité est effectué dans un fichier. La durée choisie entre 2 mesures (20 à 30 secondes) doit permettre d’ajouter le volume de nitrate d’argent choisi (avec une burette automatique ou une burette de Mohr), d’agiter suffisamment et de noter sur un papier la valeur du volume ajouté (en commençant par la valeur v = 0) • L’acquisition en cours peut-être quittée à tout moment par la touche « Echap ». Pour quitter le logiciel, taper « Exit ».

19. Lecture des mesures dans un tableur • Le fichier obtenu dans le répertoire contenant Up232 a l’extension .dat. Il peut être ouvert par un tableur. • A chaque ligne correspond une acquisition. Sur chaque ligne sont portées l’heure, l’unité de conductance (en mS et non pas en mS/cm), l’unité de température (C) , la valeur de la conductivité et la valeur de la température.

20. Tracé de la courbe • Il faut, en 3ième colonne, remplacer l’unité de température par le volume v de nitrate d’argent ajouté entre 2 tops (au premier top, donc premier enregistrement, porter v=0). • Il faut remplacer par une virgule le point de la valeur de la conductivité (par édition/remplacer) • Il faut enfin utiliser l’assistant graphique pour tracer la courbe donnant les valeurs de la colonne D (conductivité) en fonction des valeurs de la colonne C (volume).

21. Compensation de température Sur l’étiquette de la solution de calibrage sont portées les valeurs de la conductivité  suivant la température:  augmente d’environ de 2% par degré. Sur ce conductimètre, le facteur de compensation est, par défaut, réglé à 2%. [Pour le changer : appuyer sur «  factor adj », modifier la valeur et appuyer sur « temp ».] On constate, en mesurant  de cette solution de calibrage à différentes températures, que la conductivité change peu avec la tempétature. La valeur affichée par cet appareil (pour cette solution) à 20°C, 22°C ou 25°C doit être de 1,413 mS/cm (c’est à dire la valeur de la conductivité de cette solution à 25°C)

22. Procédure d’acquisition : conductimètre Initio avec platine ESAO • Utilisation de la platine ESAO 3.1. • Utilisation de la carte d’acquisition • Utilisation du logiciel généris 4.1. • Utilisation du conductimètre initio.

23. On connecte directement le conductimètreàla platine d’essais ESAO 3.1 et celle-ci est elle même directement connectée à l’ordinateur. La connection à l’intérieur de l’ordinateur s’effectuera grâce à une carte d’acquisition pilotée avec le logiciel généris 4.1. On lance généris 4.1. Dans le menu acquisition aller dans lecture puis lecture SA. Une boite de dialogue apparaît disant que pour poursuivre l’acquisition il faut être raccordé à un voltmètre ou bien à une entrée directe. Cliquez sur suite. Une boite de dialogue demande alors de choisir la voie d’acquisition. Sélectionnez là et cliquez sur OK. Apparaît alors la page de paramétrage de l’appareil. MODE OPERATOIRE

24. PARAMETRAGE • Pour paramétrer l’appareil, il fautremplir les différentes options du tableau qui apparaît à l’écran (voir ci-contre). Pour ce faire, on remplace l’appareil mis par défaut par le conductimètre. • Une fois les différentes options remplies, on sauvegarde l’appareil qui pourra resservir pour des manipulations ultérieures. • On clique ensuite avec le bouton gauche de la souris sur le bouton « choix de l’acquisition ».

25. CHOIX DE L’ACQUISITION • Pour choisir l’acquisition, cliquer sur acquisition manuelle. En effet cette dernière ne s’effectue pas en fonction du temps. • Grandeur en x mettez « volume » • Unité  mettre « mL ». • x minimum sera 0 mL. • x maximum sera 25 mL (contenance d’une burette standard. • Le nombre de points affichés n’a pas réellement d’importance, il suffit qu’il soit suffisamment grand. • Puis valider.

26. ACQUISITION • On va acquérir la valeur de la conductivité lorsque l’on verse 0 mL. Pour cela, il suffit de cliquer sur « acquisition » avec le bouton gauche de la souris. • Pour le point suivant, on verse 1 mL à l’aide de la burette et on entre la valeur 1 dans la case correspondant à « valeur en x », on appuie ensuite sur le bouton « acquisition » en cliquant dessus avec le bouton gauche de la souris. • On recommence pour un autre volume V donné et la courbe se construit directement dans le logiciel.

27. Procédure d’acquisition : conductimètre Initio avec carte Candiplus • Les deux bornes de la sortie analogique du conductimètre notées « -2,5V » et « +2,5V » sont à relier, pour la première, à la masse et pour la seconde, à la voie 1 de la carte d’acquisition Candiplus. • On procède ensuite à l’étalonnage : on cherche la fonction affine qui relie la conductivité  et la tension U mesurée par la voie 1. Pour cela on utilise deux solutions étalons (ou une solution étalon et l’air de conductivité nulle)

28. Etalonnage • Le conductimètre est relié à la carte d’acquisition. On trempe la cellule dans une solution de conductivité connue (voisine de la solution à étudier), on ajuste le calibre, on mesure la température de la solution, on repère sur l’étiquette sa conductivité à cette température (par ex. 1,278 mS/cm à 20°C), on ajuste le bouton marqué « température ». 1- On met la cellule dans l’air, on lance Winlabo2 puis par « Fichier/ nouvelle page /Acquisition /capteur / étalonnage / » on complète les informations correspondant au point1 : tension mesurée –2,50V , valeur 0. 2- On trempe la cellule dans la solution étalon précédente et on complète les informations correspondant au point 2 : tension mesurée et valeur de la conductivité. 3- On sauve ce fichier (en lui donnant un nom particulier). Ce fichier sera utilisé lors d’une autre utilisation de ce même conductimètre.

29. La mesure de la conductivité  On trempe la sonde dans une solution de conductivité  à mesurer et on procède à l’acquisition de cette mesure 1- Fichier / nouvelle page / acquisition / étalonner capteur / étalonnage / ouvrir nom de fichier / OK 2- Acquisition point par point / semi-automatique / voie 1 / démarrer. 3- taper sur la touche F5 pour que la valeur de  s’inscrive dans la seconde colonne du tableau.

30. L’acquisition des mesures au cours du dosage Après chaque introduction d’un volume v connu-que l’on doit inscrire sur une feuille de papier pour ne pas l’oublier !- on appuie sur la touche F5 pour enregistrer la valeur de  dans la seconde colonne d’un tableau. Après le dernier volume ajouté, on arrête l’acquisition puis on rentre manuellement dans la première colonne les valeurs des volumes successifs introduits. On peut alors obtenir le graphe de  en fonction du volume de nitrate d’argent ajouté.

31. Résultats Les courbes suivantes ont été obtenues avec le conductimètre Lutron (avec son logiciel dédié) et la burette automatique (non reliée à l’ordinateur). • 1- Courbe 1 : courbe de titrage des ions chlorure dans un lait (solution dosée : 20 mL de lait demi écrémé UHT dans 250 mL d’eau). • 2- Conclusions courbe 1 • 3- Courbe 2 : courbe de titrage des ions chlorure dans une solution de chlorure de potassium connue (solution dosée : 20 mL d’une solution de KCl à 0,036 mol.L-1 dans 250 mL d’eau). • 4- Conclusions courbe 2 • 5-Validation du protocole de dosage des ions chlorure du lait par conductimétrie retour à « dosage des ions chlorures »

32. Conductivité en mS.cm-1 conductivité en mS.cm-1 Volume AgNO3 en mL Véq = 8,2 mL Résultats / courbe 1

33. Conclusions courbe 1 • On trouve que la quantité d’ions chlorure présente initialement dans le volume de 20,0 mL de ce lait est : n0(Cl-) = c(Ag+).véq = 0,080.8,2.10-3 = 6,6.10-4 mol. La concentration en ion chlorure de ce lait est 33.10-3 mol.L-1 soit 1,16 g.L-1. • Ce résultat est-il juste?

34. Résultats / courbe 2

35. Conclusions courbe 2 • La quantité d’ions chlorure trouvée dans le volume de 20,0 mL de cette solution de KCl est : n0(Cl-) = c(Ag+).véq = 0,080.9,3.10-3 = 7,4.10-4 mol. La concentration en ion chlorure de cette solution est 37.10-3 mol.L-1 • L’écart relatif est de 1 / (36.10-3) = 3%. • La méthode utilisée pour le dosage des ions chlorure dans l’eau donne de bons résultats.

36. Validation du protocole de dosage des ions chlorure du lait par conductimétrie • En utilisant un protocole voisin de celui défini par la norme NF V04-212 permettant le dosage des chlorure du lait par potentiométrie, on trouve une concentration en ion chlorure égale à 0.97 g.L-1 . Avec le protocole de dosage par conductimétrie défini précédemment on trouve, pour le même lait, une concentration égale à 1,16 g.L-1. • Cette différence importante s’explique : certaines protéines du lait réagissent avec les ions Ag+ introduits. Il est nécessaire de réaliser l’étape de défécation du lait (c’est-à-dire précipitation des protéines) avant d’effectuer le dosage des chlorure sur un filtrat exempt de protéines. • Une défécation simplifiée consiste à introduire un certain volume d’acide nitrique à 1 mol/L dans la solution diluée de lait. Le dosage des ions chlorure par conductimétrie peut se faire directement dans cette solution acidifiée de lait. • Pour déterminer le volume d’acide nitrique à 1 mol/L à ajouter on étudie l’évolution du pH lors de l’addition d’acide nitrique à une solution S0 diluée de lait (20 mL de lait + 250 mL d’eau par ex.). On note le volume v correspondant au point d’inflexion obtenu : v est de l’ordre de 1,4 mL (soit 30 gouttes) pour un lait demi écrémé.Remarque : le résultat du dosage des ions chlorure par conductimétrie n’est pas modifié si on utilise un volume compris entre 20 et 40 gouttes d’acide.

37. Protocole de dosage des ions chlorure du lait par conductimétrie • a) Soit une solution So diluée de lait (20 mL et 250 mL d'eau distillée). On fait un suivi pH-métrique de cette solution quand on ajoute de l'acide nitrique à 1 mol/L. On note le volume équivalent (de l'ordre de 1,5 mL soit 30 gouttes). • b) On prépare une nouvelle solution So et on rajoute le volume d'acide nitrique précédemment trouvé. On effectue sur cette solution un dosage conductimétrique par AgNO3 à 0,080 mol/L • Rem : le nombre de gouttes est approximatif ; entre 20 et 40 gouttes les résultats obtenus (pour la concentration en ion chlorure) sont les mêmes. Il ne faut pas mettre trop d'acide car la conductivité de la solution devient trop importante et le conductimètre "perd" en précision. • Résultats : voir courbe 3. Le volume équivalent est égal à 6,7 mL (à 0,1 mL près) donc la concentration des ions chlorure est 0,95 g/L. (le dosage potentiométrique donne 0,97 g/L).

38. Norme Française NF V 04-212 : Détermination de la teneur en chlorure du lait (1/3) • Principe : après défécation du lait, dosage potentiométrique des ions chlorures dans le filtrat par une solution titrée de nitrate d’argent en milieu acide fort. • Réactifs : • Hexacyanoferrate (II) de potassium K4Fe(CN)6,3H2O solution à 150 g/L • Acétate de zinc Zn(CH3COO)2,2H2O solution à 300g/L • Hydroxyde de sodium solution environ 0,1 N • Nitrate de baryum Ba(NO3)2 solution à 50g/L • Nitrate d’argent solution titrée à 0,08 mol/L (dissoudre 13,6 g de nitrate dans de l’eau pratiquement exempte de CO2 et compléter à 1000mL). • Acide nitrique solution environ 4 mol/L • Papier tournesol • Appareillage : • Potentiomètre muni d’une électrode de mesurage appropriée pour la détermination des chlorures (électrode d’argent et une électrode de référence, par exemple électrode au sulfate de mercure). • Mode opératoire : • a- Prélever à la pipette 20 mL et peser à 0,001g près l’échantillon pour essai de lait et les introduire dans une fiole jaugée de 200 mL • b-Défécation • 1. cas du lait non dichromaté • ajouter successivement dans la fiole jaugée contenant la prise d’essai : • -2mL de la solution d’hexacyanoferrate (II) de potassium et agiter puis, • -2mL de la solution d’acétate de zinc et agiter. • Laisser reposer 10 à 15 min. Compléter au trait repère avec de l’eau puis ajouter 2 mL d’eau pour tenir compte du volume du précipité. Agiter, laisser reposer puis filtrer.

39. Norme Française NF V 04-212 : Détermination de la teneur en chlorure du lait(2/3) • 2 . cas du lait dichromaté • ajouter successivement dans la fiole jaugée contenant la prise d’essai : • -30 à 40 mL d’eau • -2mL de la solution d’hexacyanoferrate (II) de potassium et agiter puis, • -2mL de la solution d’acétate de zinc et agiter. • Attendre 2 minutes et neutraliser à l’aide de la solution d’hydroxyde de sodium en vérifiant la neutralité à l’aide du papier tournesol. • Après 5 minutes, ajouter 10 mL de la solution de nitrate de baryum. Laisser reposer 10 à 15 min. puis ajouter 2 mL d’eau pour tenir compte du volume du précipité. Agiter, laisser reposer puis filtrer. • c- dosage potentiométrique • mesurer 100 mL du filtrat obtenu à l’aide d’une fiole jaugée. Les introduire dans un becher de 250 mL • Ajouter 2 mL de la solution d’acide nitrique • Immerger l’électrode du potentiomètre dans la solution contenue dans le becher. Titrer le contenu du bécher avec la solution de nitrate d’argent en agitant constamment et en modifiant le volume des additions successives en fonction des variations de potentiel observées jusqu’à l’obtention du point d’équivalence qui correspond au maximum de variation rapporté au volume de solution titrante correspondant. • d- essai à blanc : effectuer un essai à blanc en remplaçant le filtrat par 100 mL d’eau

40. Norme Française NF V 04-212 : Détermination de la teneur en chlorure du lait (3/3) • Calculs • La teneur en chlorure en pourcentage en masse est : (V1-V0).c.f / m • V0 = vol en mL de la sol de nitrate d’argent utilisé pour l’essai à blanc, • V1= vol en mL de la sol de nitrate d’argent utilisé pour la détermination c) • c = concentration en mol/L de la solution de nitrate d’argent • m = masse en g de la prise d’essai • f = facteur permettant d’exprimer les résultats en pourcentage d’un certain type de chlorure • f= 3,55 pour exprimer en % de Cl- • f = 7,46 pour exprimer en % de KCl

41. Protocole pour le dosage des ions chlorure du lait par potentiométrie (variante de la norme NF V04-212) • On prélève à la pipette 20,0 mL de lait. • On ajoute 2 mL de la solution d’hexacyanoferrate (II) de potassium à 150 g/L, on agite. • On ajoute 2 mL de la solution d’acétate de zinc à 300 g/L. On agite. On laisse reposer 10 à 15 minutes. • On ajoute ensuite environ 200 mL d’eau distillée et on filtre soigneusement cette solution sur buchner en lavant bien le précipité. • On ajoute au filtrat 4 mL d’acide nitrique à environ 4 mol/L. • On réalise ensuite le dosage potentiométrique sur la totalité du filtrat acidifié obtenu. La concentration de la solution de nitrate d’argent est 0,080 mol/L.

42. Courbe N°3 Série 1 : évolution de la conductivité lors de l’addition d’une solution de nitrate d’argent à 0,080 mol/L à une solution contenant (20 mL de lait demi écréme + 250 mL d’eau + 35 gouttes HNO3 à 1 mol/L). Le volume équivalent est de 6,7 mL. Série 2 : titrage potentiométrique d’une solution contenant (20 mL de lait demi écréme + 250 mL d’eau + 35 gouttes HNO3 à 1 mol/L) par une solution de nitrate d’argent à 0,080 mol/L. Le volume équivalent est de 6,8 mL.