La sécrétion de type III chez les bactéries à Gram négatif Sophie Bleves

1. La sécrétion de type III chez les bactéries à Gram négatif Sophie Bleves

2. La sécrétion de type III ou contact-dépendant • Largement conservée chez les bactéries à Gram négatif • Pathogènes d’animaux (Yersinia spp, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Pseudomonas aeruginosa, EPEC et EHEC, ….) • Phytopathogènes(Erwinia amylovora, Pseudomonas synringae, Ralstonia solanacearum, …) • Symbiotes (Rhizobium, Mesorhizobium loti, Bradyrhizobium japonicum. Pseudomonas fluorescens… ) • Permet à desbactéries adhérant à la surface de leur cellule cible d’injecter des protéines bactériennes toxiques, les effecteurs,directement dans le cytosol de celles-ci • bactéries extracellulaires ou dans des phagosomes • Mécanisme de virulence: contrôle de l'hôte par détournement des machineries intracellulaires • Symbiose: nodulation, bactéries fixatrices d’azote, effecteurs reconnus comme modulateur de la symbiose

3. Bactérie Injection des effecteurs en UNE étape Cellule eucaryote cible Translocation MP ME Sécrétion MI Machinerie de sécrétion (20aine de protéines, homologie flagelle)

4. EPEC (Sekiya et al., 2001) EscF EspA S. Enterica Spi-2 (Chakravortty et al., 05) SseB & C protéines sécrétées ? Aiguille S. Typhimurium Spi-1 (Kubori et al., 1998) PrgI S. flexneri (Blocker et al., 1999) MxiH Y. enterocolitica (Hoiczyk and Blobel, 2001) YscF C. diphteriae (Swierczynski & Ton-Tat, 06) SpaH P. aeruginosa (Pastor et al., 2005; Soscia et al., 2007) PscF Aucun homologue de YscF chez les phytopathogènes…..

5. Le pilus Hrp des phytopathogènes (Jin and He, 2001) P. syringae pv tomato, R. solanacearum, E. amylovora Modèle: conduit Coloration du pilus Hrp par un effecteur sécrété

6. F 60-70Å YscF6kDa, ssu aiguille, structure coiled-coil (polymérisation?) Cochaperonnes (YscE&G) 600-800Å Sécrétine YscC Ne dérive pas du flagelle YscWlipoprotéine Localisation correcte YscC ME YscJlipoprotéine Anneau de 24 ssu EscJ Yip et al. (05) Les composants de la machinerie de sécrétion de type III YscN ATPase de type F0F1 Double hexamère Localisées dans MI 1 ou plusieurs segments transmembranaires HrcN Muller et al. (06)

7. Assemblage de la machinerie de sécrétion de type IIIDiepold et al (2010)Diepold et al (2011) Sécrétine --> Anneau de MI --> ATPase + Anneau cytoplasmique MEconnecteur Appareil d’export ne nécessite que oligomérisation de YscV --> assemblages indépendants qui convergeraient sur anneau de MI NB ordre différent pour le flagelle

8. S.flexneri mutant spa32 YscP- WT Kubori et al. (2000) Y. enterocolitica mutant yscP Tamano et al. (2002) Journet et al (2003) S.Typhimurium mutant invJ La famille YscP détermine la longueur de l'aiguille

9. La longueur de l'aiguille est déterminée par le nombre de résidus de YscP Bifonctionalité de YscP: switch YscF--> Yops Aigrain et al (2005) Modèle du "Molecular ruler" Journet et al (2003)

10. Hiérarchie dans la sécrétion Trois classes de protéines sécrétées Sorg et al (2007) Wagner et al (2010) Lara-Tejero et al (2011)     Sous-unité de l’aiguille --> translocateurs --> effecteurs Yop Enveloppe bactériennemembrane de l’hôte cytosol Signaux de sécrétion discriminants? Plateforme de triageAnneau Cytoplasmique+partenaires ATPase

11. Cornelis (06) La longueur de l'aiguille a évolué proportionellement à la taille des adhésines, responsables du contact (Mota et al. 2005)

12. AcrV LcrV PcrV Complémentation hétérologue “Head-neck-base” WT needles Complexe + large Base + étroite Marquage a LcrV lcrV needles LcrV forme une structure distincte au bout de l’aiguille Mueller et al. (2005) LcrV est importante pour la virulence, Ag protecteur de la peste Plateforme d’assemblage du pore?

13. Cornelis (06) Modèle “LcrV tip complex”