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组织学绪论

组织学绪论. 组织胚胎学教研室. 组织学研究内容和意义 组织学发展简史和当代组织学（自学） 组织学技术简介 组织学的学习方法. 。. 。. 一 、 组织学研究 内容 和意义. (一) 组织学研究 内容 组织学 （ histology）： 是研究机体 微细结构 及其相关功能的科学。 研究 内容 组织（ tissue） 细胞（ cell） 亚细胞结构 分子水平. 。. 。. 概念. 组织 ： 由形态相似，功能相关的细胞及细胞 外基 质组成 。

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Presentation Transcript

  1. 组织学绪论 组织胚胎学教研室

  2. 组织学研究内容和意义 • 组织学发展简史和当代组织学（自学） • 组织学技术简介 • 组织学的学习方法

  3. 。 。 一、组织学研究内容和意义 (一) 组织学研究内容 • 组织学（histology）：是研究机体微细结构及其相关功能的科学。 • 研究内容 组织（tissue） 细胞（cell） 亚细胞结构 分子水平

  4. 。 。 概念 • 组织：由形态相似，功能相关的细胞及细胞外基质组成。 • 器官：几种不同的组织相互结合组成器官，每－器官 具有一定的形态结构，并完成一定的生理功能。 • 系统：由多个器官联合组成，并完成连续的生理活动。 如消化系统。

  5. 上皮组织 结缔组织 肌组织 神经组织 基本组织（总论）： 器官、系统（各论）： 细 胞 →组织 → 器官→ 系统 细胞外基质

  6. (二) 组织学在医学中的地位和意义 组织学（histology）是医学课程中一门基础学科。 组织学在医学课程中是与基础和临床各学科都有一定联系。 尤其与解剖学、病理学、生理学、生物化学、免疫学均有密切的联系。 近代生物学和基础医学的迅速发展，各学科的内容互相渗透、互相推动、紧密相关。

  7. 二、组织学技术简介 （一）一般光学显微镜术 • 镜下结构称光镜（light microscope LM) 结构； • 放大倍数1000倍； • 分辨率0.2μm； • 组织制成薄片，以利光线通过。

  8. 1.石蜡切片术(paraffin sectioning) 制片过程 （1）取材（1.0cm)固定(甲醛） 酒精脱水（低-高） 透明（二甲苯） 浸蜡包埋 切片（5－10um） 展片； （2）脱蜡（二甲苯）酒精（高-低） 水 苏木精-伊红染色 酒精脱水（低-高） 透明（二甲苯） 封片（树胶）

  9. 苏木精（hematoxylin）：细胞核和胞质内的嗜 碱性物质着蓝紫色 。 伊红（eosin）：细胞质基质和间质内的胶 原纤维等着红色。 （3）染色(staining)： 是用染料使无色组织切片着色，增加对 比度， 便于镜下观察。染色方法很多，但没有一种 能使细胞全部结构同时着色。 常用的染色方法： H.E

  10. 2.特殊染色方法 • 银染：用硝酸银将神经细胞染为黑色。 • 醛品红染色：将弹性纤维染为紫色。 • 甲苯胺蓝：将肥大细胞的分泌颗粒染为紫色。 • 活体染色：取动物组织材料之前活体注射染料，观察巨噬细胞的吞噬情况。

  11. 名词： 1、嗜碱性：细胞和组织的酸性物质或结构与碱性染料 （如苏木精）亲合力强，称嗜碱性。 2、嗜酸性：碱性物质或结构与酸性染料（如伊红）亲 合力强，称嗜酸性。 3、中性：若与两种染料的亲合力均不强的。 4、亲银性：银染法中有些组织结构可直接使硝酸银还 原而显示，称此为亲银性。 5、嗜银性：有些结构无直接还原作用，需加入还原剂 方能显色，称此为嗜银性。 6、异染性：有些组织成分如结缔组织和软骨基质中的 糖氨多糖，当用甲苯胺蓝等碱性染料染色 后呈紫红色，这种现象称为异染性。

  12. 3.其他制片方法 冰冻切片：组织液氮骤冷，恒冷箱切 片机切片(糖类、脂类、酶、核酸等）。 涂片：将游离的细胞直接涂于切片上。 铺片：将疏松结缔组织或肠系膜等撕 成薄片铺在载玻片上。 磨片：骨和牙等硬组织可磨为薄片。

  13. (二)电子显微镜技术 (electron microscopy) 光镜：分辨率为0.2μm，放大倍数约为1000倍； 电镜：分辨率为0.2nm，比光镜高1000倍，可放大几万倍到几十万倍，因此电镜能观察到细胞的更微细结构。 在光镜与电镜下进行观察，常用的长度计量单位为毫米（mm）、微米（μm）和纳米（nm）。 这些单位间的关系如下：μm(微米)＝10-3mm(毫米)；nm(纳米)＝10-3μm(微米)

  14. 1.透射电子显微镜技术(transmission electron microscope TEM) 透射电子显微镜技术的组织须用戍二醛或锇酸固定，树脂包埋，超薄切片(厚50～80nm），再经铅盐等重金属盐染色后，在透射电子显微镜下观察。 电镜下所见的结构称超微结构(ultrastructure)，被金属所染部位，荧光屏上显得暗，图象较黑，称为电子密度高；反之则称为电子密度低。 被检结构和重金属盐相结合的称正染色；被检结构本身不与重金属盐结合，而其周围染上重金属盐的称负染色。一般染色都是正染色。

  15. 1、透射电镜 ：观察组织、细胞内部超微结构。 分辨率0.2nm。 标本制备：1、固定 （戊二醛与锇酸等） 2、包埋（树脂） 3、切片（50-80nm) 4、染色（醋酸铀和柠檬酸铅等重金属） 标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。 电子密度高、电子密度低：被重金属浸染呈黑色的结构，称电子密度高；反之，浅染的部分称电子密度

  16. 2.扫描电子显微镜技术（scanning electron microscope） 扫描电子显微镜技术要观察的组织不需制成切片。 固定后的标本，在其表面喷镀金，在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构。 如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。

  17. 2、扫描电镜 ：用于观察组织表面的立体结构。 分辨率5-7nm

  18. 组织化学术(histochemistry) 通过化学或物理反应原理,在切片上加某种试剂，和组织中的待检物质发生化学反应，其最终产物或为有色沉淀物，以光镜观察；或为重金属沉淀，用电镜观察。显示组织切片或细胞内糖类、脂类、酶、核酸等化学成分。

  19. PAS反应： (periodic acid Schiff reaction) 显示多糖和蛋白多糖的常用方法，又称过碘酸一雪夫反应。过碘酸先将糖分子的乙二醇基氧化为乙二醛基，后者继而与Schiff试剂结合，形成紫红色反应产物。

  20. 免疫组织化学术 (immunohistochemistry) 应用抗原与抗体结合的免疫学原理，用标记的抗体检测组织细胞内抗原物质的技术。 常用的标记物（1）荧光色素 （2）酶 （3）胶体金

  21. 放射自显影术：通过活细胞对放射性物质的特异性摄入以显示该细胞的功能状态、或该物质在组织和细胞内的代谢过程。放射自显影术：通过活细胞对放射性物质的特异性摄入以显示该细胞的功能状态、或该物质在组织和细胞内的代谢过程。 原位杂交：核酸分子杂交组织化学术。 图象分析技术：应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织和细胞内各种有形成分的数量、体积、表面积等参数。 体视学：根据连续的组织切片，应用计算机进行三维重建，以获得微细结构的立体模型。 细胞培养术：把从机体取得的细胞模拟体内的条件下进行培养的技术。 组织工程：是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等。

  22. 三、组织学的学习方法 1、平面与立体 的关系 2、结构与功能的联系 3、静态与动态的关系 4、分析比较 5、纵横联系

  23. 思考题 • 名词解释: 组织学 光镜结构 电镜结构 超微结构 H.E染色 嗜酸性 嗜碱性 中性 异染性嗜银性 亲银性 石蜡切片术 透射电镜术 扫描电镜术 组织化学术 免疫组织化学术 原位杂交术 细胞培养术 • 怎样才能学好组织学？

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