phương pháp Nuôi cấy vi sinh vật Kỵ khí

1. ph??ng pháp Nuôi c?y vi sinh v?t K? khí các cách Nuôi c?y vi sinh v?t K? khí bí quy?t Nuôi c?y vi sinh v?t K? khí Là ph??ng pháp tiêu dùng Phân l?p vi khu?n k? khí – mà ch? phát tri?n trong ?i?u ki?n thi?u oxy và khi có m?t carbon-di-oxide (20%) Có nhi?u cách khác nhau ?? t?o môi tr??ng k? khí nh?ng ch? y?u là 2 cách sau: G ph??ng pháp th? 1 ?i?u ki?n k? khí Có kh? n?ng ???c t?o thành trong 1 bu?ng kín – l? k? khí (McIntosh & Filde’s jar) – ???c khi?n b?ng thép không g? ho?c b?ng nh?a polycarbonate / polypropylene. G bí quy?t thi?t b? hai , ?i?u ki?n y?m khí Có kh? n?ng ???c t?o thành b?i tiêu th? môi tr??ng k? khí trong ?ng th? (có ch?a ch?t kh?) cung ?ng ?i?u ki?n y?m khí. a. ph??ng pháp thi?t l?p ?i?u ki?n k? khí trong bình k? khí: – bí quy?t gói t?o k? khí – Gas pack: G Gas pack ???c tiêu th? trong th??ng m?i và ???c s? d?ng nhi?u hi?n t?i. G Gas-pack là m?t gói s? d?ng 1 l?n có ch?a viên sodium borohydride, coban clorua, axit xitric và sodium bicarbonate. G các hóa ch?t này t?o nên hydro và carbon dioxide khi n??c ???c thêm vào (kho?ng 10 ml) (m?t s? gaspak không c?n n??c) G Hydrogen k?t h?p v?i oxy v?i s? có m?t c?a 1 ch?t xúc tác. G Sau lúc các ??a c?y ???c ??t vào trong 1 bình kín khí, gói “Gas-pak” v?i n??c ???c thêm vào, ???c gi? bên trong và n?p ???c ?óng ch?t. bây gi? trên th? ph?n có r?ng rãi hãng ch? t?o gói t?o k? khí này và th??ng t?t c? ko b?t bu?c ph? tr? thêm n??c nh?: AnaeroPack- Anaero c?a hãng Mitsubishi, Anaerogen Oxoid (Thermo Scientific), Anaerocult® A – Merck. Và m?t s? hãng c?ng kèm theo c? h?p ? k? khí v?i các d?ng hình và kích th??c khác nhau và ch?t ch? th?. G AnaeroPack- Anaero c?a hãng Mitsubishi G Anaerogen Oxoid (Thermo Scientific) G Anaerocult® A – Merck – nh?ng d?ng H?p ? k? khí G Bình ? k? khí d?ng ??ng: Bình k? khí 2.5 lít là 1 ph?n quan y?u trong h? th?ng nuôi c?y k? khí. Bình ???c ngo?i hình ?? tiêu th? v?i túi t?o môi tr??ng k? khí 2.5 lít và ch?a ???c 12 ??a petri G Bình ? k? khí nh?a n?m ngang – Nh?t: Bình ? nh?a ???c ngo?i hình chuyên bi?t tiêu dùng trong nuôi c?y vi sinh k? khí: Helicobacter spp, Campylobacter spp, Clostridium spp, Hemophillus spp, Neisseria spp,… g?m 2 th? tích c?n b?n 2,5 lít ( 12 ??a petri 90mm ) và 7 lít ( 42 ??a petri 90mm). G Bình ? k? khí b?ng kim lo?i: Dung tích: 3L; Kích th??c: ?kính 120 x cao 270mm; ??ng ???c 15 ??a Petri 100mm; C?u t?o thân b?ng thép ko g?; N?p nh?a trong, nhìn th?y ???c bên trong. b. bí quy?t thay ??i không khí G ?i?u này ???c th?c hi?n b?ng bí quy?t rút ko khí có trong bình ra và khi?n ??y hydro và carbon dioxide. G Bình y?m khí ???c phân ph?i ??u vào và ??u ra và van s?c ép G V?a khí vào ???c chuy?n vào trong bình – nh?ng song song khí ra ???c rút ra. G Sau lúc ??t các ??a và ch?t xúc tác palladium vào thì ?óng ch?t bình G không khí còn l?i (oxy t? tr??c) ???c hút ra b?ng b?m hút chân ko G tr??c tiên Khí hydro (90%) ???c b?m vào, k? ti?p là carbon dioxide (10%) và ?. – cách s? d?ng môi tr??ng k? khí: + Robertson’s Cooked Meat (RCM) Broth: nh?ng h?t gi?t m? n?u chín ???c s? d?ng nh? m?t ch?t kh? ?? h?p th? oxy.

2. G Vi khu?n k? khí s? d?ng gi?t – phân gi?i ??m. Ví d?: Cl. tetani G Vi khu?n k? khí s? d?ng carbohydrate trong gi?t – phân gi?i ???ng. Ví d?: Clostridium perfringens + THIOGLYCOLLATE BROTH Thioglycollate ???c s? d?ng nh? 1 ch?t kh? h?p th? ôxy. G v?ng m?nh vi khu?n xác nh?n b?i ?? ??c. b?o ??m ch?t l??ng ?? ki?m tra xem quy trình có ho?t ??ng hay không ng??i ta s? ??t ch? th? vào bên trong h?p ? k? khí, có 2 d?ng ch? th?: G Ch? th? hóa h?c: Ch? th? màu xanh methylene – chuy?n sang màu tr?ng lúc gi?m ?i?u ki?n k? khí. G Ch? th? sinh h?c: Pseudomonas aeruginosa (vi khu?n hi?u khí) s? t?ng tr??ng n?u ?i?u ki?n k? khí không ???c duy trì. Bài vi?t chi ti?t:https://visitech.vn/phuong-phap-nuoi-cay-vi-sinh-vat-ky-khi-4968-2/