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基因工程 ( 跨课程 ) 综合性实验

基因工程 ( 跨课程 ) 综合性实验. 生命科学与生物制药学院 李黄金. 前言. 作为我院的本科生，了解生物技术药物研究、开发和生产的过程，掌握与生产工艺和质量控制研究密切相关的技术手段是非常必要的。. 生命科学与生物制药学院. 前言. 　　以蛋白质为基础的基因工程药物和基因工程抗体是当今最主要的生物技术药物形式， 　　以 DNA 为基础的基因治疗制剂和 DNA 疫苗是未来生物制药的主要发展方向之一。. 前言. 《 基因工程 》 、 《 发酵工艺学 》 和 《 生物技术药物药剂与药动学 》 　　本综合性实验即为上述三门课程的跨课程综合性实验。. 综合实验. 综

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基因工程 ( 跨课程 ) 综合性实验

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Presentation Transcript

  1. 基因工程(跨课程)综合性实验 生命科学与生物制药学院 李黄金

  2. 前言 作为我院的本科生，了解生物技术药物研究、开发和生产的过程，掌握与生产工艺和质量控制研究密切相关的技术手段是非常必要的。 生命科学与生物制药学院

  3. 前言 　　以蛋白质为基础的基因工程药物和基因工程抗体是当今最主要的生物技术药物形式， 　　以DNA为基础的基因治疗制剂和DNA疫苗是未来生物制药的主要发展方向之一。

  4. 前言 《基因工程》、《发酵工艺学》和《生物技术药物药剂与药动学》 　　本综合性实验即为上述三门课程的跨课程综合性实验。

  5. 综合实验 综 合 实 验 项 目 I 重组蛋白质类药物 Ⅱ重组ＤＮＡ类药物 1、工程菌构建 1、TCR工程菌构建 2、TCR质粒DNA大规模制备 2、工程菌表达筛选 3、TCR质粒-脂质体复合物制备 3、工程菌甘油种制备 4、TCR体外基因转染 4、工程菌生长曲线分析 5、表达进程与影响因素分析 5、TCR转染基因表达检测 6、TCR转染体外活性检测 6、工程菌发酵 7、TCR转染体内试验（药代、药效） 7、表达产物分离纯化

  6. 实 验 日 程

  7. 实 验 日 程

  8. 实 验 日 程

  9. 实验分组 • 每个班按学号顺序分为8组，组号按序依次为1－8组。 • 每组人数分别为9、9、9、8、8、8、8、8。 • 涉及到排序的实验项目，如在超净工作台上的接种步骤，一律按1到8组顺序进行。

  10. 实验编号 • 实验过程中必需对试管、摇瓶等进行标记，故统一进行编号。 • 编号规则为：班代表字母+组号-成员号，A代表1班，B代表2班。 • 举例：04（1）班8组8号同学挑取的转化子标记为A8-8

  11. 实验要求与质量控制 • 1、预习 　　实验前须充分预习，要求随机抽查时，每一位同学能够清晰的阐述整体实验思路和具体的实验项目、原理。

  12. 实验要求与质量控制 • ２、实验过程 　　（１）实验纪律 　　（２）主动性、能动性与团队精神相接合 　　（３）合理安排时间 ，将能否在规定时间内完成实验内容作为衡量学生动手能力的关键指标之一

  13. 实验要求与质量控制 • ２、实验原始记录与结果整理 每天必须及时、真实、完整地记录当天所做实验情况。 　　　记录实验过程中的异常情况，分析其原因，并将关键性实验结果整理于实验记录本。 　　　记录完成后，找带教老师签名方可离开实验室。 　　　若记录情况不好，带教老师不能签名。

  14. 实验要求与质量控制 • ２、实验原始记录与结果整理 　（１）重组蛋白药物实验单元关键性结果 • 1）表达筛选与甘油种制备：随机挑选转化子表达诱导SDS-PAGE凝胶扫描照片、筛选确定的工程菌株株号及其表达水平（%）。 • 2）生长曲线分析：选定工程菌培养过程中的OD600测定结果表及生长曲线图。 • 3）表达影响因素试验：不同诱导时机表达诱导实验诱导前、后样品的SDS-PAGE凝胶扫描照片、表达水平（％）、OD600值。 • 4）表达进程试验：工程菌（GST）表达诱导过程不同时间点样品SDS-PAGE凝胶扫描照片、表达水平（％）。 • 5）表达产物分离纯化：示教分析与讨论

  15. 实验要求与质量控制 • ２、实验原始记录与结果整理 　（２）重组ＤＮＡ药物实验单元关键性结果 • 1）质粒DNA大规模制备：阴离子交换纯化层析图、提取和纯化过程中样品琼脂糖电泳图、质粒纯品纯度和浓度测定结果。 • 2）质粒-脂质体复合物制备：包封率测定结果 。　　　 • 3）基因转染、体外表达、体外活性、体内给药：示教分析与讨论。

  16. 综合实验报告 须按《基因工程（跨课程）综合实验论文撰写规范》撰写、并提交综合实验报告（电子打印版及电子版）。

  17. 综合实验报告 1）封面： 标题： 基因工程（跨课程）综合性实验论文 姓名： 班级： 学号： 指导教师：李黄金、周林、胡海梅、赵林、陈伟、段涛、张玲、袁茵、薄华本、王金全、吴凤麟 广东药学院 生命科学与生物制药学院 生物制药研究所

  18. 综合实验报告 2)知识产权申明 本综合性实验所采用的工程菌株与工艺技术参数主要来源于广东药学院生物制药研究所的相关课题与研究成果，相关知识产权归广东药学院生物制药研究所所有，未经许可不得擅自影印相关讲义和使用相关工程菌株与工艺技术参数。

  19. 综合实验报告 3)论文内容 　　中英文摘要 　　前言 　　材料与方法 　　结果与讨论 　　参考文献 　　致谢

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