INTRODUCCIÓN A LA BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA

1. INTRODUCCIÓN A LA BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA Facultad de Farmacia Universidad de Valparaíso M. Alejandro Dinamarca T.

2. BIOTECNOLOGÍA; CONCEPTO E HISTORIA • Aplicación de los sistemas biológicos en la solución de problemas relacionados con la mejora de la calidad de vida del hombre. • En éste contexto podemos apreciar que el hombre ha desarrollado Biotecnología desde hace miles de años.

3. BIOTECNOLOGÍA MOLECULAR La nueva era. • En la actualidad la biotecnología se ha visto revolucionada por la introducción de la Ingeniería Genética o también llamada tecnología del ADN recombinante. • Para situar a la biotecnología tradicional en su nueva era, se ha incorporado el concepto de Biotecnología Molecular.

4. TECNOLOGÍA del DNA RECOMBINANTE AMPLIFICACIÓN POR PCR Enzima de restricción   SINTESIS QUÍMICA LIGAR VISUALIZACIÓN GGTTCCCAA Diagnóstico molecular TRANSFORMACIÓN DE ORGANISMO SECUENCIACIÓN Genómica funcional

5. Creación de bases de datos de ADN y péptidos Producción de SOMATOSTATINA en bacterias Sintesis enzimática del ADN por PCR Taq Primer genoma secuenciado Inicio de la ingeniería genética 80s 50s 60s 70s 90s 2000s Primera proteína terapeutica producida por ingeniería genética El codigo genético Es controlado. Clonación del primer animal Era de la genómica funcional Chips de DNA Diagnóstico molecular Farmacología molecular Biomedicina

6. PASOS PARA DESARROLLAR BIOTECNOLOGÍA MOLECULAR BUSCAR/DETERMINAR LA FUNCIÓN BIOLÓGICA Determinan el ámbito de desarrollo IDENTIFICAR EL NIVEL A TRABAJAR AISLAR EL NIVEL Biotecnología ambiental Biotecnología de diagnóstico CONTROLAR LA FUNCIÓN Biotecnología de alimentos MANIPULAR LA FUNCIÓN BIOLÓGICA Biotecnología farmacéutica TECNIFICAR SU OBTENCIÓN, CONTROL Y MANIPULACIÓN MASIFICAR SU PRODUCCIÓN

7. BIOTECNOLOGÍA; Ambitos de desarrollo Diagnóstico Farmacia Antibióticos Nuevos fármacos Vacunas Hormonas Terapias génicas Salud humana Agricultura y ganadería Calidad de alimentos Calidad ambiental Alimentos Mejora de procesos Obtención de nuevos alimentos Desarrollo de nutraceúticos Desarrollo de aditivos Medio ambiente Tratamiento de residuos Biorremediación Energías limpias

8. BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA, Fesarrollo de fármacos, Farmacogenética Center for Pharmaceutical Biotechnology, College of Pharmacy University of Illinois, CHICAGO Within the last decade, developments in biochemistry, molecular and structural biology and microbiology have fundamentally altered pharmaceutical and biomedical research, and have led directly to societal benefits through improved medical diagnosis and therapeutics. Biotechnology has become by far one of the most rapidly developing areas in pharmaeutical research. Increasing proportions of multinational pharmaceutical firm's research and development budgets are devoted to biotechnology, and several of the biotechnology-based firms that were started only a few years ago are now evolving into fully integrated pharmaceutical companies, with developing areas in pharmaceutical research, and the demand for individuals with advanced training in this are is subsantial and growing. Durante la década pasada, los avances en bioquímica, biología molecular, microbiología y bioinformática han revolucionado la investigación farmacéutica y biomédica, transfiriendo directamente las ventajas en diagnóstico y terapia médica a la sociedad. El área de mayor desarrollo en biotecnología ha sido la investigación farmacéutica, lo que se refleja en el considerable aumento de los presupuestos en investigación, y en el nacimiento de empresas farmacéuticas multinacionales que se dedican a la biotecnología farmacéutica. Estas, finalmente se han convertido en entidades de investigación farmacéutica, con la consecuente demanda de individuos con entrenamiento adecuado y avanzado que permitan asegurar el exito de cada empresa.

9. BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA, desarrollo de fármacos, Farmacogenética Fármaco genética Productos recombinantes Alimentos transgénicos PRODUCCIÓN DESARROLLO • Mejora de la tecnologías de producción • Búsqueda de nuevas formas de producción • Obtención de productos de mayor valor agregado • Nuevas moléculas bioactivas • Modificación de las existentes Proteínas Vacunas Recombinantes Antibióticos Hormonas Ingeniería de operones Ingeniería Metabólica Animales transgénicos Vegetales transgénicos DIAGNÓSTICO MOLECULAR Genómica funcional Chips genómicos y funcionales Proteómica-Inmunología PCR de tiempo real

10. BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA, desarrollo de fármacos, Farmacogenética Fármaco genética Productos recombinantes Alimentos transgénicos PRODUCCIÓN DESARROLLO • Mejora de la tecnologías de producción • Búsqueda de nuevas formas de producción • Obtención de productos de mayor valor agregado • Nuevas moléculas bioactivos • Modificación de las existentes Vacunas Recombinantes Antibióticos Antitumorales Ingeniería de operones Ingeniería Metabólica Animales transgénicos Vegetales transgénicos DIAGNÓSTICO MOLECULAR Genómica funcional Chips genómicos y funcionales Proteómica-Inmunología PCR de tiempo real

11. Producción Células animales Animales Transgénicos Vegetales transgénicos Microorganismos Bacterias levaduras Resistenciasnaturales a virus y químicos Antibióticos Péptidos simples Vacunas Moléculas simples Proteínas terapéuticas Anticuerpos Moléculas complejas Proteínas terapéuticas Anticuerpos Moléculas complejas No hay necesidad de reactores No hay necesidad de reactores Cultivos en bioreactores Cultivos celulares en bioreactores Bacterias levaduras hongos Ratones de investigación Vacunos, ovinos Cultivos de células mamarias Genética simple Genética simple Genética compleja Genética compleja Vitamina A Beta Caroteno Activador tisular de plasminógeno tPA Factor VIII Hormona hGH Insulina Hormona hGH Vacuna Hepatitis B

12. PRODUCCIÓN DE FÁRMACOS EN MICROORGANISMOS • Tecnología de bioreactores es la de mayor uso. • Tiempos generacionales cortos • Velocidad de crecimiento • Metabolismo • Manejo genético y molecular Como carencias: Problemas de regulación génica Problemas en los requerimientos metabólicos Tecnología de operones Ingeniería metabólica Actualmente en pleno desarrollo Búsqueda de nuevos compuestos bioactivos: Antibióticos Antitumorales

13. Limitado a moléculas procariontes y eucariontes de muy pequeño tamaño y sin procesamiento en su estructura de DNA.

14. PRODUCCIÓN DE FÁRMACOS EN ANIMALES Evolución de moléculas Moleculas humanizadas Exito de la estabilidad genética Exito en ratones y ratas En desarrollo en otros sistemas

16. PRODUCCIÓN DE FÁRMACOS EN PLANTAS • De amplio desarrollo en EEUU. • Ventajas relacionadas a la cantidad de compuesto producido por hectárea • Plantas transgénicas resistentes a pestes y herbicidas • Fácil manipulación genética y propagación de clones. • Producción de arroz con carotenos y vitamina A • Limitado por normativas europeas • Estabilidad de los compuestos en el metabolismo vegetal • Problemas de diversidad generados del poco control en su propagación

17. Utiliza al microorganismo Agrobacterium para clonar e introducir genes foráneos en las plantas Se utiliza la técnica de mipropopagación para multiplicar a los clones que poseen el gen introducido. No hay necesidad de bioreactores

18. Fármacos recombinantes producidos por IG

19. BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA, desarrollo de fármacos, Farmacogenética Fármaco genética Productos recombinantes Alimentos transgénicos PRODUCCIÓN DESARROLLO • Mejora de la tecnologías de producción • Búsqueda de nuevas formas de producción • Obtención de productos de mayor valor agregado • Nuevas moléculas bioactivos • Modificación de las existentes Vacunas Recombinantes Antibióticos Antitumorales Ingeniería de operones Ingeniería Metabólica Animales transgénicos Vegetales transgénicos DIAGNÓSTICO MOLECULAR Genómica funcional Chips genómicos y funcionales Proteómica-Inmunología PCR de tiempo real

20. DESARROLLO BÚSQUEDA MOLECULAR BÚSQUEDA SISTEMAS VIVOS METODO TEORICO METODO EXPERIMENTAL DETECCIÓN DE LAS MOLÉCULAS ACTIVAS DESARROLLO DE MÉTODOS AUTOMATIZADOS DE PRUEBAS Variabilidad de Moleculas conocidas Bases de datos DNA, proteínas, químicos OBTENCIÓN Y SECUENCIACIÓN BIOINFORMÁTICA INGENIERÍA GENÉTICA CLONACIÓN Imágenes 3D Molecular Docking Ensamble de rutas sintéticas DNA shuffling Phage Display PRODUCCIÓN

21. Búsqueda biológicaObjetivo: encontrar sistemas biológicos con aplicaciones farmacéuticas. Escoger el sistema a trabajar Realizar pruebas de actividad biológica Purificar y aislar MOLÉCULA ORGANISMO péptido DNA Identificación Molecular Amplificar gen Purificar EDMAN N-terminal Clonar Secuenciar MALDI-TOF ESI-Q-TOF Secuenciar Búsqueda en bases de datos IDENTIFICAR

22. Enzimas y proteínas recombinantes obtenidas desde microorganismos

23. Búsqueda molecularObjetivo: encontrar o mejorar moléculas bioactivas • Manejo de material genético por IG Ensamblaje de rutas metabólicas DNA shufling Nuevas dianas moleculares Ingeniería de promotores • Bioinformática y biología computacional Bases de datos de secuencias moleculares Información físico-química de las moléculas bioactivas Visualización de estructuras en tres dimenciones (3-D) Visualización y estudio de las interacciones entre dos moléculas (Molecular Docking) Ensayos de búsqueda de nuevos fármacos. Ampliar o mejorar la efectividad Mejorar y controlar la expresión Mejorar la búsqueda y producción

24. DNA ShufflingResistencia a antibióticos Takato Yano and Hiroyuki Kagamiyama, Proc Natl Acad Sci U S A. 30:903-907. 2001.

25. BASE DE DATOS GENÓMICA BASE DE DATOS PROTEÓMICA BASE DE DATOS QUÍMICOS Biología Computacional Bioinformática DISEÑO VIRTUAL

26. VISUALIZACIÓN DE ASOCIACIONES ENTRE MOLÉCULAS Imágenes generadas en 3D para ver la interacción de dos moléculas Molécula de DNA interactuando con un activador transcripcional de un oncogen. Permite diseñar o buscar en la base de datos de compuestos químicos que actúen contra determinadas dianas moleculares

27. MOLECULAR DOCKING

28. BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA, desarrollo de fármacos, Farmacogenética Fármaco genética Productos recombinantes Alimentos transgénicos PRODUCCIÓN DESARROLLO • Mejora de la tecnologías de producción • Búsqueda de nuevas formas de producción • Obtención de productos de mayor valor agregado • Nuevas moléculas bioactivos • Modificación de las existentes Vacunas Recombinantes Antibióticos Antitumorales Ingeniería de operones Ingeniería Metabólica Animales transgénicos Vegetales transgénicos DIAGNÓSTICO MOLECULAR Genómica funcional Chips genómicos y funcionales Proteómica-Inmunología PCR de tiempo real

29. FARMACO-GENÉTICA DIAGNÓSTICO MOLECULAR CLÍNICO DNA Microarrays Real-Time PCR SEGURIDAD ALIMENTARIA TRANSGÉNICOS ALIMENTOS PATÓGENOS E INDICADORES CALIDAD Y SEGURIDAD

30. Fármaco-genetica Presencia/ausencia de un gen Mutaciones Presencia de variaciones en un gen SNPs Heterocigosis/homocigosis. Se parte de una muestra de ADN Genomicos Funcionales Niveles de transcripcion de genes. Se parte de una muestra de ARN. Respuesta interindividual de la población heterocigota del gen HMG-CoA reductasa al tratamiento con estatinas. Heterocigoto Homocigoto

31. Muestra de sangre Extracción de ARN (viral) En un solo tubo ARN ADNc Amplificación por RT-PCR-Real Time Cebadores (primers) específicos del Virus Hepatitis C LECTURA EN TIEMPO REAL DURANTE LA REACCIÓN DE AMPLIFICACIÓN Diagnóstico Clínico

32. Sistemas de Salud Empresa Industria Instituciones Sociedad I + D 3 BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA

33. INTRODUCCIÓN A LA BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA Facultad de Farmacia Universidad de Valparaíso

36. La biotecnología aumentará el número de fármacos disponibles en los próximos años [4-ago-04] - La farmacogenómica se perfila como el principal avance que aportará la biotecnología al campo de la medicina en los próximos años. No sólo permitirá ajustar la dosis terapéutica de muchos fármacos a las características genéticas del paciente, sino que ayudará a recuperar moléculas desechadas por inducir efectos adversos en determinados grupos de población. Entre todos las áreas que abarca una disciplina de aplicaciones tan amplias como la biotecnología, ha sido en salud humana donde se han producido los avances más importantes. Según ha explicado José Luis García, vicepresidente de la Sociedad Española de Biotecnología (Sebiot), que celebra estos días en Oviedo su congreso bianual, las compañías farmacéuticas han jugado un papel fundamental en este progreso, pues eran las que estaban mejor preparadas para utilizar las nuevas tecnologías de biología molecular. “El mayor avance que se ha producido en los últimos años en la medicina ha sido el proyecto genoma humano. Nos ha abierto una puerta a todo un universo del que, aunque existen ya numerosas aplicaciones para el conocimiento generado, todavía sólo somos capaces de ver las estrellas más cercanas”. I. Algunos datos históricos En sentido estricto, la Biotecnología tal como fue definida más arriba comenzó con la Revolución Neolítica, es decir, cuando la humanidad comenzó a hacer uso de la Agricultura y de la Ganadería para sus necesidades; un poco más tarde (pero no mucho más; recuérdese que la Biblia atribuye a Noé la invención del vino), el hombre comenzó a utilizar las fermentaciones para la producción de vino, cerveza, pan, queso, yogur, etc. Estas prácticas fueron mejorando sensiblemente a lo largo de la historia; pero comienzan a ser estudiadas científicamente con la Revolución Industrial. El estudio de la fermentación alcohólica (producción de vino y cerveza) nos llevó a la comprensión detallada del proceso bioquímico de transformación de azúcares en alcohol. Con ello, y con los estudios microbiológicos correspondientes, las fermentaciones pudieron comenzar a hacerse a escala industrial (y no artesanal como hasta entonces). Por otra parte, el estudio de la fermentación alcohólica permitió la caracterización y purificación detallada de las enzimas que llevan a cabo el proceso, dando origen así a la Bioquímica moderna. En los años veinte se descubren los antibióticos, sustancias producidas por determinados microorganismos para combatir a otros microorganismos (en concreto, la penilina es una sustancia producida por el hongo Penicillium notatum para destruir a las bacterias que puedan competir con él en la búsqueda de alimentos). Con la Segunda Guerra Mundial, se plantea el problema de la producción industrial de antibióticos. Esto se logra mediante procedimientos de fermentación análogos a la producción de cerveza. Hacia los años cincuenta y sesenta del siglo XX, pues, las fermentaciones son un proceso muy conocido, estudiado y aplicado, y que por las razones que veremos más adelante, pueden ya considerarse como biotecnología propiamente dicha. Al mismo tiempo, se empiezan a reconocer las múltiples aplicaciones que pueden darse a las enzimas aisladas en procesos industriales. Hacia mediados de los sesenta, ya se emplean de forma generalizada enzimas obtenidos de seres vivos como aditivos de los detergentes de lavado doméstico. Hoy día, como veremos, las enzimas se emplean en muchísimos más procesos industriales. Volvamos un poco atrás para analizar otra línea de investigación que ha llevado a la moderna biotecnología. A partir de finales del XIX se empezaron a estudiar los mecanismos de la herencia biológica. Los trabajos de Mendel llevaron a la conclusión de que las características hereditarias se transmiten a través de elementos discretos, llamados genes, que pasan de una generación a otra. Nació así la ciencia de la Genética, uno de cuyos problemas fundamentales consistía en determinar la naturaleza físicoquímica de los genes. En 1944 se demostró que los genes están formados por ácido desoxirribonucleico (DNA, ADN), una macromolécula lineal. En 1953 Watson y Crick postularon un modelo de estructura que explicaba de forma totalmente satisfactoria cómo esta molécula puede ser efectivamente la portadora de los caracteres hereditarios en los seres vivos. En la década de los sesenta se demostró la naturaleza de la información que porta dicha molécula al ser descifrado el Código Genético. En la década de los setenta, se idearon métodos para manipular el DNA y transferirlo de unos organismos a otros a voluntad, es decir, la transferencia genética no sólo entre individuos de la misma especie, sino de especies completamente distintas. El conjunto de esas técnicas es lo que ha venido en llamarse Ingeniería Genética, que forma hoy día una parte esencial de la Biotecnología. Mediante sus técnicas podemos introducir a voluntad (dentro de ciertos límites) genes determinados en organismos receptores, con lo cual las posibilidades de manipulación artificial de los seres vivos se multiplican. Es así como se puede introducir el gen de la hormona de crecimiento (STH) en una bacteria, la cual se reproduce exponencialmente al tiempo que produce dicha hormona, por ejemplo; o cómo podemos llegar a reemplazar un gen defectuoso en un individuo por un gen sano; o cómo podemos dotar a un organismo de unas capacidades bioquímicas que previamente no tenía (por ejemplo, la introducción en vegetales de los genes de fijación de nitrógeno bacterianos, de manera que no vuelven a requerir abonos nitrogenados en absoluto). La biotecnología moderna se asienta así sobre dos pilares básicos: la tecnología enzimática y la ingeniería genética. A esto podemos añadir otras técnicas, que aunque relacionadas con estas dos, forman hoy día cuerpos aparte. Por ejemplo, las técnicas de reproducción asistida (manejo de células germinales y de embriones) y clonación animal; las técnicas inmunológicas, etc.

37. Biofármacos Relación de fármacos producidos por biotecnología aprobados por la FDA ( Food and Drug Administration ) de Estados Unidos. Texto tomado de AE-Biotech Acctimmune (gamma interferon) Genentech, Inc. Approved for use in the management of chronic granulomatous disease (December, 1990). Activase (recombinant alteplase) Genentech, Inc. Approved for use in the treatment of myocardial infarction (November, 1987) and acute pulmonary embolism (June, 1990). Adagen (adenosine deaminase) Enzon, Inc. Approved for use in the treatment of infants and children with severe immunodeficiency (March, 1990). Alferon N Interferon Sciences, Inc. Approved for use in treating genital warts (October, 1989). Betaseron (recombinant interferon beta 1-B) Berlex Laboratories/Chiron Corp. Approved for use in the management of relapsing, remitting multiple sclerosis (August, 1993). Ceredase (alglucerase) Genzyme Corp. Approved for use in treating Type 1 Gaucher's disease (April, 1991). Cerezyme (imiglucerase) Genzyme Corp. Approved for use in treating Type 1 Gaucher's disease (June, 1994). Engerix-B SmithKline Beecham Approved for use as a hepatitis B vaccine (September, 1989). EPOGEN (epoetin alfa) Amgen Ltd. Approved for use in treating anemia associated with chronic renal failure and anemia in Retrovir-treated, HIV-infected patients (June, 1989). Humatrope (somatropin) Eli Lilly & Co. Approved for treating human growth hormone deficiency in children (March, 1987). Humulin (recombinant human insulin) Eli Lilly & Co. Approved for the treatment of diabetes (October, 1982). Intron A (alpha-interferon) Schering-Plough Corp. Approved for the treatment of hairy cell leukemia (June, 1986), genital warts (June, 1988), AIDS-related Kaposi's sarcoma (November, 1988), non-A, non-B hepatitis (February, 1991), and hepatitis B (July, 1992). KoGENate (antihemophiliac factor) Miles, Inc. Approved for use in the treatment of hemophilia A (February, 1993). Leukine (yeast-derived GM-CSF) Immunex Corp. Approved for use in autologous bone marrow transplantation (March, 1991). Neupogen Amgen Ltd. Approved for use in treating cheomtherapy-induced neutropenia (February, 1991) and bone marrow transplant-associated neutropenia (June, 1994). Oncaspar (pegaspargase) Enzone/Rhone-Poulenc Rorer Approved for use in treating acute lymphoblastic leukemia (February, 1994). Orthoclone OKT 3 Ortho Biotech Approved for use in reversal of acute kidney transplant rejection (June, 1986). Procrit (epoetin alfa) Ortho Biotech Approved for use in the treatment of anemia associated with chronic renal failure (December, 1990) and anemia in Retrovir-treated, HIV-infected patients and chemotherapy-associated anemia (April, 1993). Proleukin, IL-2 Chiron Corp. Approved for the treatment of kidney (renal) carcinoma (May, 1992). Protropin (somatrem) Genentech, Inc. Approved for treating human growth hormone deficiency in children (May, 1985). Pulmozyme (DNase) Genentech, Inc. Approved for use in the management of cystic fibrosis (December, 1993). Recombinate rAHF (recombinant antihemophiliac factor) Baxter Healthcare Recombinate rAHF is the recombinant version of blood clotting factor VIII, and it has been approved for the treatment of hemophilia A (December, 1992). Recombivax HB Merck & Co. Approved as a hepatitis B prevention vaccine (July, 1986). Roferon-A (recombinant alfa-interferon) Hoffman-La Roche Approved for the treatment of hairy cell leukemia (June, 1986) and AIDS-related Kaposi's sarcoma (November, 1988).

40. • FRET-Fluorescence Resonance Energy Transfer Emission FRET Hybridization Cleavage Graphics from the Second Joint Symposium on Food Safety and Nutrition kindly provided by Dr.Guy Van den Eede

41. TECNOLOGÍA del DNA RECOMBINANTE Enzima de restricción LIGAR Nº de ciclos de amplificación TRANSFORMACIÓN DE ORGANISMO AMPLIFICACIÓN POR PCR SINTEIS QUÍMICA Obtención de molécula específica en multiples copias VISUALIZACIÓN Gen con función específica Seceuncia marcadora GGTTCCCAA Diagnóstico molecular SECUENCIACIÓN Genómica funcional

42. PASOS PARA DESARROLLAR BIOTECNOLOGÍA MOLECULAR BUSCAR DETERMINAR LA FUNCIÓN BIOLÓGICA DE INTERÉS Actividad antitumoral Antagonismo contra otros organismos Enzimas de uso industrial Metabolitos de alto valor agregado

43. PASOS PARA DESARROLLAR BIOTECNOLOGÍA MOLECULAR IDFENTIFICAR EL NIVEL A TRABAJAR Proteína Enzima Organismo Gen Identificar y clonar Aislar Purificar Secuencia del gen de inetrés. Bacteria Hongo Tóxinas Producción de Antibióticos Lipasas Proteasas Expresión heteróloga Diagnóstico clínico Diagnóstico alimentario Producción de Anticuerpos Antídotos

44. PASOS PARA DESARROLLAR BIOTECNOLOGÍA MOLECULAR BUSCAR/DETERMINAR LA FUNCIÓN BIOLÓGICA IDFENTIFICAR EL NIVEL A TRABAJAR AISLAR EL NIVEL CONTROLAR LA FUNCIÓN MANIPULAR LA FUNCIÓN BIOLÓGICA TECNIFICAR SU OBTENCIÓN, CONTROL Y MANIPULACIÓN MASIFICAR SU PRODUCCIÓN

45. PASOS PARA DESARROLLAR BIOTECNOLOGÍA MOLECULAR BUSCAR/DETERMINAR LA FUNCIÓN BIOLÓGICA Determinan el ámbito de desarrollo IDFENTIFICAR EL NIVEL A TRABAJAR AISLAR EL NIVEL CONTROLAR LA FUNCIÓN MANIPULAR LA FUNCIÓN BIOLÓGICA TECNIFICAR SU OBTENCIÓN, CONTROL Y MANIPULACIÓN MASIFICAR SU PRODUCCIÓN

46. BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA

47. BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA BIOTECNOLOGÍA FARMACÉUTICA Facultad de Farmacia Universidad de Valparaiso M. Alejandro Dinamarca T.

48. PEPTIDO ARN ADN SECUENCIA PEPTÍDICA