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IL PROGETTO GENOMA UMANO (HGP). 2 metri di DNA; 46 cromosomi; 3 MILIARDI di coppie di basi (A, T, C, G); 30-40000 GENI. N° geni (bp). Homo s. 30000 (2.6x10 9 ). 2001. Drosophyla m. 13600 (1.2x10 8 ). 2000. Saccharomyces c. 6000 (1.2x10 7 ). 1996. Escherichia c. 4000
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IL PROGETTO GENOMA UMANO (HGP) • 2 metri di DNA; • 46 cromosomi; • 3 MILIARDI di coppie di basi (A, T, C, G); • 30-40000 GENI
N° geni (bp) Homo s. 30000 (2.6x109) 2001 Drosophyla m. • 13600 • (1.2x108) 2000 Saccharomyces c. • 6000 • (1.2x107) 1996 Escherichia c. • 4000 • (4.6x106) 1997 GENI E GENOMI
Cosa si intende per PROTEOMA? • Identifica TUTTE le PROTEINE espresse da un GENOMA in una cellula, un tessuto od organismo • Definisce come queste proteine si organizzano in RETI di INTERAZIONE • Descrive la STRUTTURA TRIDIMENSIONALE di queste proteine con lo scopo di poter identificare un FARMACO in grado di attivarne o disattivarne la funzione
La Proteomica nell’ era post-genomica • Identificazione delle proteine • Studio delle modificazioni post-traduzionali • Esame delle reti di interazioni proteina-proteina • Confronto differenziale tramite analisi bidimensionale • Determinazione della funzione • Medicina Molecolare
Identificazione degli spots ... C - Cellule Cristallino Control 500mM H2O2 (10 min) 7 cm, 3-10 pH, Ag Maldi - C
Stress Ossidativo come modello cellulare per lo studio della cataratta: IDENTIFICAZIONE DI PROTEINE SOGGETTE AL TRATTAMENTO Controllo 500mM H2O2 (10 min) PrxI PrxI 3 10 pH 3 10 pH
LA FUNZIONE DELLE PROTEINE NELL’ERA POSTGENOMICA CLASSICA POST GENOMICA
Identification of tumor markers from the study of Thyroid differentiation program THYROID DIFFERENTIATION TUMORAL TISSUES (Thyroid and other) Tumoral marker) THYROID CELL LINES: Normal vs transformed (different degree of differentiation PROTEIN of INTEREST MALDI-MS Identification (CNR Naples) 2-D GEL ANALYSIS Cell Mapping Proteomics NUCLEAR PROTEINS DNA-binding proteins, Co-activators, repressors, Transcriptional regulators Expression Proteomics MOLECULAR MODEL (‘in vitro’ and ‘in vivo’ assays) Intermolecular Networks (GST-Pulldown, IP) Differential global pattern analysis