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兽医临床常用 血液生化检验. 临床兽医学教研室 内科诊断课组. 一 . 血钙的测定. 方法: 乙二胺四乙酸二钠( EDTA 二钠)滴定法 原理: 血清中的钙离子在碱性溶液中与钙红指示剂结合形成可溶性的复合物,使溶液呈 淡红色 。乙二胺四乙酸二钠对钙离子的亲和力很大,能与该复合物中的钙离子络合,钙红指示剂重新变为游离状态,游离的钙红指示剂在碱性溶液中呈现 浅蓝色 。 试剂: 0.2mol/L 氢氧化钠溶液、钙红指示剂、钙标准溶液、 EDTA 二钠应用液. 操作: 取 3 个锥形瓶,按表一进行操作。
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兽医临床常用血液生化检验 临床兽医学教研室 内科诊断课组
一.血钙的测定 • 方法: 乙二胺四乙酸二钠(EDTA二钠)滴定法 • 原理: 血清中的钙离子在碱性溶液中与钙红指示剂结合形成可溶性的复合物,使溶液呈淡红色。乙二胺四乙酸二钠对钙离子的亲和力很大,能与该复合物中的钙离子络合,钙红指示剂重新变为游离状态,游离的钙红指示剂在碱性溶液中呈现浅蓝色。 • 试剂: 0.2mol/L氢氧化钠溶液、钙红指示剂、钙标准溶液、EDTA二钠应用液
操作:取3个锥形瓶,按表一进行操作。 表一、血清钙测定步骤 (单位:ml)
计算: • 注意事项: 1.操作时须先加氢氧化钠溶液,然后再加指示剂。因钙红指示剂在碱性溶液中不稳定,所以在加入指示剂后,应立即滴定。 2.钙红指示剂不稳定,应经常更新,当指示剂滴入溶液不呈显淡红色时,证明已经失效。
临诊意义 1.血清钙增高:见于原发性甲状旁腺机能亢进,维生素D中毒,骨内肿瘤转移,某些慢性器官病等。 2.血清钙降低:见于甲状旁腺机能降低,骨软症,佝偻病,产后瘫痪,草酸盐中毒等。
二.血清无机磷测定 • 方法: 磷钼酸比色法 • 原理: 无蛋白血滤液中的磷与钼酸作用,生成磷钼酸,再以氯化亚锡将磷钼酸还原呈成为蓝色的钼蓝,与同样处理的标准液比色,求得磷的含量。 • 试剂: 磷标准应用液,10%三氯醋酸溶液,钼酸试剂,氯化亚锡应用液
操作: 无蛋白血滤液:取血清0.5ml,加10%三氯醋酸4.5ml,混匀,静置10分钟,3000转/分,离心5-10分钟,分出上清液,按表2操作。(单位:ml) 表二、血清无机磷测定步骤
计算: • 注意事项: 1.采血后尽早分离血清,血清不能溶血,否则红细胞内的磷脂移入血清,被血清中的磷酸酯酶水解,将使含磷量明显升高。 2.氯化亚锡应用液不稳定,必须现用现配。
临诊意义: 1.血清无机磷增高:见于马、牛骨质疏松症,血样溶血,过量补给维生素D,肾功能不全或衰竭,甲状腺机能减退症。 2.血清无机磷降低:见于骨软症,低磷性佝偻病,肾小管变性的病变。
三.血液尿酸的测定 • 原理: 无蛋白血滤液中的尿酸在碱性溶液中被磷钨酸氧化成尿囊素及二氧化碳,磷钨酸则被还原成钨蓝,然后进行比色测定。 • 试剂: 尿酸应用标准液、14%碳酸钠溶液、磷钨酸试剂,钨酸蛋白沉淀剂
操作: 无蛋白血滤液:取磷钨酸蛋白沉淀剂4.5ml,加抗凝血0.5ml,混匀,离心沉淀,取上清液按表三进行操作。 表三:尿酸测定操作步骤 (单位:ml)
计算: • 临诊意义: 尿酸含量增高可作为痛风的诊断依据。