地中海贫血筛查方案 与遗传咨询

1. 地中海贫血筛查方案与遗传咨询 梅州市新生儿疾病筛查中心 黄烁丹

2. 两种常见遗传病发生状况 • 梅州市客家人是地中海贫血高发人群，发生率为13.6%，明显高于广东省平均发生率（10.9%）；另外，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症的发生率约4.2%，是这两种遗传病的高发区。

3. 地中海贫血 • 地中海贫血（thalassemia）是由于珠蛋白基因缺失或突变导致某种珠蛋白肽链合成障碍，造成α链和β链合成失去平衡而导致的溶血性贫血。

4. 正常血象

5. 地贫血象

7. α珠蛋白基因簇的分子结构 3’ 5’ ζ2 inter-ζHVR ψζ1 ψα2 ψα1 α2 α1 θ 3’HVR Fig.1.Schematic diagram of a portion of globin gene cluster

8. 5’ ε Gγ Aγ ψβ β δ 3’ β珠蛋白基因簇的分子结构

9. 1 31 32 99 100 141 α链 1 30 31 104 105 146 β链 （3）珠蛋白基因的结构

11. 各种血红蛋白在人体发育不同阶段的变化，是由于各种珠蛋白链的合成随着个体发育的进程有规律的演变，呈现严格的消长过程。 50 40 30 20 10 存在的多肽链（%） ζ（胚胎） α β（成人） γ（胎儿） ε（胚胎） δ - 6 -3 出生月份 3 6

12. 正常人体不同发育阶段的主要血红蛋白分子类型正常人体不同发育阶段的主要血红蛋白分子类型

13. 地中海贫血分类 • 根据合成障碍的肽链不同可把地中海贫血分为α和β地中海贫血两类； • 根据临床表征，α地贫分为重型、血红蛋白H病、轻型和静止型，β地贫分为重型、中间型、轻型和遗传性胎儿血红蛋白持存症（HPFH）四种。

14. ζ2 interζHVR ψζ1 ψα2 ψα1 α2 α1 θ 3’HVR --SEA -α4.2 -α3.7 • α地贫缺失型

15. α地贫的临床类型及基因型 • (1) HbBart's胎儿水肿综合征(HbBart's hydrops fetalis syndrome) • （2）血红蛋白H病（HbH病） • （3）轻型（标准型）α地贫 • （4）静止型α地贫

16. HbBart‘s胎儿水肿综合征 由于α基因全部缺失→α链缺乏→γ链相对过多→形成γ四聚体(HbBart‘s) →氧亲和力升高→胎儿28-30周全身水肿,严重缺氧,多在宫内死亡或产下即死. 脐血电泳: HbBart's 60-80%和少量HbPortland.

17. 重型α地贫儿

19. 遗传咨询 • HbBart‘s水肿胎儿的基因型:--/-- • HbBart‘s水肿胎儿的父母的基因型： • －－／αα（即α0地贫的杂合子） • 再发风险：１／４为HbBart‘s水肿胎儿 • 　　　　　 １／４为正常人 • 　　　　　 １／２为α0地贫的杂合子 • 注:下一胎须产前诊断

20. 配子类型 －－ αα －－ －－/－－αα /－－ αα－－/αααα /αα

22. （2）血红蛋白H病（HbH病） 缺失3个α基因→α链↓↓↓→β链相对↑→形成β四聚体（HbH），β4不稳定，易氧化变性形成H包涵体→RBC变形性↓→溶血。 临床表现：中度或较严重贫血，脐血Hb电泳Bart's＞HbH，6个月后HbBart's消失，HbH↑。

23. 血红蛋白H病儿童

24. 遗传咨询 • 血红蛋白H病患者的基因型为： • －－/－α 或者－－/ αT α • 　血红蛋白H病患者父母的基因型为： • （－－／αα）与　（α－／αα） • 或 （－－／αα）与 （α αT／αα)

25. 假如父母的基因型为（－－／αα）与 （α αT／αα) 配子类型 －－ αα ααT－－/ ααTααT/ αα αα－－/αααα/ αα

26. 遗传咨询 • 再发风险: 血红蛋白H病: ¼ 轻型: ¼ 静止型: ¼ 正常: ¼ 下胎须产前诊断

27. （3）轻型（标准型）α地贫 基因型为： α0地贫杂合子（－－／αα）或α＋地贫纯合子（α－／α－） 新生儿期或有轻度贫血，脐血HbBart‘s 5-10%。 轻型患者之间婚配的再发风险

28. 遗传咨询 • 轻型与正常人婚配,其下一代风险估计: 轻型: ½ 正常: ½ 无须产前诊断

29. （4）静止型α地贫 • 　　仅缺失一个基因，为α＋地贫杂合子（ α-／αα） • 或非缺失型α地贫杂合子（ααT／αα） • 无症状，脐血HbBart's 5%以下 • 　静止型与轻型患者之间婚配： • 可有１／４机会生育子女 HbH病患儿

30. β地中海贫血的临床分型 （1）重型β地中海贫血 （2）轻型β地中海贫血 （3）中间型β地中海贫血 （4）遗传性胎儿血红蛋白持续增多症

31. 完全不能合成β链者,称为β0地贫 能部分合成β链者(约为正常的5%-30%),称β+ 地贫 （1） 重型β地中海贫血 基因型：（β0/β0） （β+/β+） （δβ0/δβ0） （β0/β+）

32. 临床表现：进行性溶血性贫血，肝脾肿大， 特殊面容。由于β链缺乏 或↓↓→过多的α链变性沉积→RBC变形性，通透性改变→溶血性贫血→组织缺氧→促红细胞生成素↑→造血增强、骨髓增生→骨畸形、骨髓外造血→肝脾肿大。

33. 重型β地贫儿

38. （2）轻型β地中海贫血 • （β0/βA）（β+/βA）（δβ0/βA） • （3）中间型β地中海贫血 • 患者通常是某些β地贫的纯合子或两种不同变异型的双重杂合子

39. （4） 遗传性胎儿血红蛋白持续增多症 （ HPFH） • 由于β基因簇中某些DNA片段的缺失或者点突变，使δ和β链的合成受到抑制，而γ链的合成明显增加，使成人HbF含量持续增多。特点是：HbF在成人仍持续较高水平，无明显的临床症状。

40. 遗传咨询

41. 遗传咨询 • 要点: 产前诊断，防止重型儿出生 再发风险的估计 预防新生儿溶血性黄疸 儿童贫血的监控

42. 梅州地中海贫血研究背景 .梅州市妇幼保健院1998年建立遗传实验室（梅州首家） 开展项目:地贫筛查一套、G-6PD缺乏症 筛查及确诊实验 .2000年开展地贫基因诊断（目前梅州唯一开展地贫基因诊断的实验室）

43. 技术方法 • 地贫筛查一套：脆性一管法、抗碱血红蛋白、血红蛋白A2定量、血红蛋白电泳 • 方法比较：MCV结合HB电泳 三联法 • 推荐方法：脆性一管法结合MCV

44. 梅州地区地中海贫血检查结果 例（%）

45. 地贫基因诊断：α地贫：东南亚缺失型，含α地贫1、 α地贫2（杂合子、纯合子） β 地贫：中国人已发现的十九种点 突变，包括广东省常见五 个突变位点和其它十四个点突变类型

47. 分子流行病学 • ――SEA/――SEA）占0.4%，α地贫1杂合子（基因型：――SEA/αα）占89.9%，血红蛋白H病（基因型：――SEA/―α3.7占2.1%，――SEA/―α4.2占1.3%）共3.4%，α地贫2纯合子（基因型：―α4.2/―α4.2）占2.1%，α地贫2杂合子（基因型：αα/―α4.2占0.8%，αα/―α3.7占3.4%）共4.2%，以上基因缺失类型构成了α地贫的临床上各种表型的地中海贫血症状。

49. β地贫以β珠蛋白基因点突变为主，在当地已检测的264例中发现六种点突变类型，各基因频率如下：插入序列（IVS）-Ⅱ-654（C→T）突变（34.14%）、(CD)41-42（-TTCT）移码突变（29.26%）、TATA box nt -28（A→G）转录突变（12.2%）、CD17（A→T）无义突变（17.1%）、CD26（G→A, βE）加工突变（4.9%）、CD71-72(2.4%)

50. 可见前四位的IVS-Ⅱ-654、CD41-42、 -28、 CD17已占92.7%，有明显的特异性；其中发现了5例重型β地贫，分别是41/42纯合子2例，654纯合子2例，654/-28双重杂合子1例。