140 likes | 862 Views
CHROMATOGRAFIA CIENKOWARSTWOWA. Kolejne slajdy przedstawiają poprawny sposób postępowania podczas analizy próbki związku organicznego przy zastosowaniu techniki chromatografii cienkowarstwowej (TLC). TLC. Krok 1. Przygotowanie: roztworu analizowanej substancji oraz roztworów wzorcowych,
E N D
CHROMATOGRAFIA CIENKOWARSTWOWA Kolejne slajdy przedstawiają poprawny sposób postępowania podczas analizy próbki związku organicznego przy zastosowaniu techniki chromatografii cienkowarstwowej (TLC). A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej
TLC Krok 1 • Przygotowanie: • roztworu analizowanej substancji oraz roztworów wzorcowych, • płytki chromatograficznej o odpowiednich rozmiarach, • komory chromatograficznej wyłożonej bibułą z właściwym eluentem, • lampy UV (w przypadku analizy substancji bezbarwnych) A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej
TLC Krok 2 Zaznaczenie ołówkiem linii startu oraz punktów, w których będzie nanoszony roztwór analizowany (X) oraz roztwory wzorcowe (A i B) A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej
TLC Krok 3 Nanoszenie na zaznaczone uprzednio na płytce miejsca analizowanych roztworów przy użyciu wąskiej kapilary. UWAGA: Każdy roztwór musi być nanoszony inną, czystą kapilarą! A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej
TLC Krok 4 Umieszczenie przygotowanej płytki w komorze chromatograficznej: poziom eluenta UWAGI: • Eluent w komorze nie może sięgać do dolnej krawędzi plamek! • Raz wstawionej płytki nie wolno już poprawiać! • Płytka powinna stać prawie pionowo, lecz jej boczne krawędzie nie mogą dotykać ani bibuły, ani ścianek naczynia! A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej
TLC Krok 5 Rozwijanie chromatogramu do czasu, aż czoło rozpuszczalnika znajdzie się w odległości 3 – 5 mm od górnej krawędzi płytki. UWAGA: Podczas rozwijania chromatogramu komory nie wolno poruszać! A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej
TLC Krok 6 Wyjęcie płytki z komory, zaznaczenie miejsca, do którego doszło czoło rozpuszczalnika (tzw. linii mety) i wysuszenie płytki. Obliczanie Rf dla plamki wzorcu A: Rf (A) = a / d Rf (A) = 38,5 mm / 51,0 mm Rf (A) = ok. 0,75 Krok 7 Obejrzenie płytki w świetle UV, zaznaczenie wszystkich plamek, obliczenie dla nich współczynnika Rf i interpretacja chromatogramu. A. Czarny, B. Kawałek, A. Kolasa, P. Milart, B. Rys, J. Wilamowski - Ćwiczenia laboratoryjne z chemii organicznej