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Extracción de ADN

Extracción de ADN. Jeanine Vélez Gavilán Biol 3051L. Objetivos. Extraer el material genético (ADN) de células de guineo y/o fresas. Establecer la relaci ó n entre el proceso de extracci ó n y propiedades qu ί mico-f ί sicas del ADN. Solución amortiguadora o “buffer”.

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Extracción de ADN

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Presentation Transcript

  1. Extracción de ADN Jeanine Vélez Gavilán Biol 3051L

  2. Objetivos • Extraer el material genético (ADN) de células de guineo y/o fresas. • Establecer la relación entre el proceso de extracción y propiedades quίmico-fίsicas del ADN

  3. Solución amortiguadora o “buffer” • 6 mL de detergente líquido de fregar • 5 g de sal de mesa • 44 mL de agua destilada • Una pizca de ablandador de carne

  4. Preparación de la solución • Mida 6 mL del detergente en una probeta de 10 mL. Vierta en un beaker de 100 mL. • Mida 44 mL de agua destilada. Vierta en el “beaker” de 100 mL que ya contiene el detergente. Evite la formación de burbujas. • Finalmente, aňada 5g de sal de mesa y el ablandador de carne. Mezcle bien.

  5. Procedimiento • Remueva la cáscara de un pedazo de guineo de una pulgada. • Eche el guineo en una bolsa plástica con cierre de seguridad. Cierre la bolsa. • Macere el guineo (puede ser con la mano) hasta obtener una consistencia bien blanda.

  6. Continuación: Procedimiento • Añada los 50 mL de la solución amortiguadora. Cierre bien. Evite la formación de burbujas.¿Por qué? • Con cuidado, coloque la bolsa en posición horizontal sobre papel toalla. Asegúrese que el macerado de guineo esté cubierto con la solución amortiguadora. Espere 5 minutos. ¿Por qué el macerado debe estar cubierto por la solución amortiguadora? ¿Por qué debe esperarse 5 minutos?

  7. Continuación: Procedimiento • Mientras esperan que transcurran los cinco minutos, presenten posibles contestaciones a las siguientes preguntas: ¿Cuál es la función del detergente? ¿Cuál es la función de la sal? ¿Cuál es la función del ablandador de carne?

  8. Continuación: Procedimiento • Coloque el paño sobre el vaso plástico y filtre el macerado de guineo. Luego, descarte el paño con el macerado.¿Por qué hay que filtrar? • Utilice la regla para marcar dos tubos de ensayo a una distancia de 1” y de 2” desde abajo hacia arriba. • Aňada a cada tubo de ensayo un volumen del filtrado hasta que llegue a la marca de 1”.

  9. Continuación: Procedimiento • Añada al tubo de ensayo un volumen de alcohol etílico 70%-90% frío hasta llegar a la marca de 2”. • Sin mezclar, coloque el tubo de ensayo en una gradilla o en un vaso plástico. Espere por 5 minutos.

  10. Continuación: Procedimiento • Inserte en el tubo de ensayo una varilla de cristal o removedor de café para remover el ADN de la capa superior del alcohol. Coloque el ADN en otro tubo de ensayo.

  11. Preguntas de análisis y discusión • ¿Cuál, piensas tú, es la función del detergente en la solución amortiguadora?

  12. Cuando el detergente entra en contacto con la célula, captura los lípidos y las proteínas.

  13. ¿Cuál es la función de la sal en la solución amortiguadora?

  14. ¿Cuál es la función del alcohol etílico?

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