380 likes | 895 Views
ENSÜÜMID. Kaie Pappel, PhD 2013. Ensüümid ehk fermendid ensüümid on biokeemiliste reaktsioonide kiirendajad ehk katalüsaatorid, suunavad ja reguleerivad tuhandeid reaktsioone . valdav osa on koostiselt valgud ENSÜÜMID = VALKKATALÜSAATORID
E N D
ENSÜÜMID Kaie Pappel, PhD 2013
Ensüümid ehk fermendid • ensüümid on biokeemiliste reaktsioonide kiirendajad ehk katalüsaatorid, • suunavad ja reguleerivad tuhandeid reaktsioone. • valdav osa on koostiselt valgud • ENSÜÜMID = VALKKATALÜSAATORID • iseloomustab suur aktiivsus ja spetsiifilisus • Ensüümid kiirendavad reaktsioone 103 kuni 1017korda • väga spetsiifilised reaktantide ehk substraatidesuhtes; • paljude toime on stereospetsiifiline
Ensüümreaktsiooni põhiskeem: E + S ↔ ES ↔ P + E ensüüm substraat ensüüm- produkt ensüüm substraat kompleks Substraat– aine, mille muundumidt ensüüm katalüüsib Produkt – tekib substraadist ensüümi toimel • Aktiivtsenter - ensüümi molekuli piirkond, mis otseselt • osaleb katalüütilises protsessis. • Aktiivtsentri mõjutamine muudab ensüümi aktiivsust • s.o ensüümireaktsiooni kiirust.
substraatseostubensüümiaktiivtsentrissemittekovalentseteehknõrkadesidemeteabilsubstraatseostubensüümiaktiivtsentrissemittekovalentseteehknõrkadesidemeteabil • (van der Waalsijõud,ioonsedinteraktsioonid, vesinik-sidemedjahüdrofoobsus) • reeglinamoodustubsubstraadijaensüümivahelpaljunõrkusidemeid • aktiivtsenterjasubstraatonvastastikkusobivad, nendeaatomidjafunktsionaalrühmadonruumiliseltpaigutatud nii, ettekiksvõimalikultpaljusidemeid
Ensüümide toime spetsiifilisus : • iga ensüüm toimib ainult teatud substraadile või substraatidele • iga ensüüm katalüüsib ainult ühe reaktsioonitüübi toimumist • tekkivad produkt(id) sõltuvad ensüümist Paljud ensüümid vajavad funktsioneerimiseks lisaks valgule veel mittevalgulist komponenti, • kofaktorit ( nt metalli aatomid, nagu Zn2+, Mg2+, Cu2+ jt) • või koensüümi (nt orgaanilised molekulid, nagu NAD, FAD jt).
Ensümaatilise reaktsiooni kiirus : • sõltubsubstraadi ja ensüümi kontsentratsioonist • keskonna pH-st, temperatuurist, efektorite • juuresolekust • Efektorid • aktivaatorid inhibiitorid • konkureerivad mittekonkureerivad • Inhibiitor on aine, mis seostub ensüümiga ja mõjutab • selle aktiivsust (vähendab reaktsiooni kiirust)
Inhibiitorid PöördumatudPöörduvad E-H+R-X → E-R+HX E + I EI konkurentsedmittekonkurentsed kus E-H –aktiivne ensüüm, R-X –pöördumatu inhibiitor, E-R –inaktiivne ensüüm, I - inhibiitor
Reaktsiooni kiirus
Reaktsiooni kiirus
Ensüümide nimetused ja klassifikatsioon tulenevad nende poolt katalüüsitavatest reaktsioonidest. Triviaalsed nimetused: nt amülaas, tsellulaas (substraadi nimetus + sufiks –aas), trüpsiin, pepsiin (vähem informatiivsed). Süstemaatilised nimetused: iseloomustavad lisaks substraadi(tide)le ka katalüüsitavat reaktsiooni, nt β,D-fruktofuranosidaas (invertaas), Ensüümid jaotatud kuude klassi. Nt klass 1 – oksüdoreduktaasid (nt glükoosi-oksüdaas) klass 3 - hüdrolaasid ( nt amülaas, laktaas ) klass 5 – isomeraasid ( nt glükoisomeraas)
Ensüümide saamine • taimed loomad mikroobid geeni- • tehnoloogia • nt pepsiin nt laapensüüm nt pektinaasid • papaiast vasika hallitus- • libemagudest seentest
ENSÜÜMIDE KASUTAMINE • Tehnoloogilised protsessid • produktide saamiseks • lisandi kõrvaldamiseks • Ensüümanalüüs • Meditsiin
Põhilised kasutusalad: • Toiduanetööstuses • Toodete kvaliteedi parandamiseks • Füüsikaliste omaduste mõjutamiseks • Lõhna intensiivistamiseks • Valkude funktsionaalsete omaduste modifitseerimiseks • Analüütika • Toiduainetööstus • Meditsiin • Kliiniline diagnostika, teraapia, uurimistöö • Kerge-, peenkeemia- jt. tööstusharud
Jahu kvaliteedi parandamine; leivaküpsetamine Mahlatootmine Juustu tootmine Hapupiima- tooted ENSÜÜMIDEKASUTAMINE Pesupulbrid Keemia- ja farmaatsiatooted Õlle valmistamine Veini valmistamine
ENSÜÜMIDE KASUTAMINE TOIDUAINETÖÖSTUSES • α-amülaas glükoamülaas • tärklis dekstriinid glükoos • Alates 1966. Jaapanis protsess naturaalsete • ensüümidega, 1979. – kinnisensüümidega • Käärimistööstus (õlu, piiritus) • Tärklise suhkrustamine meskimisel • Pagaritööstus • Tärklise suhkrustamine taigna käärimise • intensiivistamiseks • Siirupitööstus • Tärklise ja glükoossiirupi tootmine • Glükoosi tootmine • Tärklise kõrvaldamine mahladest α-, β-, glükoamülaas (α(1,4)-glükosidaasid)
invertaas • sahharoos glükoos + fruktoos • Invertsiirupi /inventsuhkru tootmine • Kunstmee tootmine • Vedeldatud täidisega maiustuste tootmine Invertaas (β-fruktofuranosidaas) Glükoosi isomeraas • glükoosi isomeraas • glükoos fruktoos • Invertsuhkru (kunstmee) tootmine. • kinnisensüümide abil alates 1974. a.
laktaas • laktoos glükoos + galaktoos • Piimatööstus • Vähendatud laktoosisisaldusega / laktoosivabad • piimatooted laktoositalumatusega tarbijaile. • Piimavalkude külmumiskindluse parandamine. • Jäätisetööstus • Jäätise teralise konsistentsi (liivasuse) vältimine. • Juustutööstus • Juustu valmimisaja lühendamine Laktaas (β-galaktosidaas)
Glükoosi või hapniku kõrvaldamine toodetest oksüdeerumise ja tumenemise vältimiseks GO Glükoos + O2 δ, D-glükonolaktoon + H2O2 FAD • Õlu • Vein • Juust • Piimapulber • Munapulber • Puuviljamahlad jt. Glükoosi oksüdaas (GO)
Toiduainete funktsionaalsuse • mõjutamine valkude osalise • hüdrolüüsi teel • Juustutööstus • Kümosiin ja/või selle mikroobsed analoogid – piima • kalgendamiseks. • Juuretise proteaasid – valmimisprotsessi kulgemiseks. • Leivatööstus • Taigna omaduste parandamiseks • Varia • Valkude emulgeerimisomaduste modifitseerimine. • Vahutekitamisvõime ja –püsimise mõjutamine. • Toodete toiteväärtuse parandamine. • Liha pehmendamine. Proteaasid
Toodete omaduste mõjutamine • pektiinainete hüdrolüüsi teel. • (pektinaasid: pektiini metüülesteraas, • polümetüülgalakturonaas,pektiinlüaas) • Mahlatööstus • Mahla väljatuleku suurendamine. • Mahla selitamine. • Varia • Oliividest õli ekstraktsiooni hõlbustamine. • Puuvilja pehmendamine. • Veini selitamine. • Kohviubade väliskesta hüdrolüüs. Pektinaasid
Toote lõhna parandamine rasvade • hüdrolüüsil vabanevate rasvhapete, mono- ja diglütseriididetoimel • Võile iseloomuliku lõhna teke • Piimašokolaadi ja šokolaadijäätise lõhna tugevndamine • Teatud juustude (Blue, Romano jm ) lõhnabuketi kujundamine • Munavalgepulbri vahustamisomaduste parendamine Lipaas
TOITAINETE SEEDIMINE ENSÜÜMIDE TOIMEL MAGU OLIGO- ja DIPEPTIIDID
SÜSIVESIKUD: TÄRKLIS GLÜKOOS
maltaas ehk Β - amülaas glükoamülaas α-1,6 glükosidaas α-amülaas α-amülaas glükoamülaas Tärklise hüdrolüüs ensüümide toimel
Pankrease ja peensoole nõre
Toidulipiididest 90...95 % on triglütseriidid ehk neutraalrasvad, 5...10 % on fosfolipiidid, kolesterool, vitamiinid A, D, E, K jm