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第三章 核酸化学. 第一节 概 述 一 . 核酸的发现 二 . 核酸的种类和分布 脱氧核糖核酸 DNA 细胞核的染色体中(真核) 类核结构中(原核) 核糖核酸 RNA 细胞质中 三 . 核酸的主要功能 DNA 是遗传信息的载体 RNA 在蛋白质的合成中起重要作用. 第二节 核酸的组成. 碱 基. 戊 糖. 脱氧核糖 核糖. 核 苷.
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第三章 核酸化学 • 第一节 概 述 • 一.核酸的发现 • 二.核酸的种类和分布 • 脱氧核糖核酸 DNA 细胞核的染色体中(真核) • 类核结构中(原核) • 核糖核酸 RNA 细胞质中 • 三.核酸的主要功能 • DNA是遗传信息的载体 • RNA 在蛋白质的合成中起重要作用
戊 糖 脱氧核糖 核糖
第三节 DNA及其结构 • 一.概述 • 1.DNA的形状 • 2.DNA的碱基组成特点——Chargaff定律 • (1)碱基当量定律:嘌呤碱总量=嘧啶碱总量,即A+G=T+C • (2)不对称比率A+T/G+C因物种(亲缘关系远近)而异
二.DNA的结构 • 1. DNA的一级结构 • DNA的一级结构是由数量极其庞大的四种脱氧核糖核酸(dAMP、dGMP、dCMP、dTMP)按一定顺序,通过3´,5´磷酸二酯键连成的直线形或环形分子。 • 脱氧核苷酸的排列顺序 ——核酸中的可变成分(碱基)的排列顺序 • 一级结构的表示方法 • ——线条式/字母式/结构式
2.DNA的二级结构 • (1)二级结构的含义 • (2)DNA碱基组成的特点—Chargaff定律 • 碱基当量定律 A+G=T+C • 不对称比率 A+T/G+C • (3)二级结构的典型结构 • —B-DNA(Watson & Crick模型,1953年)
(5) DNA的其它螺旋结构 回文结构 镜像重复 三股螺旋(H-DNA)
回文结构—DNA序列中以某一中心区域为对称轴,其两侧的碱基对顺序正读和反读都相同的双螺旋结构。即对称轴一侧的片段旋转180°后,与另一侧片段对称重复。 回文结构能形成十字结构和发夹结构
*镜像重复 存在于同一股上的某些DNA区段的反向重复序列。此序列各单股中没有互补序列,不能形成十字型或发夹结构。 AATTCAAGGGAGAAGTATAGAAGAGGGAAGGATC TTAAGTTCCCTCT TCATATCT TCTCCCTTCCTAG
多聚嘧啶和多聚嘌呤组成的DNA螺旋区段,其序列中有较长的镜像重复时,形成局部三股配对,并互相盘绕的三股螺旋,其中两股的碱基按Watson-Crick方式配对,第三股多聚嘧啶(镜像重复)通过TAT和CGC+配对,而处于双螺旋的大沟中。多聚嘧啶和多聚嘌呤组成的DNA螺旋区段,其序列中有较长的镜像重复时,形成局部三股配对,并互相盘绕的三股螺旋,其中两股的碱基按Watson-Crick方式配对,第三股多聚嘧啶(镜像重复)通过TAT和CGC+配对,而处于双螺旋的大沟中。 *DNA三股螺旋(H-DNA,ts-DNA)
3.DNA的三级结构 双螺旋进一步扭曲形成的超螺旋。是一种比双螺旋更高层次的空间构象。包括:线状DNA形成的纽结、超螺旋和多重螺旋、环状DNA形成的结、超螺旋和连环等
第四节 RNA的结构 一.RNA的结构 RNA的一级结构是由数量极其庞大的四种核糖核酸(AMP、GMP、CMP、UMP)按一定顺序,通过3´,5´磷酸二酯键连成的线形分子,其表示方法与DNA相同。 RNA的二级结构是短的,不完全螺旋的多核苷酸链。 RNA的三级结构是在茎环结构基础上进一步扭曲折叠而成的复杂结构。
(一)tRNA的结构 • tRNA的一级结构 • 由74~93个(多为76个)核苷酸组成单链 ; • 具有不变的(恒定的)核苷酸:U8 、G18 、 G19 ; • 含较多的修饰核苷酸; • 5ˊ端多为PG , 3ˊ端多为CCAOH 。 • 2.tRNA的二级结构——三叶草结构 • 具有四臂四环, • 3ˊ端为CCAOH 序列 , 5ˊ端为PG • 3. tRNA的三级结构——倒L形结构
(三)rRNA的结构 rRNA是核糖体的组成成分,其种类和大小用S表示。 30S 16S 原核生物 70S 23S 50S 5S 40S 18S 真核生物 80S 28S 60S 5.8S 5S
第五节 核酸的理化性质 一.一般理化性质 1.晶形 DNA为白色纤维状固体;RNA为白色粉末状固体 2.溶解性 均溶于水;不溶于一般有机溶剂,在70%乙醇中 形成沉淀; 在0.14MNacl 和 1~2MNacl中 DNA-蛋白 溶解度低 溶解度高 RNA-蛋白 溶解度高 溶解度低 3.粘度 DNA粘度很大RNA粘度小得多 4.旋光性 均很强 5密度及沉降性 密度:RNA>双链DNA;环状DNA >开环、线状DNA
5密度及沉降t特性 密度: RNA>双链DNA; 环状DNA >开环、线状DNA 单链DNA >双链DNA 沉降速度: RNA >环状DNA >开环、线状DNA
二.核酸的紫外吸收 纯DNA OD260/OD280=1.8 纯RNA OD260/OD280=2.0 三.核酸的两性解离 四.核酸的变性、复性 及分子杂交
五.核酸的酸解和碱解 RNA
六.核酸的颜色反应 1.钼蓝反应(核酸中磷酸的反应) Pi + (NH4)3MoO4 + Vc 钼蓝(蓝色) 2.苔黑酚反应(RNA中核糖的反应) RNA + 浓Hcl +苔黑酚 蓝绿色 3.二苯胺反应 DNA + 二苯胺+ 浓H2SO4 蓝色物 100℃、Fecl3 少量冰醋酸
第六节 核酸蛋白质复合体 一.病毒(核酸在内,蛋白质在外) 二.染色体(核酸在外,蛋白质在内) 三.核糖体(60%的rRNA,40%的蛋白质)