Inseminace hospodářských zvířat

1. BIOTECHNOLOGIE V REPRODUKCI HZ Hana Potočková Inseminace hospodářských zvířat

2. vyšší náchylnost ke specifickým nemocem snížení genetické variability vyšší cena etické otázky Význam biotechnologií • vyšší využití nejlepších plemenic a plemeníků • možnost využití po porážce • vyšší efektivita prevence chorob • vyšší ekonomika chovu

3. Biotechnologie používané v chovu • IVF • Sexace a separace embryí • ET, OPU, IVP • Klonování a štěpení embryí • Kryokonzervace embryí • jiné (transgenní organismy, chiméry...)

4. IVF • oplození „ve zkumavce“ • předchází hormonální terapie - superovulace • odběr zralých vajíček - stadium meioze I • uchování v živném mediu, 37°C, 100% RVV, 5% CO2 • narušení Z.p.: kyseliny, enzymy, propíchnutí mikropipetou • spermie, sekundární spermatocyt, promární spermatocyt, samčí somatická buňka

5. Sexace a separace embryí • PCR • odběr buňky z embrya, namnožení DNA • násl. detekce Y chromozomu • separace dle magnetických částic nesoucích monoklonální protilátku • umožní vyšší odchov požadovaného pohlaví

6. Embryotransfer • umožní vysoké využití nejkvalitnějších zvířat • výběr dárkyně - geneticky cenná plemenice, gen. rezerva.. • superovulace - FSH, LH • inseminace - 6-12h po začátku projevů říje • získání embryí - chirurgicky / nechirurgicky, 7. den po inseminaci • výběr příjemkyň - zdravé, v kondici, ne prvorodičky / staré • příprava příjemkyň - synchronizace, 2x luteolytika • přenos embryí - 7. den - stejné podmínky • kryokonzervace - dlouhodobé uchování

7. IVP, OPU • IVP - in vitro produkce embryí • z oocytů uhynulých plemenic • OPU - transvaginální aspirace oocytů z folikulů živých dárkyň • možnost využití březích plemenic (Bo v 2.-4. měsíci gravidity • lze získat až 3x více přenosuschopných embryí než z ET

8. Klonování a štěpení embryí • klon - genet. informace identická s rodičovským organismem • lze použít: • nezralé kmenové buňky • dozrálé krevní buňky • zralé bílé krvinky • somatické buňky • bisekce - přirozeně - jednovaječná dvojčata • uměle - odstranění jádra z poškozeného oocytu, přenos poloviny buněk ze zdravého embrya

9. Kryokonzervace embryí • dlouhodobé uchování, pro potřeby ET • časná stadia, uchování v tekutém dusíki • kryoprotektiva - glycerol, ethylenglykol, propandiol, diethylsulfoxid • vitrifikace - odvodnění kontaktem s vysoce koncentrovaným roztokem • kryoprotektiva v přírodě - některé ryby, žáby..

10. Další technologie • Transplantace jádra / cytoplazmy • při poškození cytoplazmy, u HZ se nevyužívá • Transgenní organismy - aplikace DNA přímo do ranného embrya • jen 1% injektovaných organizmů bude produkovat transgenní potomstvo • Chiméry - laboratorní účely • spojení dvou ranných embryí • „tetraparentální“ organismus • jen někdy jsou životaschopné • samovolně vzniklé chiméry zaznamenány i u člověka

11. DĚKUJI VÁM ZA POZORNOST Použitá literatura: • Linhartová, E., 2008: Hospodářská zvířata v lidské péči - Skot. Olomoucký biozpravodaj 3/2008 • Lopatářová, M. et al., 2006: Určení pohlaví raných embryí skotu v podmínkách praxe. Vetrinářství 2006:56, str. 696-699 • Machatková, M., 2006: Vývojové trendy v produkci geneticky cenných embryí skotu superovulací a metodou in vitro. Veterinářství 2006:56, str. 299-301 • Petelíková, J., 2008: Přenos embryí skotu v České Republice v roce 2007; výroční zpráva. Českomoravská společnost chovatelů, a.s., 2008 • Petr, J., 2003: Klonování - hrozba, nebo naděje? Paseka, 2003 • Petr, J., 2007: Terapeutické klonování úspěšné u makaka. Nature, BBC • Řezáčová, J., 2005: Asistovaná reprodukce v léčbě neplodnosti. Moderní babictví, 8, str. 1-5 Internetové zdroje: • http://www.agroweb.cz/BIOTECHNICKE-METODY-V-CHOVU-SKOTU__s45x8531.html • http://www.agroweb.cz/BIOTECHNICKE-METODY-V--REPRODUKCI-OVCI-A-KOZ__s45x8329.html • http://akademon.cz/article.asp?source=klem • http://www.bovet.cz • http://www.lekari-online.cz/lecba-neplodnosti/zakroky/mimotelni-oplodneni-ivf • http://www.osel.cz/index.php?clanek=5312