病理诊断技术研究新进展研讨班学习汇报

1. 病理诊断技术研究新进展研讨班学习汇报 顾 挺

4. 常规HE染色 • 冰冻切片 • 骨组织 • 淋巴结

5. 一 常规HE染色（1） 丁伟 浙大医学院一院 • 固定液：12％福尔马林 挥发和吸收水分→浓度降低 • 水洗：10－20分钟 →染色好，利于抗原保存

6. 一 常规HE染色（2） • 脱水：第一道75－80％酒精→穿透力强利于脱水，高浓度酒精使组织表面形成硬壳 • 浸蜡：第一道用硬脂酸石蜡1：3混合浸蜡→优点：适合韧和硬组织，染色鲜明 缺点：掉片和组织散开

7. 一 常规HE染色（3） 王德田 北京协和医院 • 直接高浓度酒精脱水→周围组织急剧收缩，中心渗透差 解救办法：切片脱蜡入水后用丙酮液浸5分钟再染 • 每一道无水酒精时间不宜超过1.5小时

8. 二 冰冻切片 （1） 杨京平 北大医学部病理科 • 甲状腺组织冰冻切片:80%酒精固定后不必水洗，直接行HE染色，可避免胶质流失。 • 脂肪组织的冰冻切片: 1.在冷冻前用吸水纸轻轻按压脂肪，将过多脂质去除，可以降低切片难度。 2.切片后固定时间稍长→不容易脱片

9. 二 冰冻切片 （2） • 较硬组织:如子宫 、宫颈、乳腺纤维腺瘤等 • 解决方法:取材时将组织切取成方形，切片时将组织上下对角放置

10. 二 冰冻切片 （3） • 冰冻切片出现冰晶: 无冰晶 有冰晶

11. 二 冰冻切片 （4） • 解决方法: 1. 取材后用吸水纸吸干水分 2. 液氮速冻后放在半凝状态的包埋剂中 3.液氮--异戊烷速冻后切片

12. 三 骨组织 （1） 赵洁 青岛大学医学院 超声波在骨组织脱钙中的应用 • 4%甲醛-硝酸液(4%甲醛10毫升+硝酸90毫升) 方法:组织入4%甲醛中,在超声波下作用1-2小时,再入4%甲醛-硝酸液脱钙

13. 三 骨组织 （2） 优点:1. 切片完整不破碎,胞浆对比鲜明 2. 时间缩短至1-6小时 缺点:1. 只适用于组织较大,骨密度较高的 2. 及时观察脱钙情况,防脱钙过度

14. 三 骨组织 （3） • AFF-硝酸液:95%酒精85ml+甲醛 10ml+冰醋酸5ml+硝酸10ml 方法: 骨组织入AFF液超声波下作用 0.5-1小时,再用AFF-硝酸液脱钙 优点: 同4%甲醛-硝酸液 缺点: 只适用小组织,骨密度较低的

15. 三 骨组织 （4） 胡治平 交大六院病理科 • 取材:取3-5mm厚的骨肿瘤组织,流水冲和 刷去骨屑 • 脱钙:高浓度脱钙液(盐酸8ml+甲酸5ml+ 蒸馏水100ml) 低浓度脱钙液(盐酸5ml+甲酸 8ml+75%酒精50ml+蒸馏水50ml)

16. 三 骨组织 （5） • 脱钙时间:松质骨（<3mm厚度）或刮出 的破碎骨组织 6-10小时 皮质骨（<3mm厚度）8-24小时 • 脱钙后处理:流水冲2-3小时,再75％酒精 浸泡1-2小时→改善HE染色偏红，碱 性染料着色

17. 三 骨组织 （6） 快速脱钙方法 • 超声振荡30分钟或微波1-3分钟 • 提高脱钙液的酸度 盐酸 10ml 甲酸 20ml 蒸馏水 100ml • 提高脱钙液的温度40℃-60℃,时间2-4小时

19. 三 骨组织 （7） 王渝 吉林口腔医学院 • 脱钙液：甲酸50ml, 氯化铝7g ，蒸馏水100ml • 用磁力搅拌或微波辐射器加速脱钙

20. 三 骨组织 （8） • 脱水、透明：采用60%酒精正丁醇至无水酒精正丁醇等量混合逐级梯度脱水，正丁醇彻底脱水兼透明，氯仿补充透明。 • 包埋：松香石蜡或火棉胶松香石蜡双重包埋

24. 四 淋巴结 （1） 唐源 华西医院病理科 • 固定:10%中性福尔马林 18-24小时 包膜要剖开但不随意破坏 取材后固定 包埋:温度<=60度,再高不利于抗原保存

25. 四 淋巴结 （2） 24小时 12小时

26. 四 淋巴结 （3） • 染色:苏木精染色时间要短,镜下控制染色和分色时间 • 制片:宜薄不宜厚（2µm和3 µm） 不宜过冷

27. 四 淋巴结 （4） 2 µm 3 µm 4 µm

28. 谢谢