微生物研究法 研 C

1. 微生物研究法 研C • What is Hela cell • Cell density and doubling time • Cell growth curve 碩一 94334002 曾仁志

2. What is HeLa cell • HeLa cell：HeLa cell is derived from cervial cancer cells taken from a woman named Henrietta Lacks. • HeLa cells have been transformed by human papillomavirus 18 (HPV 18).

3. Human PapillomaViruses • Human PapillomaViruses人類乳突狀病毒： 約有100種類型已被科學家鑑定，大部分無害，一些種類可以引起手部或足部的皮膚疣。 • Cervical cancer：約有30種類型經親蜜接觸傳播後，某些引起生殖器長疣，而其他的引起子宮頸癌。

4. Human PapillomaViruses • HPV contain oncogenes that code for proteins called E7 and E6. • E7 binds to and inactivates the Rb protein. • E6 binds to the p53 protein and targets it for destruction.

5. Cell density and doubling time • Cell density 6cm的dish細胞長滿時約 2.5~3.5 × 106。 6cm dish的面積為 3 × 3 × 3.14 = 28.26 Cell density為( 8.85 × 104 ~ 1.24 × 105)/cm2

6. Cell density and doubling time Doubling time：細胞分裂所需的時間。 doubling time公式 DT=( t – t. 0. )log 2/( log N - log N.0. ) DT=(56-6)log2/(log 3028133 – log 536733) = 20 t、t. 0. 為計算細胞數目的時間 N. 0. 為t. 0. 時的細胞數目 N. 為t 時的細胞數目 • 公式求得doubling time(DT) ：20 小時

7. 5.92 3.1

8. 討論 • 這部分實驗主要以計數細胞及生長曲線為主，雖然不需高超的技術但卻是一項基本的工夫，在做的過程中，可能一整天都待在實驗室。可見得做實驗除了細心外，耐心也很重要。本次的實驗中有幾點需要討論的地方，第一、就是時間點沒有取好，有一些點太接近的了，不具代表性，圖畫出來也不好看。第二、從曲線圖的生長速率中，細胞雖進入了 log phase，但是生長速率卻有很大的變動，可能當初分盤時，每盤細胞數沒有一致。第三、細胞生長曲線圖沒有 lag phase，細胞種的太多。經過這次的實驗，相信對往後計數細胞的步驟會更加有經驗及熟練。