Carbonchio

1. Carbonchio Prof. Pasquale Urbano Collegamento al Consensus e alle linee guida europee

2. Carbonchio • Non è una cosa nuova, e in italiano si è sempre chiamato così • È sbagliato chiamarlo ‘antrace’, come fanno i media e come, deplorevolmente, sta entrando nell’uso • I vecchi testi lo trattano estesamente

3. Le microfotografie originali di Robert Koch, sul bacillo del carbonchio

4. Vaccino anticarbonchioso • Storicamente, il carbonchio è la prima malattia per prevenire la quale fu dimostrato efficace un vaccino batterico • Le colture attenuate ottenute da Pasteur dimostrarono la loro efficacia immunizzante nel famoso esperimento di Pouilly Le Fort nel 1881. vedi

5. Vaccino anticarbonchioso • Il vaccino disponibile per uso umano è poco efficace • PaxVax Inc. of San Diego will develop and test two formulations of an anthrax vaccine. Both formulations contain a gene known as rPA, which codes for a protein that protected animals from anthrax in previous studies. The gene will be inserted into a carrier virus or vector called adenovirus 4 and the vaccine delivered orally via a capsule. The adenovirus 4 vector is a modified live-virus vaccine that has been studied for more than 40 years and has a good safety profile in humans. Pending review and approval of the Investigational New Drug Application by the Food and Drug Administration, a Phase 1 clinical trial will be conducted to select one of the two formulations for further development. NIAID has made an initial award of $3.8 million to PaxVax. If milestones are met, the total award could amount to $23.8 million over the next nine years. http://www.dddmag.com/news-NIH-Funding-Bioterror-Vaccines-10810.aspx

6. Vaccino anticarbonchioso • Emergent Biosolutions of Rockville, Md., also will develop and test an anthrax vaccine. The candidate vaccine consists of Emergent's licensed anthrax vaccine (BioThrax) combined with an adjuvant. The investigational vaccine was tested in a Phase 1 clinical trial prior to the award of this contract. This new award will fund manufacturing, stability studies, assay validation and clinical trial preparation of the vaccine product. After those activities are completed, the vaccine may begin Phase 2 clinical testing. Emergent has received an initial award of $9.1 million, with the potential for total funding of up to $28.7 million over the next four years if clinical milestones are met. http://www.dddmag.com/news-NIH-Funding-Bioterror-Vaccines-10810.aspx

7. Diagnosi sulle carogne • Termoprecipitazione di Ascoli [1911] • Estratti a caldo, filtrati, vengono stratificati in una provetta sottile contenente siero anticarbonchioso • La formazione di un anello di precipitato è diagnostica • Importante presidio di profilassi generale

8. Carbonchio in Italia - 2011 • At the moment there are 39 suspectedanimals in Campania region (9 • confirmed); and 14 in Basilicata. • V. nota

9. Carbonchio

10. Carbonchio • Agente: Bacillus anthracis • Spore e tossine • Formecutanee, inalatorie**, intestinali **Sospettare il bioterrorismo

11. Forma vegetativa di B. anthracis, da coltura. Gram

12. Bacillus anthracis, SEM colorata

13. Genetica La virulenza dipende dalla capsula, governata dal plasmide pXO2 La patogenicità dipende da LF e EF, che si associano a PA a formare le esotossine, governate dal plasmide pXO1

14. Capsula • Polimero di acido D-gamma-glutammico, formato da CapD, una transpeptidasi codificata nel plasmide pXO2 • Costituisce il principale fattore di virulenza, non trovando recettori sui macrofagi

15. Tossine del Carbonchio • I componenti della tossina sono tre: • OF [Oedema Factor] • LF [Lethal Factor] • PA [Protective Antigen] • Agiscono di concerto; isolatamente, non sono tossici

16. B. anthracis, geni per le tossine

17. PA del Carbonchio E’ la componente deputata a riconoscere il recettore, l’ATR [Anthrax Toxin Receptor], una proteina di membrana di tipo I, che ha un dominio extracellulare A del Fattore di von Willebrand. Legata al recettore, PA viene clivato in una parte che si perde e in un frammento carbossiterminale che eptamerizza, acquisendo affinità per OF e/o LF, che possono così essere endocitati e agire nel citosol.

18. Intossicazione da B. anthracis

19. Fattore Edemigeno (EF) del carbonchio • 89 kDa • Gene su plasmide pXO1 • adenilato ciclasi calcio- e calmodulina-dipendente, che porta alla formazione di edema e all’inibizione delle funzioni dei polimorfonucleati

20. Fattore Letale (LF) del Carbonchio • 90 kDa, gene sul plasmide pXO1 • LF è una zinco-endoproteasi che taglia l’aminotermine delle protein-chinasi mitogeno attivate 1 e 2 (MAPK K1 e K2), inattivandole, e così bloccando la trasduzione del segnale di attivazione • Nei macrofagi: •  attivazione del burst ossidativo  rilascio di ossigeno reattivo •  induzione di citochine proinfiammatorie, quali TNF e IL-1ß  shock e morte

23. Spora del carbonchio e macrofago

24. Carbonchio Cutaneo • Incubazione 1-12 gg • Papula -> vescicola o ulcera -> escara centrale nera con alone rosso vivo, per diversi giorni • Diagnosi: Batterioscopia (Gram) e coltura da vescicole, base dell’ulcera, sotto il margine dell’escara • Buona risposta al trattamento

25. Carbonchio Cutaneo

26. Carbonchio cutaneo • Realistico moulage in cera, nel museo al Chiostro del Maglio

27. Epidemia di carbonchio cutaneo Nella prima guerra mondiale l’esercito inglese fu colpita da una vasta epidemia di carbonchio cutaneo, a localizzazione sul viso e allo scalpo, per l’impiego di spazzole e pennelli da barba prodotti in India con setole contaminate da spore carbonchiose

28. Carbonchio da inoculazione • È in corso un’epidemia fra gli eroinomani, in Scozia, UK e in Germania • Contaminazione con spore di eroina proveniente dall’Afganistan • 35 casi, 11 morti, al 22 aprile 2010

29. Carbonchio da inoculazione • È stata ventilata e discussa una possibile causa dolosa, bioterroristica, della contaminazione con spore carbonchiose dell’eroina grezza che sta causando l’epidemia in Scozia e Inghilterra • È considerata plausibile, ma improbabile e praticamente non provabile • Vedi nota

30. Carbonchio da inoculazione Su Lancet, Vol 375 April 17, 2010, p. 1345 è presentato il quadro clinico di questa nuova forma di carbonchio. Estratto in: http://download.thelancet.com/pdfs/journals/lancet/PIIS0140673610605739.pdf?id=3d35b1b5aa0ec416:-47766f9:12824058b61:68391271920107987

31. PROCEDURE OPERATIVE PER LA GESTIONE DI MATERIALE POTENZIALMENTE CONTAMINATO DA Bacillus anthracis

32. Resistenza spore • Le spore resistono per tempi lunghissimi, indefiniti, agli agenti naturali di disinfezione • Spore carbonchiose reperite negli intonaci dei più vecchi tronchi della metropolitana londinese • Spore ancora attive dopo 48 anni, nell’isola di Gruinard contaminata per provare la dispersione con testate di artiglieria • Rischio per scavi attraverso sito sepolcrale del 16° secolo vedi nota

33. BBC, 18 marzo 2010

34. Gruinard Island • Nel 1942, utilizzata per esperimenti di guerra biologica con spore carbonchiose. • Scelta per la lontananza da luoghi molto popolati; confiscata ai pochi abitanti, poi risarciti, l’isola è servita per provare le modalità di dispersione di spore caricate su ordigni esplosivi. • Il successo delle prove è stato dimostrato dalla moria del bestiame ripetutamente portato a pascolare sull’isola. [Interdizione di area] • L’isola risultava ancora contaminata negli anni ‘80. • Nell’86 grossa operazione dei decontaminazione • 280 tonnellate di formaldeide in acqua di mare spruzzata sui 196 ettari di superficie  buon esito e fine della quarantena

35. Operation Dark Harvest • In 1981 British newspapers began receiving messages with the heading "Operation Dark Harvest" which demanded that the government decontaminate the island, and reported that a "team of microbiologists from two universities" had landed on the island with the aid of local people and collected 300 lbs of soil. The group threatened to leave samples of the soil "at appropriate points that will ensure the rapid loss of indifference of the government and the equally rapid education of the general public". The same day a sealed package of soil was left outside the military research facility at Porton Down; tests revealed that it contained anthrax bacilli. A few days later another sealed package of soil was left in Blackpool, where the ruling Conservative Party was holding its annual conference. The soil did not contain anthrax, but officials said that the soil was similar to that found on the island.[10] Bioterrorismo bello e buono !

37. Decontaminazione - cautele • Per agire in zone contaminate da agenti biologici occorrono cautele particolari • Presidi personali di protezione • Vestizione • Lavaggio • Svestizione

38. Carbonchio da inalazione La forma clinica che si teme a seguito di un attacco massiccio, per aerosolizzazione delle spore carbonchiose, è il