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实验九、染色体 G 带技术

实验九、染色体 G 带技术. 一、实验目的 学习和掌握胰蛋白酶法的染色体 G 带显带技术。. 二、实验原理. 染色体由 DNA 、组蛋白、非组蛋白等组成。在 DNA 链上有 A-T 丰富区及 G-C 丰富区，用 Giemsa 染色时， A-T 区较 G-C 区更易染色。当用 Tryposin 法处理后，染色体上特定的蛋白质组成部分被抽取，使得染色体结构变得不均匀，加强 A-T 区与 G-C 区染色上的反差，形成深浅、明暗不同的带。由此，为染色体识别，染色体遗传病诊断，杂种细胞鉴定，特殊细胞株标记等开创了一系列检测方法。.

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实验九、染色体 G 带技术

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  1. 实验九、染色体G带技术 • 一、实验目的 学习和掌握胰蛋白酶法的染色体G带显带技术。

  2. 二、实验原理 • 染色体由DNA、组蛋白、非组蛋白等组成。在DNA链上有A-T丰富区及G-C丰富区，用Giemsa染色时，A-T区较G-C区更易染色。当用Tryposin法处理后，染色体上特定的蛋白质组成部分被抽取，使得染色体结构变得不均匀，加强A-T区与G-C区染色上的反差，形成深浅、明暗不同的带。由此，为染色体识别，染色体遗传病诊断，杂种细胞鉴定，特殊细胞株标记等开创了一系列检测方法。

  3. 将片置于37℃的pH 7.0 ICN 0.25％trypsin 液中40～100 sec pH7.0GKN15sec 吸去下端多余液体 pH 6.8 PBS 5％Giemsa 染色10－20min 吸去下端水分 微流水漂洗 400x尋找中期分裂相及染色体分散好的图象 100搜索细胞 空气干燥 绘图或拍摄 三、实验步骤 • 1

  4. 下端30sec 下端30sec .

  5. 上端30sec 上端90sec 下端60sec 下端120sec 总酶解时间60sec 总酶解时间120sec

  6. 90sec 30sec 60sec 120sec 总酶解时间60sec 总酶解时间120sec • 1

  7. 作业： 1. 简要说明G带技术的主要原理。 2. 在染色体G带技术的显带过程中，哪个步骤最关键，分析用Trypsin处理时间不同的结果并附绘图。

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