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革兰氏阴性需氧杆菌. 第一节 布氏杆菌属 第二节 假单胞菌属 第三节 波氏菌属 第四节 军团菌属 第五节 弗朗西斯菌属 第六节 摩拉菌属 第七节 不动杆菌属. 布氏杆菌属 ( Brucolla ). 布氏杆菌又名布鲁菌,是多种动物和人 布氏杆菌病 的病原,不仅危害畜牧生产,而且危害人类健康。
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革兰氏阴性需氧杆菌 第一节 布氏杆菌属 第二节 假单胞菌属 第三节 波氏菌属 第四节 军团菌属 第五节 弗朗西斯菌属 第六节 摩拉菌属 第七节 不动杆菌属
布氏杆菌属 (Brucolla) 布氏杆菌又名布鲁菌,是多种动物和人布氏杆菌病的病原,不仅危害畜牧生产,而且危害人类健康。 分类本属包括六个种: 马尔他热布氏杆菌(B.melitensis),亦称羊氏杆菌; 流产布氏杆菌(B.abortus),亦称牛布氏杆菌; 猪布氏杆菌(B.suis); 沙林鼠布氏杆菌(B.neotomae); 绵羊布氏杆菌(B.ovis);犬布氏杆菌(B.canis)
致病性 • 本属(不产外毒素)细菌靠较强的内毒素致病,尤以羊布氏杆菌的内毒力最强。 • 它们是牛、羊、猪等动物布氏杆菌病原体。在妊娠母畜中常因此病引起流产、宫炎,个别公畜发生睾丸炎。 • 人感染后表现为不定期发热、关节炎、睾丸炎等病症,故名“波浪热”。
形态特征 • 短小杆菌,革蓝氏染色特性 G-。 • 柯氏染色成红色,其它菌呈绿色。 • 球杆状,0.5-0.7x0.6-1.5μm,多单在,少数呈短链。不形成芽孢,无荚膜。
培养 • 属需氧菌,在37℃和pH6.6-6.8时发育最佳。 • 牛、羊的布氏杆菌初代分离时需在含5--10%CO2中始能生长,但在人工培养基上移植几次后,即能适应普通大气环境。 • 不同种的布氏杆菌,初代分离时对CO2的需要、产生H2S的能力、在加有抑菌色素培养上的生长以及糖发酵试验等都是不同的,据此可作鉴定不同种布氏杆菌的依据。
生化特性 • 此菌不产生靛基质,不液化明教,不凝固牛乳,V、P和M.R试验阴性,不能利用柠檬酸盐。过氧化氢酶常为阳性。 不能在麦康凯培养基上生长.
抗原构造 • 分为属内抗原与属外抗原,属内抗原包括A (流产型) 、M (马氏型抗原)及R抗原等表面抗原。 属内抗原: A抗原与M抗原 其抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上,为外露的多糖链部分。光滑型布氏杆菌具有A和M两种表面抗原。 R抗原 为细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物,是大多数非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。
种和生物型 • 该属包括6个种20个生物型,即马尔他布氏杆菌生物型1-3 、流产布氏杆菌生物型1-9 、猪布氏杆菌生物型1-5、绵羊布氏杆菌、沙林鼠布氏杆菌和犬布氏杆菌。 • 绵羊种和犬种布氏杆菌是天然的R型种,其他种为S型。布氏杆菌最常见的变异是S-R变异,此种变异很少发生回变。
抵抗力 • 布氏杆菌对外界环境的抵抗力相当强。对热敏感,60 ℃ 30分可 被杀死,煮沸时立即死亡。 皮毛1.5--4个月 对消毒剂较敏感。
微生物学诊断 • 细菌学检验时可取整个流产胎儿或其胃内容物、羊水、胎盘的病变部位、乳汁和尿等病里材料。 • 病料涂片可用柯氏染色镜检。病料还可进行分离培养,动物试验。(凝集 豚鼠) • 血清学试验:病料中布氏杆菌检查--荧光抗体技术、反向间接血凝试验、间接炭凝集试验以及免疫酶组化法染色等。血清中布氏杆菌抗体检查--凝集反应: 平板、试管 也可进行补体结合反应和全乳环状反应。 • 变态反应检验应用布氏杆菌水解素诊断绵羊和山羊的布氏杆菌病。
凝集反应、补体结合反应和变态反应出现的时间各有特点凝集反应、补体结合反应和变态反应出现的时间各有特点 • 即动物感染布氏杆菌后,首先出现凝集反应,消失较早; • 其次出现补体结合反应,消失较晚; • 最后出现变态反应,保持时间也较长。 • 为了彻底消除各类病畜,应同时使用三种方法进行综合诊断。
免疫防治 目前常用菌苗 • 羊型五号苗(M5)是我国培养的弱毒苗。 • 布氏杆菌苗 猪型二号菌苗(S2)也是国产弱毒苗。可用于猪、山羊、绵羊和牛的免疫。 • 牛型的布氏杆菌19号菌种制成的布氏杆菌病或菌苗,专供预防牛和绵羊布氏杆菌病用。
假单胞菌属 (Pseudomonas) • 本属细菌类别繁多,约有140余种,但对人畜有致病作用的细菌,仅有鼻疽杆菌、绿脓杆菌(伪鼻疽)等少数几种。
铜绿假单胞菌(P.aeruginosa) • 绿脓杆菌(p.aeruginosa)属假单胞菌属(pseudomonas),广泛分布于自然界及正常人皮肤、肠道和呼吸道,是临床上较常见的条件致病菌之一。
致病性 • 绿脓杆菌感染可发生在机体任何部位和组织、常见于烧伤或创伤部位、中耳、角膜、尿道和呼吸道。 • 也可引起心内膜炎、胃肠炎、脓胸甚至败血症。
形态与结构 • G-细长中等大的杆菌。大小为1.5~3.0×0.5~0.8um。 • 多单在、成双,有时成短链; • 菌端有1--3根鞭毛,能运动; • 不形成芽孢和无荚膜。
培养 • 专性需氧。本菌在普通培养基上发育良好,形成圆形光滑菌落。多数直径2~3mm,边缘不整齐,扁平湿润。 • 在血琼脂平板上形成透明溶血环。液体培养呈混浊生长,并有菌膜形成。 • 绿脓杆菌能产生两种水溶性色素:一种是绿脓素,为蓝绿色的吩嗪类分合物,无荧光性,具有抗菌作用。另一种为荧光素,呈绿色。绿脓素只有绿脓杆菌产生,故有诊断意义。但广泛使用有效抗生素后筛选出的变异株常丧失其合成能力。
生化特性 • 分解蛋白质能力甚强,而发酵糖类能力较低,分解葡萄糖,产酸不产气,不分解甘露醇、乳糖及蔗糖,能液化明胶。 • 分解尿素,不形成吲哚,氧化酶试验阳性,可利用枸椽酸盐。
抗原 • 绿脓杆菌有菌体O抗原和鞭毛H抗原。 • O抗原含有内毒素和原内毒素蛋白质两种成份。 • 原内毒素蛋白质是一种高分子、低毒性,免疫原性强的保护性抗原,不仅存在于不同血清型绿脓杆菌中,而且广泛存在于假单胞菌属的其他细菌以及肺炎杆菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等G-细菌中,是一种良好的交叉保护抗原。
抵抗力 • 本菌对化学药品较一般的G-菌强。对链霉素、庆大霉素、多粘菌素B和E敏感,但易产生抗菌性。
致病性 • 绿脓杆菌能产生多种与毒力有关的物质,如内毒素、外毒素a、弹性蛋白酶、胶原酶、胰肽酶等,其中以外毒素a最为重要。 • 绿脓杆菌外毒素a为一种热不稳定的单链多肽,分子量约66,000,经甲醛或戊二醛处理可脱毒为类毒素,并被特异性抗毒素中和。毒性强,注入动物后,主要靶器官肝脏可出现细胞肿胀、脂肪变性及坏死;其他脏器病变有肺出血和肾脏坏死。 • 外毒素a最终使核糖体上延长因子2(ef~2)失活,抑制宿主细胞的蛋白质合成,但具体过程不同。此外,外毒素a和白喉毒素在蛋白质结构、免疫原性、鞭细胞和敏感动物等方面均有差异。
免疫性 • 患者感染后可产生特异性抗体,有一定的抗感染作用。应用抗绿脓杆菌免疫力血清可降低病人继发败血症的发生率和病死率。
免疫防治 • 当前我国用以预防炭疽病的菌苗有两种:无毒炭疽芽胞苗和第Ⅱ号炭疽芽胞苗。 • 如果需要还可用抗炭疽血清治疗或紧急预防炭疽病
鼻疽假单胞菌 鼻疽假单胞菌惯称鼻疽杆菌,现称鼻疽伯氏菌为马属动物(马、骡、驴)等单蹄兽鼻疽的病原,也能感染人、其他家畜和多种野生动物,为重要人兽共患病病原。此病可呈急性或慢性经过,病变特征为皮肤、鼻腔黏膜、肺脏及其他实质器官形成小型的鼻疽结节和溃疡。 形态及染色特性 本菌为无芽孢、无荚膜、不运动、单在、成对或成群的中等大小杆菌,革兰氏阴性。
革兰氏阴性无芽孢微需氧和厌氧菌 第一节 弯曲菌属(了解空肠弯曲菌引致动物腹泻和人急性胃肠炎、食物中毒,288) 第二节 螺杆菌属 第三节 蛭弧菌属 第四节 拟杆菌属 第五节 梭杆菌属(了解坏死梭杆菌与腐蹄病,297)
革兰氏阳性无芽孢杆菌 第一节 李氏杆菌属 第二节 丹毒丝菌属 第三节 肾杆菌属
丹毒杆菌属(Erysipelothrix) 本属只有一种,猪丹毒杆菌(E.rhusiopathiae)即猪丹毒丝菌,是猪丹毒病的病原体,通称猪丹毒杆菌。
致病性 • 猪丹毒杆菌是猪丹毒病的病原菌。在自然条件下,三个月至一岁的猪只最易感染,临床上多为急性败血症或皮肤发生特意性疹块,有时也呈慢性感染(主要症状为关节炎和心内膜炎)。 • 本菌对其它家畜、禽类亦具致病性,较长侵害3—4周的羔羊,发生慢性多发性关节炎。人类通常因伤口感染,而患类丹毒。
形态特征 • G+ • 猪丹毒杆菌为纤细的杆状细菌,长1—1.5um宽0.2um。 • 菌体平直或微弯,排列长为单在、成对或呈栅栏状,有时可发现在白细胞内丛集;在老龄培养物或慢性病例的心内膜疣状物上,其菌体多呈弯曲的长丝状。 • 不形成芽胞与荚膜,不能运动。G+
培养 • 微嗜氧菌。加有血清或血液的培养基上生长较好。37℃ PH 72—76。 • 光滑型猪丹毒杆菌在血琼脂平板上经24小时培养,形成圆形,边缘整齐、光滑透明的针尖菌落,且周围带有狭窄的微绿色溶血环。
抵抗力 • 本菌对外界理化因素的抵抗力在无芽胞杆菌中是较强的。
微生物学诊断 • 病料的采取 (1)败血型猪丹毒(41℃以上者)生前可以耳静脉采血,死后可菜肾、脾、肝或心血及淋巴结等作病料;(2)疹块型猪丹毒可采取有界限性的疹块皮肤。(3)慢性猪丹毒采用肿肤部关节液或心脏瓣膜疣状增生物。 • 显微镜检查 ,染色镜检,慢性 纤细杆菌丝状菌体、败血型。 • 分离培养。 • 动物接种。
预防与治疗 • 我国使用猪丹毒氢氧化铝甲醛菌苗和猪丹毒弱毒冻干菌苗。 • 应用抗猪丹毒血清对诊病紧急预防与治疗。
革兰氏阳性产芽孢杆菌 第一节 芽孢杆菌属 第二节 梭菌属
芽孢杆菌属(Bacillus) 芽孢杆菌属的共同特点是: • 形态较大; • 革兰氏染色阳性; • 对营养要求不高,有充足氧气存在是极易生长; • 接触酶阳性; • 都能产生芽孢,芽孢抵抗力很强; • 但其繁殖体的抵抗力和一般细菌并无多大差别,多具周鞭毛,能运动,但炭疽杆菌无鞭毛,不运动。 • 本属细菌中除炭疽杆菌是对人、畜危害严重的致病菌外,其他一般是非致病菌。蜡样芽孢杆菌 也有一定的病原性,地衣芽孢杆菌可引起人的皮肤红癣。
炭疽杆菌(B.anthracis) • 炭疽杆菌主要以炭疽芽孢的形式存在被污染的土壤,畜产品和水中。引起动物、人炭疽。 • 致病性 • 形态与结构 • 培养 • 抗原性 • 诊断 • 防治
致病性 • 对炭疽杆菌最易感的是草食动物;骆驼、水牛及其它野生草食兽次之;猪的感受性较低;狗、猫感受性更低;狼、狐亦可发病,并可成为本菌的传播者。 • 人对炭疽杆菌也是易感的。 • 炭疽毒素共有三种成分:水肿因子、保护性抗原、致死因子。
形态特征 • 长而直的大杆菌,长3—8um,宽1—1.5um; • 无鞭毛,不运动; • 在畜体中可行成荚膜。 • 偶单独、成对常成短链状存在,菌体相连处有清晰的空隙如竹节状。 • 人工培养后则形成长链状。 • 一般苯胺染料都易着色。G+,但陈旧的培养物中有时可呈阴性。
培养 • 需养菌 37℃、营养要求不严格。在普通琼脂上,24小时后形成不透明的灰白色菌落,以扩大镜观察,可见菌落呈卷发状结构。 • 在血液琼脂平板上本菌不引起溶血。 • 在普通肉汤中,培养18—24小时,细菌长成乳白色梳松的絮状菌丝沉于管底或悬浮于肉汤中。 • 在含青霉素0.51U/ml的培养基中,细胞壁肽聚糖合成抑制,形成原生质体串,称为“串珠反应”。若青霉素加至10IU/ml,则完全不能生长或轻微生长。