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急性肾功能不全及药物的影响. 一、目的 1. 通过皮下注射氯化汞 ( HgCl 2 ), 复制兔急性中毒性肾功能不全的模型。 2. 观测肾衰时 , 兔的一般状态、尿常规、肾功能的指标及肾脏形态的变化,分析致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。 3. 通过药物对尿量的影响,观察对急性肾功能不全兔的治疗效果,分析其可能的作用机制。. 二、实验原理
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急性肾功能不全及药物的影响 • 一、目的 1. 通过皮下注射氯化汞(HgCl2),复制兔急性中毒性肾功能不全的模型。 2. 观测肾衰时,兔的一般状态、尿常规、肾功能的指标及肾脏形态的变化,分析致病因素及导致急性肾功能不全的可能发病机制。 3. 通过药物对尿量的影响,观察对急性肾功能不全兔的治疗效果,分析其可能的作用机制。
二、实验原理 肾通过调节肾血流、滤过率、肾小管的排泄与重吸收,排泄体内的代谢物质以维持机体内环境的稳定。动脉血压、血容量、肾自身调节与神经体液调节因素,可影响肾尿液生成。当肾功能不全时,肾血流量减小,肾小球滤过率下降或肾小管排泄、重吸收功能障碍,肾的排泄功能受到影响。通过对尿量、肌酐、酚红的检测以及尿常规和肾形态的观察可以判断肾功能状态。
三、实验方法和步骤 1. 造模,提前24hr,给兔皮下注射0.3-0.4%HgCL2 1ml/kg,造成急性肾功能衰竭模型。 2. 称重、麻醉(3%戊巴比妥钠1ml/kg, iv)、膀胱插管 (在插管前,先留取尿液,供测定肌酐用)。 3. 实验治疗对尿量的影响 (1)记录5min尿量。 (2)快速iv注射37℃生理盐水20ml,记录5min尿量。 (3)缓慢iv 20%葡萄糖5ml,记录5min尿量。 (4)iv多巴胺20μg/Kg,记录10min尿量。 (5)iv速尿5mg/kg,记录10min尿量。
4. 尿液肌酐浓度测定 取实验前留存的尿液或治疗开始前收集的15min尿液,取去蛋白后的上清,按试剂盒测定。 尿肌酐浓度(mg/ml)每分钟尿量(ml) 肌酐清除率= 血浆肌酐浓度(mg/ml)
5. 酚红排泄的测定 iv0.3%酚红1ml/kg,接着注射20%葡萄糖5ml/kg,同时收集15min 尿液。取其中的1ml尿液注入20ml量筒内,加5滴10% NaOH,再加蒸馏水至10ml(模型)或20ml(正常兔)。在546nm下比色,读取A值,按下列公式计算酚红排泄率。 15min尿量(ml)稀释倍数×(7A-0.13) 酚红排泄率= 注入酚红毫升数×3000(mg/ml)
6. 形态学观察 耳静脉注射10ml空气处死家兔,取出肾脏称重,计算肾/体重比。观察肾脏外形,色泽。纵向剖开,观察皮髓质条纹,色泽。 • 7. 尿常规检查 取实验前留存的尿液作下列检查: (1) 镜检细胞和管型 (2) 尿蛋白测定 取少量尿液于载玻片,加4%磺柳酸一滴,观察溶液浑浊程度。
实验步骤: 称重、麻醉 膀胱插管 记录尿量 治疗 留膀胱尿液 生理盐水 葡萄糖 肌酐测定 酚红排泄 多巴胺 速尿
四、结果 尿量(ml) 酚红 肌酐 肾 蛋白 细胞 管型 开始 NS 葡萄糖 多巴胺 速尿 排泄率 浓度 体重比 浊度 正常 肾衰
七、思考题 • (1) 讨论各治疗项目的作用机制? • (2) 反映肾功能的指标有哪些? • (3) 判断发生急性肾功能的主要指标是什么? • (4 ) 探讨HgCl2引起急性肾衰的可能机制?