470 likes | 607 Views
Egy ausztrál katicabogár ( Rodolia cardinalis ) a kaliforniai citrus ültetvényeken terjedő pajzstetűt fogyasztja. Biokontroll. Hatékony antagonistának az alábbi feltételeket kell teljesítenie : 1. genetikailag stabil 2. kis mennyiségben hat 3. könnyen olcsón szaporítható
E N D
Egy ausztrál katicabogár (Rodolia cardinalis) a kaliforniai citrus ültetvényeken terjedő pajzstetűt fogyasztja Biokontroll
Hatékony antagonistának az alábbi feltételeket kell teljesítenie: 1. genetikailag stabil 2. kis mennyiségben hat 3. könnyen olcsón szaporítható 4. számos közegben, különböző patogének ellen hatékony 5. készítményként könnyen kihordható 6. emberre ártalmatlan 7. pesticideknek ellenáll 8. a növényre nem veszélyes
Ampelomyces quisqualis a lisztharmat természetes hiperparazitája. Termőképleteit (piknidium) a lisztharmatok hifáiban, cleisztotéciumaiban és konidiofórjaiban hozza létre. Szinte a teljes Erysiphales nemzetséget fertőzi (Brasilomyces, Erysiphe, Leveillula, Microsphaera, Phyllactinia, Podosphaera, Sphaerotheca,Uncinula).A telet piknidiumként túléli, majd az esőzések hatására az érett piknídiumból spórák rajzanak elő. Folyadékfilmen 20-30 Co-on csírázik jól, s akár 24 óra alatt elárasztja a lisztharmat kolóniát. Behatol a hifákba és termőképletekbe, csak az érett cleisztotéciumot kíméli. 7-10 napig nem okoz tüneteket, ekkor megkezdődik a piknídium képzés és 2-4 napig tart, s eközben a lisztharmat folyamatosan pusztul. A piknídiumokból esőzéskor másodlagos fertőzés indul el, így egy szezonban akár 6-7 életciklusa is lezajlik. Az Ecogen Corporation forgalmazza AQ10 néven.
A. Quisquialis piknídiuma Hárman: szőlő, lisztharmat, A. quisquialis.
Phanerochaete gigantea Bár maga is korhasztó, lényegesen kisebb károkat okoz, mint pl. a Heterobasidium fajok, amelyekkel szemben évtizedek óta alkalmazzák biokontroll fajként. A hatás legfontosabb eleme a hifális interferencia, amit pl. a Heterobasidium fajok, és néhány más farontó esetében figyeltek meg. A hifák érintkezési pontjainál a H. annosum hifákon törés jön létre, a membránok sérülnek, a citoplazma dezorganizálódik, a növekedés leáll. P. Gigantea H. annosum
P. gigantea oidiumok Hifális interferencia
Pseudomonas syringae Változatos táplálkozású élőlény. 41 patovar-ja ismert, de nem patogén változatát használják biokontroll fajként. A terméseken élnek dominálnak a különböző élesztő fajok, melyekből az ember a szőlőn és az almán élőket használja erjesztésre, bor és almabor előállítására. P. syringae (ESC- 11 törzs = BioSaveTM 110) antagonistája a Penicillium expansum, italicum (kék penész) a Bothrytis cinerea (szürke penész) és a Mucor fajoknak, valamint a P. digitatum zöld penésznek. Megelőzi a banán számos betegségét, antagonistája Fusarium fajoknak és E. coli-nak is. P. syringae (ESC-10 törzs = BioSaveTM 100) a citrusféléken élő penészeket is gátolja. A Candida oleophila (Aspire) egyszerre gátol alma és citrusféle terméseken élő kék, zöld, szürke penészeket.
Trichoderma • Kozmopolita talajlakó, a sűrű gyökérzetet gyorsan kolonizálja. Az ilyen kompetitív talajlakó törzseket talajhoz keverve használhatjuk. A gyökeret vagy csak a felszínén, vagy a kortexben kolonizálják. Még a mag felszínén bejuttatva is eljut a gyökérhez, és akár 18 hónappal a kezelés után is kimutatható. A gyökér növekedését serkenti (PGP). A gyökéren felül más gombák parazitálásával szereznek táplálékot. A Trichoderma nemzetségről ismert, hogy hatékonyak a fitopatogén gombák elleni védekezésben (Baker and Cook, 1974). A hatékonyság ismérvei: erélyes kompetíció, közvetlen parazitálás, lízis (Ayers és Adams 1981). • 60 különböző Trichodermaizolátum közül 3 (1-1 T. reesei, koningii és harzianum izolátum) volt potens antagonista. A trópusi fenyő (Pinus merkusii) egyik faiskolai betegségét, a palántadőlést több különböző talajlakó gomba okozza: Sclerotium rolfsii, Pythium fajok, Rhizoctonia fajok és Fusariumok. • A trichodermák „növényvédő” stratégiái: • Mikoparazita • Antibiosis • Kompetíció helyért és tápanyagért • Javuló stressztűrés a gyökér és az egész növény intenzívebb növekedése révén • Szervetlen tápanyagok szolubilizálása és kiválasztása • Rezisztenciát indukál • Inaktiválja patogének enzimeit
A PCNB egy fungicid, melynek hatása 4 nap után csökkenni kezd, a 10. napon már hatástalan. Az antagonisták hatékonysága az idővel növekszik.
a+b: Trichoderma micélium körülnövi a Sclerotium hifát c: párhuzamos növekedés d: appresszórium, e: kampó
A biokontrollra használt Trichoderma törzseknek nincs ivaros alakja. A nemzetségnek a DNS-alapú rendszerezés óta növekvő számú tagja (9-36) van. Mivel a dikariotikus törzsek a természetben legtöbbször heterokariótikusak, a biokontroll tenyészetek célszerűen homkariótikusak. Gyakorlatilag minden vizsgált betegségre akadt eddig működőképes Trichoderma biokontroll törzs. Újabban kiderült, hogy a növényi védekező rendszereket is aktiválják, így más, nem gomba eredetű betegségek megelőzésében is hatékonyak lehetnek.A peszticidek széles körével szemben rezisztensek, törzsenként némi eltéréssel. Gyakorlati felhasználásuk: Extracelluláris enzimeik közül a cellulázokat a textiliparban használják, vagy például a baromfi tápok előkezelésére a gabonák hemicellulázának jobb emészthetősége végett. Plant growth promotion, a növények növekedésének serkentése (PGP): legfeltünőbb a gyökereknövekedés felgyorsulása. Ez esetenként extrém mélyre hatoló gyökerek képzését jelenti. A mechanizmust nem ismerjük. A trichoderma törzsek (pl. T-22) által kolonizált gyökerek 40%-kal kevesebb N műtrágyát igényelnek.
A T. harzianum vegetatív micéliuma fiatal (jobbra) és idősebb, zöld konídiumokkal borított tenyészete
A T22 Trichoderma törzs hatása a kukorica és a szója gyökérzetének fejlődésére
Trichoderma gyökérkezelés hatása a paprika palánták túlélésére és a termés mennyiségére
A Sclerotium rolfsii micéliuma a Trichoderma „spirál” eltávolítása után.
A Pythium (zöld) és a spirálisan rájuk tekeredő Trichoderma (sárga)hifák
A betegség előrehaladása 10 nap alatt kontroll (alsó 2 levélkorong) és transzformált növényeknél
Biokontroll kezelés a talajúntság ellen A talajuntságot előidéző tényezők Hagyományos védekezés: talaj kémiai és hőkezelése Környezetkímélő biológiai védekezés: PGP fajok Vitalizáló fajok Biokontroll fajok
Alkalmazott mikroorganizmusok (AM gombák) EM gombák Telephora terrestris Paxillus involutus FEM gombák Morchella esculenta Morchella conica Morchella steppicola Szaprobionta Coprinus comatus gombák Pleurotus fajok Entoloma clypeatum Baktériumok Gyümölcsösből izolált talajlakó gombafajok: Trichoderma sp. T1, T2 Aspergillus sp. PA Penicillium sp.
Az alkalmazott mikroorganizmusok izolálása, felszaporítása FEM, Szaprobionta Saját izolálás, szövetkultúra, szemcsíra, szubsztrát Szilárd hordozó+folyadékkultúra Cellulóz alapú szubsztrát EM Saját izolálás, rázatott folyadékkultúra, Szilárd hordozó+folyadékkultúra Talajlakók Saját izolálás, szövetkultúra, szemcsíra, köles Baktériumok Saját izolálás, szilárd tenyészet, Szilárd hordozó+folyadékkultúra T22 kereskedelmi forgalomból, konídium szuszpenzióban
Baktérium törzsek azonosítása BE2/2 A B. thüringiensis-ként azonoisított törzs visszaizolálásának eredménye >BE2/2_16S_RNA_partial_gene GAAGTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCATAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGGGGCTAATACCGGATAACATTTTGAACTGCATGGTTCGAAATTGAAAGGCGGCTTCGGCTGTCACTTATGGATGGACCCGCGTCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCAACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGCTAGTTGAATAAGCTGGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGTGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAGGGTCATTGGAAACTGGGAGACTTGAGTGCAGAAGAGGAAAGTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATATGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTTTCTGGTCTGTAACTGACACTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAACAGGATTA BLAST results: 100% Bacillus sp.; Bacillus cereus 100% identities; Bacillus subtilis 100% identities; Bacillus thuringiensis 100% identities. = B. thüringiensis.
BS1/11 A B. cereus-ként azonosított törzs visszaizolálásának eredménye: >BS1/11_16S_RNA_partial_gene GTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCATAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGGGGCTAATACCGGATAACATTTTGAACTGCATGGTTCGAAATTGAAAGGCGGCTTCGGCTGTCACTTATGGATGGACCCGCGTCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCAACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGCTTTCGGGTCGTAAAACTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGCTAGTTGAATAAGCTGGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTATCCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGCGCGCAGGTGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCACGGCTCAACCGTGGAGGGTCATTGGAAACTGGGAGACTTGAGTGCAGAAGAGGAAAGTGGAATTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATATGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTTTCTGGTCTGTAACTGACACTGAGGCGCGAAAGCGTGGGG BLAST results: 100% Bacillus sp.; Bacillus cereus 100% identities; Bacillus subtilis 100% identities; Bacillus thuringiensis 100% identities = B, cereus. .
A kezelt növények gyökérzete mellől a talajból visszaizolált törzsek
Kölcsönhatások a talajunt területekről származó izolátumok és a kezelésre kiválasztott mikroorganizmusok között
A kezelések hatása a szénhidrát akkumulációra A vizsgált cukrok: Fruktóz Glükóz Szaccharóz Módszer: VRK
Az MDA tartalom alakulása két különböző területről származó talajon
A hordozó hatása különböző kezeléseknél a klorofill tartalomra
Különböző kezelések hatása a klorofill tartalomra kétféle alanyon
Következtetések 1., A talajúntság oka az idősebb gyümölcsösök mikroflórája és a fiatal csemeték közötti kedvezőtlen kölcsönhatás 2., A tünetek hatékonyan megszüntethetők biokontroll kezeléssel (T1, T2, PA és kombinációk ezek, és AM fajok között). 3., A kombinált kezelések hatékonysága nem haladja meg a homogén kezelésekét. 4., A bevitel leghatékonyabb módja gombák esetében a konídiumok talajba keverése ültetéskor.
Biokontroll kezelés fitopatogének (Phytophtora, Verticillium) ellen A korábbi eredmények alapján kiválasztott törzsekkel (T1, T2, P1,P2) és felszaporítási/tárolási/kezelési módszerekkel végzett kísérletekben a két fenti fitopatogénnel szembeni védekezés lehetőségét vizsgáltuk. N-sorozat= normál talaj H-sorozat= hőkezelt talaj N1H1=kontroll, N2H2=beteg N6-8=biokontroll H6-10=biokontroll
N-sorozat= normál talaj H-sorozat= hőkezelt talaj N1H1=kontroll, N2H2=beteg N6-8=biokontroll H6-10=biokontroll
N-sorozat= normál talaj H-sorozat= hőkezelt talaj N1H1=kontroll, N2H2=beteg N6-8=biokontroll H6-10=biokontroll
N-sorozat= normál talaj H-sorozat= hőkezelt talaj N1H1=kontroll, N2H2=beteg N6-8=biokontroll H6-10=biokontroll
N-sorozat= normál talaj H-sorozat= hőkezelt talaj N1H1=kontroll, N2H2=beteg N6-8=biokontroll H6-10=biokontroll