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植物组织水势的测定. 制作人:赵世杰 彭涛. 农业生物学实验教学中心. 植物组织水势的测定. 1. 了解测定植物组织水势的方法及其优缺点 2. 学习用小液流法测定植物组织水势的方法 3. 了解压力室法测定植物组织水势的原理. 目的要求 :. 植物组织水势的测定. 水势表示水分的化学势,象电流由高电位处流向低电位处一样,水从水势高处流向低处。 植物体细胞之间,组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。. 植物组织水势和渗透势的测定方法:. 植物组织水势的测定. 液相平衡法:小液流法、称重法、质壁分离法
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植物组织水势的测定 制作人:赵世杰 彭涛 农业生物学实验教学中心
植物组织水势的测定 1. 了解测定植物组织水势的方法及其优缺点 2. 学习用小液流法测定植物组织水势的方法 3. 了解压力室法测定植物组织水势的原理 目的要求:
植物组织水势的测定 水势表示水分的化学势,象电流由高电位处流向低电位处一样,水从水势高处流向低处。 植物体细胞之间,组织之间以及植物和环境之间的水分移动方向都由水势差决定。
植物组织水势和渗透势的测定方法: 植物组织水势的测定 液相平衡法:小液流法、称重法、质壁分离法 压力平衡法:压力室法气相平衡法:露点法 水势测定 冰点降低法 渗透势 蒸气压渗透压计法
植物组织水势的测定 一、液体交换法测定植物组织水势 小液流法 问题: 小液流法测定植物组织水势的原理?
植物组织水势的测定 (一)原理 1、当植物组织与外液接触时发生水分交换: ★植物组织的水势低于外液的渗透势(溶质势),组织吸水,外液浓度变大;ψ植物<ψS ★植物组织的水势高于外液的渗透势(溶质势),组织失水,外液浓度变小;ψ植物>ψS ★若两者相等,则水分交换保持动态平衡,外液浓度保持不变;ψ植物=ψS
植物组织水势的测定 2、同一种物质浓度不同时其比重不一样,浓度大的比重大,把高浓度的溶液一小液滴放到低浓度溶液中时,液滴下沉;反之则上升。 3、根据外液浓度的变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度。根据以下公式计算出溶液的渗透势,即为植物组织的水势。
植物组织水势的测定 溶液渗透势的计算: ψS=﹣iCRT 式中 ψS—溶液的渗透势,以MPa为单位;R=0.008314MPa·L·mol﹣1·K﹣1 T—绝对温度,即273+t℃;C—溶液的质量摩尔浓度,以mol·kg -1H2O为单位 i-溶液的等渗系数,CaCl2可用2.6。
植物组织水势的测定 (二)实验材料 大叶黄杨叶片(取叶片8-10个,枝条?)
植物组织水势的测定 【用具】 特制试管架1个;10ml试管12支(具橡皮塞) (为什么使用特制的试管架?) 【试剂】 CaCl2溶液: 0.05,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5 mol·kg-1H2O 甲烯蓝粉末
植物组织水势的测定 (三)操作步骤 1. 取干燥洁净的试管12支,分成甲、乙两组。 2. 甲组试管中分别加0.05~0.5 6种浓度的溶液之一 各0.5ml(量准确?)。用一只移液器由低 高。 3. 乙组试管加入6种浓度的CaCl2溶液各4ml,用一 只移液器由低 高。4ml需要很准确吗? 4. 甲、乙两组试管分别塞上相应的橡皮塞备用。 为什么盖橡皮塞?
植物组织水势的测定 5.选取均匀一致的植物叶片8~10片(切勿用水洗),打取叶圆片60余片,甲组试管内各加入叶圆片10个,使叶片浸入溶液,盖上橡皮塞,平衡20min以上。期间多次摇动试管,以加速水分平衡。 6. 染色:在甲组每一试管中用解剖针放入微量甲烯蓝粉末,摇匀,溶液变蓝。(干燥针头先用蒸馏水湿润,加入的甲烯蓝量一定少)
植物组织水势的测定 7.观察液滴升降: 取甲组试管有色液 乙组试管中部 液滴位置? 观察一个浓度后用吸水纸将毛细管内的 溶液吸净,再进行下一个测定。
液滴 植物材料 ψw>ψS 溶液浓度变小 ψw <ψS 溶液浓度变大 ψw =ψS 溶液浓度不变 静止不动
毛细管放置稳定 挤出小液滴 取出毛细管 观察液滴升降
植物组织水势的测定 8.分别测定不同浓度中有色液滴的升降,找出与组织水分势相当的浓度,根据原理公式计算出组织的水势。
植物组织水势的测定 具有平衡浓度结果
植物组织水势的测定 无平衡浓度结果
植物组织水势的测定 错误结果
植物组织水势的测定 结果是否正确,为什么?
植物组织水势的测定 结果是否正确,为什么?
加样器的使用 注意事项:吸取溶液后不能倒置
植物组织水势的测定 注意事项: 1.所取材料在植株上的部位要一致,打取叶圆片要避开主脉和伤口。 2.取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速,以免失水。到实验材料生长处操作。 3.甲烯蓝易吸附在试管壁上,先用水洗刷,再用铬酸洗液浸泡,铬酸洗液回收,可以重复使用。
二、压力室法测定植物组织水势 植物叶片通过蒸腾作用不断向环境散失水分,产生蒸腾拉力。导管中的水分由于“内聚力”的作用而形成连续的水柱。因此,对于蒸腾着的植物,其导管中的水柱由于蒸腾拉力的作用,承受着一定的张力或负压,使水分连贯地向上运输(图A)。 当叶片或枝条被切断时,木质部中的液流由于张力解除迅速缩回木质部(图B)。
植物组织水势的测定 将叶片装入压力室钢筒,叶柄切口朝外,逐渐加压,直到导管中的液流恰好在切口处显露时,所施加的压力正好抵偿了完整植株导管中的原始负压。这时所施加的压力值(通常称为“平衡压”)将叶片中的水势提高到相当于开放大气中导管中液体渗透势ψs(sap)的水平(图C)。
植物组织水势的测定 由于通过导管周围完整活细胞半透膜进入 木质部导管的汁液,其渗透势常接近于零(活 性溶质含量很低)。因此,下式成立: P +ψw=ψs≈0 →ψw=﹣P 式中 P-平衡压(正值); ψw—叶片或枝条的水势(负值); ψs—木质部汁液的渗透势。
植物组织水势的测定 植物材料: 大叶黄杨枝条
注意事项1.装样时螺旋环套不要拧得太紧,以免压 伤植物组织。2.加压速度不能太快,接近叶片水势时加 压速度要放慢,否则会影响测量精度。3.注意安全,加压时不要使脸部处于钢筒 顶盖正上方。4.高压钢瓶有危险,搬运或使用时要注 意。 植物组织水势的测定
植物组织水势的测定 思考题: 1、如果某一支试管内多加入或者少加入 一个叶园片对结果有无影响?为什么? 2、压力室法测定水势时,加压速度过快 对结果有何影响?