Identification d’entérobactérie sur microgalerie

1. Identification d’entérobactérie sur microgalerie Cupule Microplaque de 96 puits

2. Préparation de la microplaque Introduire à l’aide d’une micropipette, d’une pipette graduée stérile de 1 mL ou d’une pipette Pasteur 200 µL (soit 4 gouttes) des différents milieux dans les cupules, à proximité du bec bunsen (dans la zone de stérilité).

3. Microgalerie avant ensemencement aa Cupules d’identification pour une souche Composés carbonés

4. Ensemencer avec l’öse ou avec la pipette Pasteur stérile, chaque série de cupules avec la même souche bactérienne. Ici 3 souches différentes peuvent être étudiées en même temps.

5. Microgalerie après culture de 24 heures à 37°C • Pour identifier l’ensemble des caractères biochimiques de ces différentes souches, il est nécessaire de pratiquer des tests complémentaires pour mettre en évidence: • La NR • La production d’indole • La TDA • La fermentation du glucose par la voie du butane diol

6. Lecture de la 1ère partie de la plaque H2S ONPG ADH CIT LDC ODC + - - - + + + +/- + + + +/- INO SAC SOR MAN MEL RHA - + + - - + + - + - + +

7. Lecture de la 2nde partie de la plaque GEL IND VP URE GLU TDA 1 gtte naphtol et NaOH 1 gtte FeCl3 1 gtte Kovacs - - + - Identifier la souche par la méthode d’élimination successive. Comparer avec l’identification numérique donnée dans la livre API 20E. 1 gtte Nit 1 et Nit 2 BNit AMY - + - -

8. Identification des différentes espèces d’Enterobacteriaceae + + Klebsiella pneumoniae + Serratia marcesens + Salmonella gallinarum

9. + Citrobacter freundii E coli + + + Klebsiella pneumoniae

10. Lecture des microplaques Proteus vulagaris Salmonella spp Salmonella gallinarum

11. Proteus mirabilis Providencia Stuartii Salmonella spp