第三章药物的杂质检查

第三章药物的杂质检查 基本内容第一节概述第二节一般杂质的检查方法第三节特殊杂质的检查方法练习与思考

基本要求 一、掌握一般杂质检查的原理、方法和计算。二、熟悉特殊杂质检查的方法和原理。三、了解热重分析在药物分析中的应用。

第一节概述 一、药物纯度的概念与要求 1.药物纯度的概念：药物的纯度是指药物的纯净程度。对药物纯度的认识是在防治疾病的实践中积累起来的如：ASA中除了SA外，还存在乙酰水杨酸酐、乙酰水杨酰水杨酸等SA的衍生物，具有致敏作用。 2.对药物纯度的要求随着临床应用的实践和分析测试技术的发展，在不断改进，使之更加完善如：度冷丁（Ⅰ）1948年收入BP，1970年经GC分离鉴定出两种无效异构体（Ⅱ）和（Ⅲ），有时高达20%～30%。

3.杂质：药物中存在的无治疗作用的、影响药物稳定性3.杂质：药物中存在的无治疗作用的、影响药物稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质。 4.药物纯度的评价：应把药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。

5.与试剂的纯度不同，不能用化学试剂的规格代替药品5.与试剂的纯度不同，不能用化学试剂的规格代替药品标准，更不能将化学试剂当作药品直接用于临床如：试剂规格的BaSO4,允许存在可溶性钡盐药品中不允许：可导致医疗事故

二、杂质的来源 1．杂质的来源：生产过程中引入贮藏过程中产生 2．依杂质来源分类：一般杂质：含义，品种特殊杂质：含义依杂质毒性分类：信号杂质有害杂质依杂质理化性质分类：有机杂质无机杂质残留溶剂

一般杂质:在自然界分布比较广泛,在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质。一般杂质:在自然界分布比较广泛,在多种药物的生产或贮存过程中容易引入的杂质。如：pH值、溶液的澄清度、氯化物、硫酸盐、重金属等特殊杂质：在有关药物的生产和贮存过程中，因其生产工艺或药物本身的性质可能引入的杂质。返回

②制剂时的辅料 A + B → C → D + E ①原料中间产物副产物产品 ④异构体多晶型 ③试剂溶剂催化剂 ⑤金属容器、管道、装置返回

三、杂质的限量检查 在不对人体有害、不影响疗效的情况下，允许药物中存在一定量的杂质 1.杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量表示方法：％或ｐｐｍ（百万分率） 2.限量检查：药物中杂质的检查，一般不要求测定其含量，而只是检查杂质的量是否超过限量。

方法：对照法 供试液　　供试液＜对照液相同条件现象现象下反应比较　　　　　　供试液＞对照液对照液　现象现象合格不合格计算公式杂质限量=杂质最大允许量／供试品量×100％ =标准溶液的浓度×标准溶液的体积 ×100％供试品量即 L = C·V / S×100%

第二节一般杂质的检查方法 一．氯化物检查法： 1.原理：供试液：Ag＋+Cl－→AgCl↓（白色混浊）　对照液：标准氯化钠溶液…………… 2.方法：比浊

3.讨论 黑色背景下，从上至下观察氯化物适宜浓度：50~80μg/50ml 硝酸酸性：作用避光供试液若不澄清供试液若有色

暗处放置5min后比较 供试品有色：可采用内消色法，按中国药典附录规定的方法处理。澄清溶液供试品对照溶液 + AgNO3 +标准NaCl 放置10min 过滤 +水供试品溶液供试品 + AgNO3 +水

二、硫酸盐检查法 比浊 1.原理：供试液： SO４2－＋ Ba2＋→ BaSO４↓（白色混浊）　对照液：标准硫酸钾溶液……………………… 2.方法

3.讨论 黑色背景下，从上至下观察硫酸盐适宜比浊浓度：100~500μg/50ml 盐酸酸性供试液如需滤过供试液若有色

三．铁盐检查法 （一）硫氰酸盐法 1.原理：供试液：Fe3＋＋ 6SCN－→[Fe(SCN)6]3－（红色）对照液：标准铁溶液……………………………… 比色 2.方法

3.讨论 白色背景下，从侧面观察盐酸酸性过硫酸铵的作用 Fe3＋的适宜比色范围：10~50μg/50ml 色调不一致时或所呈硫氰酸铁的颜色较浅不便比较时：可分别移入分液漏斗中，加正丁醇或异戊醇提取，分别取提取液比色。

(二）巯基醋酸法（BP ） 1. 原理巯基醋酸还原Fe3+为Fe2+，在氨碱性试液中与Fe 2+ 作用生成红色配位离子。 2Fe3+ + 2HSCH2COOH 2Fe2+ + SCH2COOH + 2H+ SCH2COOH Fe2+ + 2HSCH2COOH Fe(SCH2COOH)2 + 2H+ Fe(SCH2COOH)2 [Fe(SCH2COOH)2 ]2- + 2H2O 2OH-

四、重金属检查法 重金属是指在实验条件下与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，由于药品生产过程中遇到铅的机会比较多，铅在体内又易积蓄中毒，故检查时以铅作为代表。

ChP(2005年版)共四法 第一法(硫代乙酰胺法) 用于溶于水、稀酸和乙醇的药物 1.原理：供试液：CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2 + H2S H2S + Pb2＋ →PbS↓+ 2H＋（黄～棕黑）对照液：标准铅溶液……………………………………… 2.方法：比浊

3.讨论 白色背景下，从上至下观察 pH3.5醋酸盐缓冲液 Pb2＋适宜比色范围：10~20μg/25ml 供试液有色时：供试品有微量Fe3+:在弱酸性溶液中氧化硫化氢析出S 产生混浊影响比色，可加Vc或盐酸羟胺使Fe3+还原成Fe2+再检查。

第二法：用于在水、稀酸、乙醇中难溶，或含芳环、杂环（能与重金属离子形成配位化合物）的有机药物第二法：用于在水、稀酸、乙醇中难溶，或含芳环、杂环（能与重金属离子形成配位化合物）的有机药物 1.原理：C-M炽灼破坏后→Mn＋→第一法检查 2.方法：500～600℃炽灼第三法：用于难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的药物（磺胺类、巴比妥类）供试液：Pb2＋＋Na2S→PbS↓＋２Na＋（灰黑色）　对照液：标准铅溶液……………………………… 比浊

第四法(微孔滤膜法)：用于重金属限量低（含2-5μg重金属）的药物。提高检查的灵敏度。第四法(微孔滤膜法)：用于重金属限量低（含2-5μg重金属）的药物。提高检查的灵敏度。

五．砷盐检查法 • 古蔡法 • 二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC）（一）古蔡法：※※※ 1.原理：金属锌与酸作用产生新生态的氢，氢与药物中微量砷盐反应，生成具挥发性的砷化氢气体，遇溴化汞试纸产生黄至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液在同样条件下生成的砷斑比较，颜色不得更深

As3+ + 3Zn + 3H+ → 3Zn2+ + AsH3 AsO33- + 3Zn + 9H+→ 3Zn2+ + 3H2O + AsH3 AsO43- + 4Zn + 11H+→ 4Zn2+ + 4H2O + AsH3 AsH3 + 3HgBr2→ 3HBr + As(HgBr)3 (黄色) 2As(HgBr)3 + AsH3→ 3 AsH(HgBr)2 (棕色) As(HgBr)3 + AsH3 → 3HBr + As2Hg3 (棕黑色) 2.仪器装置 3.方法：醋酸铅棉花的作用 KI和酸性SnCl2的作用标准砷斑用2ml的标准砷溶液制成

HgBr2试纸 Pb(Ac)2棉供试品、HCl、Zn、KI、SnCl2 返回

KI和酸性SnCl2的作用： ＋5 ＋3 KI SnCl2 AsO43- AsO33- ①将五价砷还原为三价砷，加快反应速度快慢 AsH3 AsO43- + 2I- +2H+ → AsO33- + I2 + H2O AsO43- + Sn2+ + 2H+→ AsO33- + Sn4++ H2O ② I2 + Sn2+→ 2I- + Sn4+ 4I- + Zn2+ → [ZnI4]2- 促进AsH3的生成 ③抑制锑化氢的生成 ④形成Zn-Sn齐，去极化返回

H+ Zn2+ H+ H+ [H] [H] Zn2+ Zn2+ Zn H+ [H] Zn2+ [H] H+ H+ Zn2+ [H] H+ H+ H+ Zn2+ H+

Φ正＝φ0－ 正极负极 Φ负 ε ＝ Φ正－Φ负极化：电动势偏离热力学平衡电动势的现象 Sn2+的加入，形成Zn-Sn齐，去极化返回

Pb(AC)2棉的作用： 消除锌粒和供试品中可能含有的少量的硫化物的影响。 S2- + 2H+ H2S H2S + HgBr2 2HBr + HgS （汞斑） H2S + Pb(Ac)2 PbS + 2HAc 返回

4.供试品处理 （1）供试品为S2-,SO32-, S2O32-等: 因在酸中生成H2S, SO2,与HgBr作用生成HgS或Hg，干扰砷斑检查。用硝酸氧化成硫酸盐可消除。（2）供试品为Fe3+，能消耗KI，SnCl2，可先加足量 SnCl2。（3）环状结构有机药物，先有机破坏（4）含锑药物，改用白田道夫（Betterdorff ）法 2As3+ + 3SnCl2 + 6HCl → 2As↓+ 3SnCl4 + 6H+ 胶态、棕褐色

（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法 （silver diethyl dithio carbamate) （Ag-DDC法） 1.原理：供试液：AsH3+ 6Ag（DDC）→６Ag＋… （红色胶态）对照液：标准砷溶液……………………… 2.仪器装置：比色或测定A

Ag(DDC)的吡啶溶液(USP) 三乙胺-氯仿溶液(ChP) 3.方法：白色背景下，从上至下观察；或在510nm处，测定吸收度

小结其他要求：原理试液的作用对照的方法砷盐检查法的仪器装置

六、溶液颜色检查法 控制药物中有色杂质的含量 1. 目视比色法比色原液标准贮备液标准比色液 K2Cr2O7 CoCl2 CuSO4 黄绿、黄橙黄,橙红棕红 5种色调 10种色号 2. 分光光度法有色杂质对光有吸收，通过测定吸收度可控制其限量 3. 色差计法通过比较供试品、标准比色液与水之间的色差值

七、易炭化物检查法 • 检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化而呈色的微量有机杂质。 • 这类杂质多数结构未知，常采用加硫酸呈色后与对照液比较的方法进行检查。对照液为：标准比色液由CoCl2,K2Cr2O7,CuSO4配制 KMnO4液

八、溶液澄清度检查法 • 检查不溶性杂质 • 与浊度标准液比较浊度标准贮备液：硫酸肼＋乌洛托品→甲醛腙（白色混浊）浊度标准原液浊度标准液：5个级号 • 澄清：系指供试品溶液的澄清度相当于所用溶剂或未超过0.5号浊度标准液 H2O H2O

九、炽灼残渣检查法 • 炽灼残渣：有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐 • 加硫酸炽灼法：700～800℃; • 如炽灼残渣需留作重金属检查，则炽灼温度应控制在500～600℃ • 恒重：供试品连续两次炽灼或干燥后的重量差异在0.3mg以下

十、干燥失重测定法 • 干燥失重：药品在规定条件下，经干燥后所减失的量，以百分率表示 • 检查：药物中的水分和挥发性物质 • 1.常压恒温干燥法适用于受热较稳定的药物温度：105℃ • 2.减压干燥法适用于熔点低、受热分解的药物 • 3.干燥剂干燥法适用于受热易分解或升华的药物干燥剂：硅胶、硫酸、五氧化二磷

4.热分析法 在程序控制温度下，测定物质的物理、化学性质与温度关系的一类技术 ①热重分析法（TGA）在程序升温下，测量物质的质量与温度的关系。特点：样品用量少、灵敏、快速常用于贵重和易氧化药物的干燥失重测定。

②.差热分析法（DTA) 是在程序升温下，测量供试品和参比物之间的温度差与温度关系的一种技术。参比物是一种惰性物质，在加热过程中不发生相变和化学变化。因此温差(△T)只与被测物质的量质变化有关。 △T= 0 被测物未发生吸热或放热反应 △T= - 为吸热峰，峰顶向下 △T= + 为放热峰，峰顶向上

测定药物熔点 应用尖峰为物理变化药物定性分析宽峰为化学变化估测药物的纯度鉴别

③.差示扫描量热法(DSC) 是在程序升温下，测量维持样品和参比物的温度相同，系统所需输给待测物质和参比物的能量差随温度（或时间）变化的热分析技术。供试品吸热：系统供能增加供试品放热：系统供能减少应用：鉴别、晶型鉴别、纯度检查、测定熔点或水分

十一、水分测定法 • 卡尔·费休法 • 原理：I2+ SO2 + H2O 2HI + SO3 • 费休氏液：I2、 SO2、无水甲醇、无水吡啶 • 终点：费休氏液：淡黄→红棕色永停法

十二、有机溶剂残留量测定法 主要检查药物在生产过程中引入的有害的有机溶剂常采用气相色谱法进行检查 ①直接进样法 ②顶空进样法（适用于挥发性大的样品测定）

第三节特殊杂质检查 • 特殊杂质：在该药物的生产和贮存过程中，根据药物的性质、生产方法和工艺条件，有可能引入的杂质 • 方法：利用药物和杂质在物理和化学性质上的差异进行物理：外观性状、分配或吸附、对光的吸收的差异化学：对某一化学反应的差别杂质与试剂反应药物无反应

一、色谱分析法 特点：分离效能高，分离的同时进行测定，应用广泛（一）TLC 1.杂质对照品法判断结果：供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液主斑点比较，不得更深需要对照品

前沿 B ？ l0 A l 原点供试品A 对照品B

2.高低浓度对比法 当杂质结构不能确定、或无杂质对照品时，采用此法要求：杂质斑点的颜色与主成分斑点颜色相同或相近供试液（高）点样、展开、干燥、显色对照液稀释（低）结果判断：供试液所显杂质斑点与对照液主斑点比较，不得更深

3.1法与2法并用 适用：当药物中存在多个杂质时，其中有的杂质有对照品，有的杂质没有对照品或结构未知 4.对照药物法适用：无何时杂质对照品，或供试品杂质斑点颜色与主成分斑点颜色有差异可用与供试品相同的药物作为对照品，此药物所含待检杂质需符合限量要求，且稳定性好

第三章 药物的杂质检查