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動物實驗相關討論. 邵国青 江苏省农科院兽医研究所 210014 南京 84391973@163.net http://www.piginfo.com. 人们总是不习惯变化,但只有变化才能带来进步 --富兰克林. 实验动物的选择和动物实验的准备. 选择实验动物应注意的问题. 年龄与体重 大多实验都选择成年实验动物 同一实验中动物体重尽可能一致 性别 雌性动物对药物的敏感性高于雄性 通常选择实验动物应雌雄各半。
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動物實驗相關討論 邵国青江苏省农科院兽医研究所210014 南京84391973@163.nethttp://www.piginfo.com
人们总是不习惯变化,但只有变化才能带来进步人们总是不习惯变化,但只有变化才能带来进步 --富兰克林
选择实验动物应注意的问题 • 年龄与体重 • 大多实验都选择成年实验动物 • 同一实验中动物体重尽可能一致 • 性别 • 雌性动物对药物的敏感性高于雄性 • 通常选择实验动物应雌雄各半。 • 健康状况 • 品系与等级 • 动物按遗传学控制和微生物控制的标准化条件
动物实验的准备 • 实验的准备 • 确定实验目的、实验规模、实验周期 • 动物实验设计 • 遵守临床实验设计三原则:随机化、重复、对照 • 有时最后采用双因素方差分析,用双盲法或采用双因素方差分析 • 提前1周说明需要提供的实验器械及有关实验条件 • 天实验设计 • 动物的购入 • 提前预约,普通动物实验提前3天,SPF级动物实验提前7天预约 • 消毒猪舍
HVT-013在被免疫鸡群和鸡群环境中的扩散试验计划HVT-013在被免疫鸡群和鸡群环境中的扩散试验计划 • 目的:检测HVT-013在被免疫鸡群和鸡群环境中的扩散情况 • 试验开始时间: 2006年03月10日 • 试验结束时间:2006年05月06日 • 试验结束地点:南京市江宁区华希家禽养殖场 • 饲养方式:地面垫料平养
1.试验准备工作 2006年03月10日前做好: • 1.1 鸡场鸡圈准备: • 1.1.1 隔离3个鸡圈,编号PEN1(圈1)、PEN2(圈2)、PEN3(圈3)。 • 1.1.2 消毒 生石灰喷洒。试验鸡入圈前3天固体福尔马林熏蒸。 • 1.2 加温设备: 木屑炉,装好排烟管道。 • 1.3 饮水设备:柏拉松饮水器 • 1.4 喂料设备:盘式塑料喂料器 • 1.5 保健药品: 复合维生素,泰乐菌素等。 • 1.6 注射器: 2ml 连续注射器、2ml一次性注射器。 • 1.7 标记圈: 自制彩色标记圈。 • 1.8 垫料: 木屑 • 1.9 饲料: 淮阴正大肉鸡颗粒饲料。 • 1.10 饮水: 自来水。 • 1.11 供试鸡: 安徽广德和威公司种鸡场提供一日龄马立克非免三黄肉鸡2000只,于2006年03月10日送到养殖场 • 1.12 供试药品 Three batches of VAXXITEK HVT IBD • 1.13 实验记录用表格
2. 试验方法 • 2.1 分组 将2000只1日龄鸡群作如下分组: • G1 & GC1: • G1: 500只,用于注射VAXXITEK HVT IBD-001 • GC1:150只 不免疫,做好标记并混合到G1组中。 • G2 & GC2: • G2: 500只,用于注射VAXXITEK HVT IBD-002 • GC2:150只 不免疫,做好标记并混合到G2组中。 • G3 & GC3: • G3: 500只,用于注射VAXXITEK HVT IBD-003 • GC3:150只 不免疫,做好标记并混合到G3组中 • G4: 50 ,其中25只用于采集血清,另25只用于采集白细胞
2. 试验方法 2.2免疫 • 2.2.1 疫苗稀释 • 疫苗VAXXITEKHVT IBD-001,002,003马立克稀释液各1支 • 注射 • 1日龄时,用连续注射器将稀释后疫苗进行如下注射 • 群组G1G2G3疫苗分别颈部皮下0.20ml • 入圈 • PEN1--G1 & GC1;PEN2--G2 & GC2;圈3--G3 & GC3
饲养 56天全程饲养,不转群 • 温度 1日龄33度,以后每天降低0.5度。第四周后温度控制在21-24度。 • 湿度 控制在50-70%范围 • 光照 23小时连续光照,1小时黑暗。 • 饲喂 自由采食 • 保健 1-3日龄,饮水中加复合维生素、庆大霉素。除MD、IBD不免外,其他免疫按正常肉鸡饲养免疫程序进行(如8日龄饮水免疫ND+IB. 12日龄免疫H5N1灭活疫苗。) • 其他饲养事项按商品肉鸡饲养程序进行。 • 采样
鸡群观察 • 精神状况 • 神经症状 • 死亡率 • 拉稀现象(IBD症状) • 填好《日记录表》 • 样品处理和保存 按《protocol-HVT-013 environmental release trial》要求进行
记录表格 • 饲料营养成分表 • 疫苗注射登记表 • 鸡只死亡登记表 • 死亡鸡解剖和取样登记表 • 鸡群日常记录表
实验描述 名称、背景、规格,饲养条件
1.实验动物名称 准确、规范描述实验动物的品种或品系名称 避免使用通俗称谓,如SD大鼠不能写成SD大白鼠,更不能简写成大白鼠,KM小鼠不能写俗称小白鼠。
2. 动物背景资料 动物从何获得 遗传学分 类(近交系、远交系、突变系、封闭群、杂交群)中的哪一类 属于微生物分级(普通级、清洁级、SPF级、无菌级) 动物的合格证号及颁发合格证的单位。
动物规格:论文中应准确描述实验所用动物的数量、性别、体重、年龄等。动物规格:论文中应准确描述实验所用动物的数量、性别、体重、年龄等。
4.动物实验条件 动物饲养方式(饲料种类、营养成分、饲喂方式、饮水方式、饲养密度、笼具及垫料种类) 实验观察环境(如温度、湿度、照度、噪音、环境洁净度、通风换气方式等) 动物饲养环境级别,相应级别实验条件使用合格证号及颁布单位
5 . 处理方式: 使用麻醉剂的种类、剂量与方法,动物的处死方法等均应注明。
性别 例:材料和方法 实验动物:BALB/c(nu-nu)裸鼠20只,18-22g,雌雄各半, 由四川大学实验动物中心提供。动物质量许可证: 川实动管第01号。实验鼠在SPF条件下饲养,饲喂 全价小鼠颗粒饲料,自由采食和饮水。 实验方法:****************************************。 实验第7天,颈椎脱臼处死动物,***。 动物名称 遗传背景 动物数量和体重 动物来源 动物质量资料 处死方法 实验饲养条件
编号标记 耳缘剪孔 • 上1下3 颜料涂染 • 常使用,方便,编号原则:先左后右,从上到下 烙印法 • 用刺数钳在耳上刺号,黑墨涂抹 号牌法 • 牌号固定于耳,大动物可系于颈上。 • 大动物有时只记录外表和毛色
给药途径和方法 (一)皮下注射 (二)皮内注射 (三)肌肉注射 (四)腹腔注射 (五)静脉注射 (六)淋巴囊注射 (七)经口给药 (八)其它途径给药
采血方法 耳静脉 割(剪)尾采血 颈动脉采血 颈静脉采血
处死 急性大失血法 化学致死法 脊椎脱臼法 断头法 击打法
实验时,善待动物遵守实验规章制度抓取固定注意自身安全防护实验时,善待动物遵守实验规章制度抓取固定注意自身安全防护
实验养猪 • 最好的“药物”是营养平衡的饲料 • 把握温度,把握猪群 • 采购饲料的唯一准则:多花一分钱进好货 • 你不喜欢吃就不要给猪吃 Health must be “between the ears”and does not allow compromises
总结 • 动物实验变化:质量,硬件,管理,描述 • 试验设计:原理---目的 • 随机,重复,对照 • 标准化: 试验动物平台--国际接轨 • 动物福利:尊重每一个人 • 尊重动物 • 人与自然的和谐