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第二十二章 免疫学检测技术的基本原理. Immunological diagnosis. 掌握 检测抗原或抗体常用的方法、原理及其应用、 T 细胞功能测定的方法 熟悉 免疫印迹法、免疫 PCR 的原理、吞噬细胞功能的测定方法 了解 免疫学检测方法的评估与选择. 第一节 抗原或抗体的检测. 抗原抗体反应的原理 — 特异性,可见性 抗原或抗体的检测方法 1.凝集反应- 直接凝集,间接凝集 2.沉淀反应- 单向免疫扩散,双向免疫扩散, 免疫电泳,免疫比浊
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第二十二章 免疫学检测技术的基本原理 Immunological diagnosis
掌握 检测抗原或抗体常用的方法、原理及其应用、T 细胞功能测定的方法 • 熟悉 免疫印迹法、免疫PCR的原理、吞噬细胞功能的测定方法 • 了解 免疫学检测方法的评估与选择
第一节 抗原或抗体的检测 • 抗原抗体反应的原理—特异性,可见性 • 抗原或抗体的检测方法 • 1.凝集反应-直接凝集,间接凝集 • 2.沉淀反应-单向免疫扩散,双向免疫扩散, • 免疫电泳,免疫比浊 • 3.补体参与的反应-补体结合试验,溶血空斑试验 • 4.用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应
用标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应 • 免疫荧光技术(immunofluorescence) • 酶免疫测定(enzyme immunoassay,EIA) • 放射免疫测定(radioimmunoassay,RIA) • 化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA) • 免疫印迹法(immunoblotting)
酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA) • 双抗体夹心法 • 间接法 • BAS—ELISA • 酶联斑点试验(enzyme-linked immunospot assay,ELISPOT)
淋巴细胞的分离与类型鉴定 • 免疫荧光法 • 磁珠分离法 • 流式细胞术(Flow cytometry)/荧光激活的 细胞分选器(Fluorescence activated cell sorter,FACS)
淋巴细胞功能测定 • T细胞功能测定 • T细胞增殖试验 • 细胞毒试验 • 细胞因子检测 • 皮肤试验 • B细胞功能测定 • B细胞增殖试验 • 抗体形成细胞测定(溶血空斑试验)
免疫学检测方法的应用 • 免疫学检测方法的评估与选择 • 疾病的诊断 • 免疫学监测
小结及思考题 小结:根据抗原的性质及参与反应的成分可将抗原抗体反应分为凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应。 采用荧光素、酶、放射性核素等标记物的免疫标记技术具有灵敏度高、可定性、定量等优点。 • 思考题: • 1、试述凝集反应、沉淀反应的种类及其原理和应用。 • 2、免疫标记技术有哪些基本方法? • 2、可用哪些方法测定 T 细胞的功能?