高脂血症对小鼠睾丸超微结构的影响

高脂血症对小鼠睾丸超微结构的影响

前言 • 随着环境及生活习惯的改变，男性不育症的发病率正逐年上升，而且病因复杂。 • 迄今，60%～75%的患者原因不明。

高胆固醇血症会影响睾丸功能，睾丸内精子细胞数量减少；高胆固醇血症会影响睾丸功能，睾丸内精子细胞数量减少； • 用高脂高胆固醇喂养的雄性小鼠，使雌性小鼠受孕的能力下降，胚胎植入和生育率也有降低。高脂血症很可能是男性不育症的病因之一。

目的 • 本实验通过高脂饲料喂养apolipoprotein E（Apo E）基因敲除小鼠，观察其睾丸超微结构的变化特点，为探讨高脂血症对男性生殖功能的影响提供形态学依据。

材料与方法 • 1.动物分组（12只C57BL/6J雄性小鼠） • 对照组：6只野生型小鼠 • 实验组：6只Apo E基因敲除小鼠

2.高脂血症模型的建立 • 实验组小鼠喂饲高胆固醇饲料(胆固醇0.5%，猪油10%，蛋黄粉10%，维持料59.5%，蔗糖20%)，共12周； • 对照组小鼠喂饲普通饲料，喂养12周。

3.透射电镜标本制备 饲养12周后，将小鼠腹腔打开，取出睾丸组织，用双面刀片把样品切割成1mm3小块，置于4℃的2.5%戊二醛溶液中固定过夜，常规冲洗后以l%锇酸后固定。在冲洗后用50%、70%、90%和100%乙醇依次脱水，环氧树脂包埋，超薄切片，最后用醋酸铀及柠檬酸铅双重染色，在日产JEM-1230型透射电镜下，观察小鼠睾丸组织的超微结构变化特点，并摄片。

1.血脂： 与正常组比较，高脂血症组血脂明显升高。结果表1 57BL/6J小鼠血清中胆固醇和低密度脂蛋白浓度 (±s, mmol/L) 与正常组比较：*p＜0.05

2.电镜：实验组小鼠睾丸内生精细胞、支持细胞、睾丸间质细胞、内皮细胞等超微结构呈现一系列病理变化。2.电镜：实验组小鼠睾丸内生精细胞、支持细胞、睾丸间质细胞、内皮细胞等超微结构呈现一系列病理变化。 2.1生精细胞 ★ △ △ ▲ 图1 对照组生精细胞核（★）、线粒体（△）及粗面内质网（↑）结构正常 ×15 000 图2 实验组生精细胞线粒体空泡变性（△）、粗面内质网轻度扩张（↑）及异常结构（▲）×15 000

2.2支持细胞 ☆ ★ ★ △ △ ▲ 图3 对照组支持细胞核（★）、线粒体（△）及粗面内质网（↑）结构正常 ×15 000 图4 实验组支持细胞核（★）、线粒体空泡变性（△）、粗面内质网扩张（↑）、核膜外侧致密沉淀物（▲）及大空泡（☆） ×15 000

2.3生精小管基膜 图5 对照组生精小管基膜（↑） ×20 000 图6 实验组生精小管基膜厚薄不均，致密层明显增厚（↑） ×20 000

2.4睾丸间质细胞 △ △ ▲ ★ ★ 图7 对照组睾丸间质细胞核（★）、线粒体（△）、滑面内质网（↑）及脂滴（▲） ×15 000 图8 实验组小鼠睾丸间质细胞核（★）、线粒体减少，空泡状（△）及粗面内质网扩张（↑）×15 000

2.5毛细血管 △ △ 图10 实验组睾丸间质毛细血管内皮细胞线粒体空泡变性（△） ×20 000 图9 对照组睾丸间质毛细血管内皮细胞线粒体（△） ×20 000

高脂血症对小鼠 睾丸超微结构的影响