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分析化学课程论文报告. 方文浩 化学系 5 班. 单可隆抗体的免疫分析. 抗体. 抗体是蛋白质的一种,一般称为免疫球蛋白( immunoglobulins, Ig ) , 其中大部分抗体是 IgG ( 70% )。 IgG 是一种有两个特征性重 - 轻链杂二聚体,通过双硫键形成的 Y 型蛋白,其中有由于 Fab 区轻重链球形变化形成的两个结合位点,其特异性由结合识别区的氨基酸决定。. 单克隆抗体. 抗体由 B 淋巴细胞产生,每一个 B 细胞在其表面只有一种特异性。 外来抗原只能与那些具有专一性结合位点的细胞结合。 这些结合刺激细胞分裂,形成大量具有相同特异性的抗体。
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分析化学课程论文报告 方文浩 化学系5班
抗体是蛋白质的一种,一般称为免疫球蛋白(immunoglobulins, Ig),其中大部分抗体是IgG(70%)。IgG是一种有两个特征性重-轻链杂二聚体,通过双硫键形成的Y型蛋白,其中有由于Fab区轻重链球形变化形成的两个结合位点,其特异性由结合识别区的氨基酸决定。
单克隆抗体 • 抗体由B淋巴细胞产生,每一个B细胞在其表面只有一种特异性。 • 外来抗原只能与那些具有专一性结合位点的细胞结合。 • 这些结合刺激细胞分裂,形成大量具有相同特异性的抗体。 • 它们纯合性很高,只存在单一的结合位点,因此叫做单克隆抗体。
抗原 抗原不一定是蛋白质,只要是能诱导免疫响应,从而形成相应抗体的大分子即可。
平衡常数 Ab-Ag为抗体-抗原复合物
在指定抗体浓度下,抗原浓度只在某个特定的范围内与结合率有关,在此范围以下,结合率为一常数,改变抗原浓度不会导致结合率发生变化。在指定抗体浓度下,抗原浓度只在某个特定的范围内与结合率有关,在此范围以下,结合率为一常数,改变抗原浓度不会导致结合率发生变化。
通过改变抗体浓度可以使最大变化区间向较高抗原浓度的范围变化。在抗体浓度很低时(<0.01/Keq),抗体已结合的位点数可以反映出待测物浓度与抗体浓度无关。通过改变抗体浓度可以使最大变化区间向较高抗原浓度的范围变化。在抗体浓度很低时(<0.01/Keq),抗体已结合的位点数可以反映出待测物浓度与抗体浓度无关。
标记 • 用放射性同位素I和H跟踪蛋白质(抗原)。 • 用荧光试剂标记,用分光光度法分析。 • 用生物酶标记,间接测量酶底物的消耗、产物的产量来分析。
参考文献 1 Kellner.R. 李克安,金钦汉等译,分析化学/奥地利. 北京:北京大学出版社,2001,7:351—372 2 John A. Dean 常文保等校译,分析化学手册/美国. 北京:科学出版社,2003,18 3 倪永年,化学计量学在分析化学中的应用. 2004,8:274
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