抗原的概念与应用

2. 超 抗原的概念与应用 chaokangyuan ppt制作及修改：卢悠悠 陈敏敏 资料搜集整理：苏嘉诚 龚岳斌 周磊

3. 超抗原是指能在极低浓度下即可非特异地刺激多数T细胞克隆活化增殖，产生极强免疫应答的物质。超抗原可分为外源性超抗原（如金黄色葡萄球菌肠毒素、链球菌致热外毒素、M蛋白等），以及内源性超抗原，如小鼠乳腺瘤病毒(MMTV)和人类免疫缺陷病毒(HIV—gpl20)。 TEXT 01 TEXT 05 TEXT 06 TEXT 07 TEXT 02 TEXT 03 TEXT 04 超抗原的概念

4. 超抗原是指能在极低浓度下即可非特异地刺激多数T细胞克隆活化增殖，产生极强免疫应答的物质。超抗原可分为外源性超抗原（如金黄色葡萄球菌肠毒素、链球菌致热外毒素、M蛋白等），以及内源性超抗原，如小鼠乳腺瘤病毒(MMTV)和人类免疫缺陷病毒(HIV—gpl20)。 单击添加大标题 Your text 单击添加大标题 Your text

5. 外源性超抗原：由细菌分泌的可溶性蛋白质，包括G+外源性超抗原：由细菌分泌的可溶性蛋白质，包括G+ 菌分泌的各种外毒素（如葡萄球菌的肠毒素） 内源性超抗原：由感染哺乳动物细胞的某种病编码的细 胞膜蛋白质（如小鼠乳腺瘤病毒3‘端LTR编 码的抗原成分） TEXT 01 TEXT 05 TEXT 06 TEXT 07 TEXT 02 TEXT 03 TEXT 04 超抗原的分类

6. 外源性超抗原：由细菌分泌的可溶性蛋白质，包括G+外源性超抗原：由细菌分泌的可溶性蛋白质，包括G+ 菌分泌的各种外毒素（如葡萄球菌的肠毒素） 内源性超抗原：由感染哺乳动物细胞的某种病编码的细 胞膜蛋白质（如小鼠乳腺瘤病毒3‘端LTR编 码的抗原成分） 单击添加大标题 Your text 单击添加大标题 Your text

7. 检测某物质是否是超抗原分为以下六步： 1.确定细菌的来源：先确定所要研究的对象，准备样本与对照物，然 后分离鉴定获得。 2.细菌培养和模板提取：将样本接种在平板上并培养洗下菌苔，煮沸 离心制备悬浮液调浓度备用并模板提取。 3.引物的设计：根据查阅资料设计多对引物分别扩增 。 4.PCR 经多次摸索，得出各PCR的最适条件：即变性或预变性，退 火，延伸的温度和时间，然后用1%琼脂凝胶电泳并紫外线下观察。 5. ELISA（酶联免疫吸附测定）和RPLA(反相被动乳胶凝集 )。 6.结果分析 。 TEXT 01 TEXT 05 TEXT 06 TEXT 07 TEXT 02 TEXT 03 TEXT 04 单击添加大标题 Your text 检测超抗原

8. 检测某物质是否是超抗原分为以下六步： 1.确定细菌的来源：先确定所要研究的对象，准备样本与对照物，然 后分离鉴定获得。 2.细菌培养和模板提取：将样本接种在平板上并培养洗下菌苔，煮沸 离心制备悬浮液调浓度备用并模板提取。 3.引物的设计：根据查阅资料设计多对引物分别扩增 。 4.PCR 经多次摸索，得出各PCR的最适条件：即变性或预变性，退 火，延伸的温度和时间，然后用1%琼脂凝胶电泳并紫外线下观察。 5. ELISA（酶联免疫吸附测定）和RPLA 。 6.结果分析 。 单击添加大标题 Your text

9. 超抗原直接抗肿瘤作用 早期的实验结果显示, 直接应用游离超抗原具有一定的抗肿瘤效果。Hedlund等在体外将 Raji 细胞( B淋巴母细胞瘤细胞) 与外周血单个核细胞共育, 然后加入超抗原葡萄球菌肠毒素 A (SEA ) 或葡萄球菌肠毒B( SEB) , 发现HLA-DR+ Raji 细胞在加入10^- 12mol PL超抗原后几分钟即被明显杀伤。新近的一些体内外实验结果表明, 超抗原 SEA 活化的淋巴细胞对NK 敏感的淋巴瘤和白血病细胞有 杀伤及治疗作用。超抗原SEB可诱导T细胞在体内外对膀胱肿瘤的高效杀伤。 恶性肿瘤是威胁人类生命和健康的主要疾病之一，传统的治疗方法对身体的伤害较大，用免疫治疗法可以更科学合理的治疗恶性肿瘤，超抗原在抗肿瘤方面具有一定的作用。比如抗体靶向超抗原，膜锚定超抗原瘤苗抗肿瘤，超抗原基因转染抗肿瘤，直接抗肿瘤作用等，下面我们着重来了解一下直接抗肿瘤作用。 TEXT 01 TEXT 05 TEXT 06 TEXT 07 TEXT 02 TEXT 03 TEXT 04 单击添加大标题 Your text 超抗原的抗肿瘤作用

10. 超抗原直接使用具有抗瘤作用其主要通过: 1、超抗原在TCR 和肿瘤细胞( 如白血病细胞) 的 MHC-Ⅱ之间形成桥结构, 进而直接损伤肿瘤细胞。更重要的是这种桥结构可引导和触发超抗原依赖的细胞介导的细胞毒作用( SDCC) 。 2、活化多种免疫细胞, 使之释放大量细胞因子, 实验观察到超抗原活化的CD8+ T细胞(CTL) 和NK 细胞可直接攻击肿瘤细胞, 同时超抗原SEB 活化的 CD4+ T 细胞介导效应细胞因子对肿瘤细胞的非特异性杀伤效应, 因此打破机体对肿瘤的耐受并扩大对肿瘤的反应。 3、超抗原提高肿瘤细胞膜上ICAM-1、HLADR 等分子的表达, 进而促 进超抗原对淋巴细胞的活化增生作用, 并可提高肿瘤细胞的免疫原性, 便于免疫细胞攻击, 如提高肿瘤细胞对SDCC攻击的敏感性 TEXT 01 TEXT 05 TEXT 06 TEXT 07 TEXT 02 TEXT 03 TEXT 04 单击添加大标题 Your text 超抗原的抗肿瘤作用

11. 1、超抗原在TCR 和肿瘤细胞( 如白血病细胞) 的 MHC-Ⅱ之间形成桥结构, 进而直接损伤肿瘤细胞。更重要的是这种桥结构可引导和触发超抗原依赖的细胞介导的细胞毒作用( SDCC) 。 2、活化多种免疫细胞, 使之释放大量细胞因子, 实验观察到超抗原活化的CD8+ T细胞(CTL) 和NK 细胞可直接攻击肿瘤细胞, 同时超抗原SEB 活化的 CD4+ T 细胞介导效应细胞因子对肿瘤细胞的非特异性杀伤效应, 因此打破机体对肿瘤的耐受并扩大对肿瘤的反应。 3、超抗原提高肿瘤细胞膜上ICAM-1、HLADR 等分子的表达, 进而促 进超抗原对淋巴细胞的活化增生作用, 并可提高肿瘤细胞的免疫原性, 便于免疫细胞攻击, 如提高肿瘤细胞对SDCC攻击的敏感性 单击添加大标题 Your text 单击添加大标题 Your text

12. 超抗原有广泛的生物学效应, 单用游离超抗原进行的抗肿瘤免疫效应缺乏组织特异性 , 可损伤MHC-Ⅱ阳性的正常细胞。故单用游离超抗原有明显的毒副作用。又因为大多数肿瘤细胞的MHC-Ⅱ类分子表达缺乏或低下, 单用游离超抗原的抗肿瘤作用受限。鉴于此, 人们开发了针对肿瘤相关抗原的超抗原结合抗体即抗体靶向超抗原: Akerblom和Dohlsten用化学法连接单抗与SEA制成偶联蛋 白; Kalland和Lando通过基因工程方法制备了肿瘤反应性单抗Fab段与SAg的融合蛋白。实验表明, 化学法和基因工程方法构建的单抗超抗原结合体都能靶向到选择部位,发挥高效免疫激活效应, 在实验肿瘤的免疫治疗中取得一定成功。尤其是关于单抗与超抗原的融合蛋白的研究更为全面深入, 成为超抗原抗肿瘤应用研究的重要方面。 TEXT 01 TEXT 05 TEXT 06 TEXT 07 TEXT 02 TEXT 03 TEXT 04 搜ppt网：www.soppt.cn 抗体靶向超抗原的抗瘤作用

13. 超抗原有广泛的生物学效应, 单用游离超 抗原进行的抗肿瘤免疫效应缺乏组织特异性 , 可损伤MHC-Ⅱ阳性的正常细胞。故单用游离超抗原有明显的毒副作用。又因为大多数肿瘤细胞的MHC-Ⅱ类分子表达缺乏或低下, 单用游离超抗原的抗肿瘤作用受限。鉴于此, 人们开发了针对肿瘤相关抗原的超抗原结合抗体即抗体靶向超抗原: Akerblom和Dohlsten用化学法连接单抗与SEA制成偶联蛋 白; Kalland和Lando通过基因工程方法制备了肿瘤反应性单抗Fab段与SAg的融合蛋白。实验表明, 化学法和基因工程方法构建的单抗超抗原结合体都能靶向到选择部位,发挥高效免疫激活效应, 在实验肿瘤的免疫治疗中取得一定成功。尤其是关于单抗与超抗原的融合蛋白的研究更为全面深入, 成为超抗原抗肿瘤应用研究的重要方面。 单击添加大标题 Your text 单击添加大标题 Your text

14. 超抗原用于人类肿瘤治疗还有需要解决 的问题。如融合蛋白的剂量和使用方案需进一步研究; 融合蛋白仅对表达相应抗原的肿瘤有作用, 对其它肿瘤作用不大, 临床应用困难; 反复应用超抗原可使机体产生免疫耐受; 超抗原为外来蛋白, 机体可产生对它的抗体, 影响它的疗效; 超抗原直接转染瘤细胞, 因超抗原是分必型的, 仍可对周围组织产生不良作用。 TEXT 01 TEXT 05 TEXT 06 TEXT 07 TEXT 02 TEXT 03 TEXT 04 搜ppt网：www.soppt.cn 存在的问题和前景

15. 超抗原用于人类肿瘤治疗还有需要解决 的问题。如融合蛋白的剂量和使用方案需进一步研究; 融合蛋白仅对表达相应抗原的肿瘤有作用, 对其它肿瘤作用不大, 临床应用困难; 反复应用超抗原可使机体产生免疫耐受; 超抗原为外来蛋白, 机体可产生对它的抗体, 影响它的疗效; 超抗原直接转染瘤细胞, 因超抗原是分必型的, 仍可对周围组织产生不良作用。 单击添加大标题 Your text

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