M érések visszavezethetősége

1. Mérések visszavezethetősége Horváth Andrea NAT ODL-SZAB Szegedi Tudományegyetem Klinikai Kémia Intézet Akkreditálás haladóknak, kredit pontos továbbképzés, 2004. Budapest - Pécs - Szeged - Debrecen - Győr, 2004 Az előadás az IFCC Joint Committee on Traceability in Laboratory Medicine által kiadott CD-ROM (2002) felhasználásával készült.

2. Előadás témák • Fogalmak • Szabványok és irányelvek • Alapelvek • Visszavezethetőségi lánc és kalibrációs hierarchia • Teendők

3. Fogalmak • Visszavezethetőség: egy mérési eredménynek vagy etalon értékének az a tulajdonsága, hogy ismert bizonytalanságú összehasonlítások megszakítatlan láncolatán keresztül kapcsolódik országos vagy nemzetközi etalonokhoz. • Valódiság (trueness) • Valódi érték - helyes (konvencionális valódi) érték - mért érték • Elsődleges etalon (primary reference material) • Nemzetközi/nemzeti etalon (inter/national meas. std) • Referencia etalon (measurement standard) • Tanúsított anyagminta (certified reference material, CRM) • Anyagminta (reference material, RM) • Átvihetőség (commutability)

4. Akkreditálási szabványok MSZ EN ISO/IEC 17025:2001 5.6. 5.6.2.1.1. „…a berendezések kalibrálási programját úgy kell kialakítani és működtetni, hogy biztosítsa a laboratórium által végzett kalibrálások és mérések visszavezethetőségét egészen a nemzetközi mértékegység rendszerig (SI). A…laboratórium maga határozza meg saját mérőetalonjainak és mérőműszereinek visszavezethetőségét az SI-rendszerig, megszakítatlan kalibrálási lánc útján…” ISO 15189:2003(E) 5.6.2. 5.6.3. „A laboratórium mérőeszközeinek kalibrálására és a valódiság meghatározására szolgáló programot úgy kell megtervezni, hogy a mérések SI-rendszerre való visszavezethetősége biztosítható legyen…” NAR-20-IX D.2. D.2.1.3. „A laboratórium a … kalibráló anyagokat, kalibrálási értékeket és azok mérési bizonytalanságát, továbbá mindezek eredetét és visszavezethetőségét dokumentálja.”

5. Szabványok prEN ISO 17511:2000 In vitro diagnostic medical devices. Measurement of quantities in samples of biological origin. Metrological traceability of values assigned to calibrators and control materials. prEN ISO/FDIS 18153 Metrological traceability of values for catalytic concentration of enzymes assigned to calibrators and control materials. prEN ISO/FDIS 15195 Laboratory medicine - Requirements for reference measurement laboratories.

6. IVD direktíva, irányelvek EU Directive 98/79/EC on IVD MDs, Annex I, Essential requirements A.3 The traceability of values assigned to calibrators and/or control materials must be assured through available reference measurement procedures and/or available reference materials of a higher order. EAL-G12 Mérő és vizsgáló eszközök visszavezethetősége nemzeti (országos) vagy nemzetközi etalonokra. NAR EAL-G12 (MAB-23) 1. kiadás, 1998. június Az EAL-G12 fordítása a nemzeti alkalmazásra vonatkozó bevezetéssel.

7. Alapelvek 1 • A mérő- és vizsgáló eszközök kalibrálással történő visszavezethetőségét nemzetközi vagy nemzeti etalonokra a gyártmányok csereszabatossága iránti nemzeti és nemzetközi igény teszi szükségessé. • A mérések valódisága a legmagasabb rangú etalonokra való visszavezethetőség révén biztosított.

8. Alapelvek 2 A visszavezethetőség • egy mérési eredménynek vagy etalon értékének az a tulajdonsága, hogy • meghatározott referencia, • általában országos vagy nemzetközi, etalonokhoz • ismert bizonytalanságú összehasonlítások megszakítatlan láncolatán keresztül kapcsolódik (ld. kalibrációs hierarchia). VIM 1993, 6.10.

9. …meghatározott referencia, általában országos vagy nemzetközi, etalonokhoz… Mi minősül referenciának? • Primer referencia módszerrel meghatározott primer kalibrátor, mely visszavezethető az SI mértékegységre: pl. SRM911b NIST cholesterol primer kalibrátor. • Nemzetközi konvencionális (nem primer!) referencia módszerrel meghatározott nemzetközi konvencionális kalibrátor, mely nem vezethető vissza az SI mértékegységre: pl. HbA1c meghatározás HPLC-MS módszerrel • Nemzetközi konvencionális (nem primer!) referencia módszerrel meghatározott nem nemzetközi konvencionális kalibrátor, mely nem vezethető vissza az SI mértékegységre: pl. HDL-C, hematológiai (vvt és fvs szám), alvadási faktor kalibrátorok • Nemzetközi konvencionális (nem primer!) kalibrátor, mely nem nemzetközi konvencionális referencia módszerrel meghatározott és nem vezethető vissza az SI mértékegységre: pl. WHO standardok • A gyártó által megválasztott, de nem nemzetközi referencia módszerrel meghatározott, nem nemzetközi konvencionális kalibrátor:pl. CA-125, D-dimer, Chlamydia-, és HIV-ellenes antitest. • Konszenzus értékkel rendelkező kalibrátor

11. Referencia mérőrendszerek • Analit pontos definiálása humán mintában • Referencia módszer, amely az analitet specifikusan méri • Primer vagy szekunder matrix alapú anyagminta (RM) • Referencia laboratóriumok hálózata

12. Analit pontos definíciója Az analit definíciója feleljen meg a használati célnak. Két típusú analitet különböztetünk meg: • A típus: jól meghatározott kémiai entitás, amely visszavezethető az SI mértékegységre. • B típus: nem kellőképpen meghatározható, általában heterogén összetételű analit, amely nem vezethető vissza az SI mértékegységre. A B típusú mennyiségek esetén különösen fontos az analit pontos definiálása.

13. Referencia módszer és anyagminta • A B típusú analitek rendkívüli heterogenitása miatt azok meghatározására független nemzeti vagy helyi mérőmódszerek nem, csak nemzetközi konvencionális referencia módszerek használhatók (pl. enzimek, 37C, IFCC módszer) • A B típusú analitek esetében a referencia anyagminták csak fenntartásokkal alkalmazhatók humán mintákban. A B típusú analitek mennyiségének meghatározására csak nemzetközi etalonok használata elfogadott.

14. Kalibrációs hierarchia A mérés SI mértékegységének meghatározása Primer referencia módszer Primer kalibrátor Szekunder referencia módszer Szekunder kalibrátor Gyártó primer vagy szekunder kalibrátorral kalibrált mérőmódszere Gyártó munka-kalibrátor Gyártó munka-kalibrátorral kalibrált mérőmódszere Gyártó termék-kalibrátor Felhasználó gyári termék-kalibrátorral kalibrált rutin mérőmódszere Rutin minta Rutin mérés eredménye

16. Alapelvek 3 • Minden etalon kalibrálásának van mérési bizonytalansága. • A kalibrálási hierarchiában a magasabban elhelyezkedő etalonnak kisebb a bizonytalansága.

17. Mit kell tudni a kalibrátorokról és kontrollokról? • Származás, típus (nemzetközi, nemzeti, stb.) • Ki adta ki? (WHO, BCR, NIST, IFCC, stb.) • Kalibrálási bizonyítvány (tanúsított vagy nem?) • Eredet (humán, állati, mikrobiális, arteficiális, stb.) • Gyártási eljárás (szintetikus, rekombináns, neutrális) • Molekuláris forma (isomer, glycerol vagy glycerol észter, stb.) • Halmazállapot, fázis (vizes oldat, szuszpenzió, liofilizált) • Kezelési körülmények, tárolási feltételek, stabilitás • Az analit értéke, egysége + mérési bizonytalanság • Az érték visszavezethetősége • Mátrix (pl. pufferelt BSA oldat) • Felhasználási cél

20. Átvihetőség - mátrix hatás

21. Átvihetőség - mátrix hatás

22. HbA1c standardizáció • DCTT standard: cél –harmonizáció • IFCC standard – metrológiai visszavezethetőség • Klinikai hasznosíthatóság???

23. Gyártók teendői • A laboratóriumban használt kalibrátorok és a valódiság meghatározására szolgáló kontrollok eredete ismert. • A kalibrátorok SI-rendszerre való visszavezethetősége és a társuló mérési bizonytalanság dokumentált – kalibrálási bizonyítvány. • A kontrollok visszavezethetősége és a társuló mérési bizonytalanság dokumentált. • Jobb, visszavezethető és kommutábilis kalibrátorok előállítása.

24. Laboratóriumok teendői • A laboratóriumban használt kalibrátorok, kalibrálási eredmények és a kapcsolódó mérési bizonytalanságok ellenőrizettek és dokumentáltak. • A kalibrátorok visszavezethetősége dokumentált (ahol a gyártó megadja). • A laboratórium eljárásokkal rendelkezik a kalibrátorok kezelésére, tárolására és használatára vonatkozóan. • A A laboratórium rendszeresen ellenőrzi kalibrálásainak helyességét, és meghatározza az újrakalibrálások rendjét. • Igazolt tanúsított anyagminta használata (pl. CRM) • Elfogadott konszenzus standard vagy konszenzus módszerrel meghatározott referencia anyag használata • Referencia és rutin módszerrel nyert kalibrálások és mérések összehasonlítása (ún. módszer korreláció) • A termék-kalibrátor valódiságának (ún. „gyári érték”) ellenőrzése pl. „torzítás” vizsgálattal • Külső minőségellenőrzési/jártassági programokban való részvétel