1 / 18

Проблемы пострадиационного восстановления: вчера и сегодня

Проблемы пострадиационного восстановления: вчера и сегодня.

elgin
Download Presentation

Проблемы пострадиационного восстановления: вчера и сегодня

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Проблемы пострадиационного восстановления:вчера и сегодня

  2. В 1958 г. Владимир Иванович Корогодин обнаружил явление пострадиационного восстановления клеток дрожжей в непитательной среде. Такое восстановление осуществляется медленно (в течении 24-48 час) и зависит от плоидности клеток (проявляется у диплоидных и отсутствует у G1-гаплоидных клеток), что указывает на участие в этом процессе гомологичной рекомбинации. • Система пострадиационного восстановления в непитательно среде представляет уникальные возможности для молекулярно генетического анализа рекомбинационных процессов в их кинетике без вмешательства репликации ДНК.

  3. Профили седиментации ДНК из клеток Saccharomyces cerevisiae в градиенте концентраций нейтральной15-30% сахарозы (Luchnik, Glaser and Shestakov, 1977) Необлученный контроль Облучение в дозе 1000 Gy Облучение в дозе + выдерживание в непитательной среде, 48 часов.

  4. Выживаемость облученных рентгеновскими лучами клеток диплоидного и гаплоидного штаммов S. cerevisiaeдо и после выдерживания в непитательной среде

  5. Схема репарации двунитевых разрывов ДНК по механизму «разрыв и копирование»(break-induced replication, BIR) (Luchnik, Glaser, Shestakov, 1977; Voelkel-Meiman and Roeder, 1990; Malkova, Ivanov and Haber, 1996; Morrow, Connelly and Hieter, 1997)

  6. Два пути репарации ДНР ДНК в условиях инкубации в непитательной среде: быстрая и медленная.

  7. Профили седиментации ДНК из клеток Saccharomyces cerevisiae в градиенте концентрации нейтральной 15-30% сахарозы.Протопласты получали стандартным методом (А) и в присутствии 10 % KCl (В) (Glasunov, Glaser and Kapultsevich, 1989) ДНК из необлученных клеток Облучение в дозе 570 Gy, лизис клеток сразу после облучения Облучение в дозе 570 Gy, лизис клеток после выдерживания в непитательной среде при 280С в течение 1 ч.

  8. Рекомбинантные структруры ДНК, выделенные из Х-облученныхдиплоидных G1-клеток Saccharomyces сerevisiae.Клетки инкубировали в непитательной среде в течении 2-4 часов(Глазер, Самадашвили и Гаузе, 1982)

  9. Белки, кодируемые генами эпистатической группы RAD52, и их основные функции. • Rad50, Mre11, Xrs2 – формирование и процессинг ДНР ДНК. • Rad51 – ключевой белок рекомбинации, осуществляетформирование нуклеопротеинового филамента, синапсис и обмен цепями между рекомбинирующими ДНК. • Rad52 – связывается с однонитевой ДНК и обеспечивает формирование Rad51-ДНК-филамента. • Rad53– белок check-point контроля клеточного цикла,осуществляет задержку клеточного цикла в случае повреждения ДНК и обеспечивает время необходимое для репарации ДНР до вступления в следующую фазу цикла ДНК. • Rad54 и его паралог Rdh 54 – участвуют в изменении структуры хроматина, стимулируют обмен цепями, осуществляемый Rad51. • Rad55, Rad57– паралоги Rad51, функционируют в виде гетеродимера,стабилизируют Rad51-ДНК-филамент. • Rad59 – связывается с однонитевой ДНК, функционально перекрывается с Rad52.

  10. Модель рекомбинации на основе репарации двунитевых разрывов ДНК(Szostak, Orr-Weaver, Rothstein and Stahl, 1983)

  11. Схема репарации двунитевых разрывов путем зависимого от репликации отжига цепей ДНК(synthesis-dependent strand annealing, SDSA) (Nassif, Penney, Pal, Engels and Gloor, 1994; Ferguson and Holloman, 1996; Paques and Haber, 1999)

  12. Репарациядвунитевых разрывов(ДНР)ДНКпутемnon-homologous end-joining (NHEJ) • DNA-PKCS – каталитическая субъединица ДНК-зависимой протеинкиназы;NBS1 – Nijmegen breakage syndrome I;MRE11 – meiotic recombination 11;XRCC4 – X-ray-repair-cross-complementing defective repair in Chinese hamster mutant 4.ДНК-лигаза IV XRCC4ЛигированиеRAD50MRE11NBS1Процессинг концовDNA-PKCSГетеродимер KU80/KU70Репарациядвунитевых разрывов(ДНР)ДНКпутемnon-homologous end-joining (NHEJ) DNA-PKCS Гетеродимер KU80/KU70 NBS1 Процессинг концов MRE11 RAD50 ДНК-лигаза IV XRCC4 Лигирование

More Related