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Alejandro O. Luquetti Laboratório de Pesquisa em Doença de Chagas e Ambulatório de Chagas, Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Goiás, Goiania, Brasil. DIAGNÓSTICO, MANEJO, TRATAMIENO Y CRITÉRIOS DE CURA DE LA INFECCIÓN POR Trypanosoma cruzi. OVERVIEW OF CHAGAS DISEASE.
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Alejandro O. Luquetti Laboratório de Pesquisa em Doença de Chagas e Ambulatório de Chagas, Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Goiás, Goiania, Brasil DIAGNÓSTICO, MANEJO, TRATAMIENO Y CRITÉRIOS DE CURA DE LA INFECCIÓN POR Trypanosoma cruzi
OVERVIEW OF CHAGAS DISEASE - CHAGAS DISEASE caused by protozoan - The parasite: Trypanosoma cruzi, Mastigophora, kinetoplastida (as leishmanias), same genus than african tryps, 3 evolutive forms: A, E, T - The vector: insect, triatomine bug, > 120 species more important those domiciliated: Ti, Rp, Td - The infection - in mammals (reservoir) - human (Chagas disease, 8 million) - The disease: most, only infected, several mechan.
SEROLOGICAL DIAGNOSIS OF T. cruzi INFECTION THE QUESTION OF T. cruzi I and II & SEROLOGY As known: T. cruzi I: homogeneous, north Amazonas river, Rhodn. isolated humans and silvatic, didelphis, palm trees, also sylvatic below Amazonas, some humans double infection, only appears on immunosupression or tissues, easy treatment T. cruzi II(b): homogeneous, humans east Brazil, associated megaesophagus, low congenital(<1%), severe cardiopathy, difficult treatm. Years Neg. III(a: silvatic, armadillo, soil(Z3), P.genic. IV(c): hybrid? V/VI(d&e): hybrids: south BR, AR, UR, PY, BO, CH, easy response treatment, incl.Nf congenital 5%, megacolon & card.
Development of the WHO International Reference T.cruzi Panel: CANDIDATE MATERIALS: Plasma units anti-T. cruzi positive for ELISA, HAI, IFI and RIPA/Western Blot from North country (e.g. Colombia, Mexico). Plasma units anti-T. cruzi positive for ELISA, HAI, IFI and RIPA/Western Blot from South country (e.g. Bolivia, Brasil). Plasma units clear negativefrom endemic area Linajes filogenéticos de Trypanosoma cruzi TCI T. cruziI T. cruziIIa T. cruziIIb T. cruziIIc T. cruziIId T. cruziIIe TCII Adaptado de Souto et al. 1996; Fernandes et al. 1998; Brisse et al. 2000, 2004.
SEROLOGICAL DIAGNOSIS OF T. cruzi INFECTION THE QUESTION OF T.cruzi I & II AND SEROLOGY A: T. cruzi II and reagents made from T. cruzi II: ok B: T. cruzi II and reagents made from T.c I not extensively tested Our experience (IFI, ELISA) strain Queretaro: similar results (?) -C: T.cruzi I and reagents made from T.cI: ok (MX, CO) -D: T.cruzi I and reagents made from T.cII: some (MX, HN, CO, VE) ok other (MX, CO) low reactivity some sera Our experience: ok (MEX, HON, COL, VEN, ELS?)
SITUACION ACTUAL DE LA ENF. DE CHAGAS Importancia de la enf. de Chagas Prevalencia elevada Incapacidad (AVAI) Edad Tratamiento complejo História
ENFERMEDAD DE CHAGAS MECANISMOS DE TRANSMISION – PROFILAXIA MECANISMO CONDICIONANTE PROFILAXIA Vectorial existencia de vector Insecticida - transf/transpl donante infectado Serologia - congenita frecuente (5-10%) Deteccion madre - oral alimentos difícil - accidente lab falta de bioseguridad bioseguridad
ENFERMEDAD DE CHAGAS FASES Y FORMAS CLÍNICAS Fase aguda (hasta 60 dias): parasitos circulantes Fase cronica: Forma indeterminada (50-60%) Forma cardíaca (20 a 35%) Forma digestiva alta (5 a 15%) baja Forma asociada Otras (nerviosa, etc) raras y poco caracterizadas
ENFERMEDAD DE CHAGAS FASE AGUDA - hasta 60 dias, con parasitos circulantes - generalmente asintomática - puerta de entrada (Romaña) sugiere - descrita en todos los países - mas frecuente en áreas hiperendemicas - su diagnóstico depende de la perspicácia del médico y del laboratorista
ENFERMEDAD DE CHAGAS FORMA CARDÍACA - prevalencia diferente de acuerdo a la region - instalacion: 5 a 40 anos de edad - evolucion variable: lenta/rápida - asociada a muerte súbita - poca relacion con parasitemia y nivel de anticuerpos - mas grave en hombres jovenes
ENFERMEDAD DE CHAGAS MEGAESOFAGO - mal del atorado, reconocido en Brasil central desde el siglo XIX - sólo abajo de la linea ecuatorial - 9% de los infectados, porcentaje menor en otras regiones - relacion con sexo masculino - cuando presente, manifiesta antes de la cardiopatía - formas leves, anectásicas (femenino) y dilatadas (masculino) - denervacion de plexos de Auerbach e Meissner existe rara forma idiopática
RADIOLOGICAL CLASSIFICATION GRUPO II GRUPO I GRUPO III GRUPO IV Rezende et al, 1960.
ENFERMEDAD DE CHAGAS MEGACÓLON -Inicio tardio, después de cardiopatía -observado en todos los países, ni siempre associado a T. cruzi -dificultad de conocer su prevalencia en estudios de campo -buen marcador para etiologia chagásica -otras causas: Hirschprung, niños Andino (arriba 3.000 m, dieta?) (dolico, vólvulo, sin denervación)
ENFERMEDAD DE CHAGAS FORMAS ASOCIADAS -toda asociacion posíble -megaesofago + cardíaca: 35% -megacolon + cardíaca: 28% -megaesofago + megacolon: 43% -megaesofago + megacolon + cardiopatia: 32% -depende de queja/especialista
DIAGNOSIS OF CHAGAS DISEASE DIAGNOSIS (Acute and chronic phase) A)EPIDEMIOLOGY B)CLINICAL FINDINGS C)LABORATORY TESTS All should fit
DIAGNOSTICO DE LA ENF. DE CHAGAS Diagnóstico clínico Elevado valor predictivo de: % serologia Alteracion ECG: BRD 99,5% P: 464 N: 2 Megaesofago 91,4% P: 1.031 N: 97 Megacólon 95,2% P: 648 N: 33 (Excluídos mayores de 60 anos)
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DISTRIBUIÇÃO POR SEXO, IDADE E PROCEDÊNCIA, DE DOADORES DE SANGUE COM SEROLOGIA POSITIVA CONFIRMADA, EM GOIÂNIA, 1995-2002 IDADE MASC FEM GO MG BA OUTROS CONG? TOTAL <20años 30 10 6 0 25 1 8 40 21a 40 557 151 283 52 335 21 17 708 >40 453 181 416 120 55 40 3 634 1.040 342 705 172 415 62 28 1.382 Laboratório de Pesquisa da doença de Chagas, FM, HC e IPTSP, UFG, Goiânia
DIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS Valor del diagnóstico laboratorial Fase aguda: Parásito: 100% (certeza) Fase cronica: Anticuerpos 95-98% (probabilidad)
DIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DE FASE AGUDA Técnica eficácia costo experiencia A fresco +++ ++ Concentración ++++ + ++ Lamina coloreada + ++ IgM + ++ ++
DIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS DIAGNÓSTICO LABORATORIAL EN LA FASE CRONICA - Presencia de anticuerpos anti-T.cruzi en > 98% - Presencia de parásitos variable, no superior a 50%, mismo con PCR - Parasitemia baja, inconstante, variable, ausente en la muestra (puede no haber en 500 ml: riesgo transf.) - Soluciones versus suspensiones
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DE LA ENF. CHAGAS DIAGNÓSTICO LABORATORIAL SEROLÓGICO - Presencia en concentraciones constantes en mismo indivíduo - Tests convencionales (ELISA, IFI, HAI) en uso desde 1975 - Enorme experiencia acumulada en todos los países - Desempeño depende de insumo de buena calidad y de Buenas Práticas de Laboratório - En general antígeno no purificado - Problemas de especificidad con leishmaniosis
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DE LA ENF. CHAGAS DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO DE LA INFECCIÓN POR T. cruzi EN LA FASE CRONICA - No se utiliza de rutina. Sólo disponible en centros de investig. - Por definición, fase cronica cursa con parasitemia baja - Disponibilidad de xenodiagnóstico, hemocultivo y PCR Indicado en seguimiento de tratados o sorologia dudosa También para aislar cepas - Resultado negativo NO tiene valor - Resultado positivo, TIENE gran valor: - A)Si tratado, la droga fué ineficaz - B)Si serologia dudosa, confirma la etiologia chagásica
DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO T. cruzi CONTEXTO DE DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO EN LA INFECCIÓN POR T. cruzi -USO DE DOS TESTS DE PRINCIPIOS DIFERENTES (OMS) -TESTS CONVENCIONALES -NO CONVENCIONALES ANTIGUOS -NO CONVENCIONALES RECIENTES
DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO T. cruzi TESTS CONVENCIONALES HAI, IFI, ELISA, FC, AD2ME TIEMPO DE REALIZACIÓN NO ERA OBJETIVO EN GENERAL, ANTÍGENOS NO PURIFICADOS NÚMERO DE PASSOS VARIABLE, NAO ERA FINALIDAD UTILIZACIÓN CLÁSICA COSTO VARIABLE (1,00 US$/TEST)NO ELEVADO
SEROLOGY IN NON-TREATED CHAGASIC PATIENTS FOLLOW UP OF CHRONIC PHASE, CARDIAC FORM, NON TREATED PATIENT MJS, female, 32 sera collected during 23 years
SEROLOGY IN NON-TREATED CHAGASIC PATIENTS FOLLOW UP OF CHRONIC PHASE, CARDIAC FORM, NON TREATED PATIENT ICD, female, 32 sera collected during 13 years
DIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS TESTS SEROLÓGICOS CONVENCIONALES Valores em la población no infectada e infectada TEST RESULTADO NEGATIVO INDETERMINADO POSITIVO ELISA D.O./P.CORTE <0,9 0,9-1,1 >1,1 IFI TITULO < 1/20 1/20-1/40 >1/40 HAI(2ME) TITULO <1/8-1/10 1/8-1/10 >1/8-1/10 (Valores dependen del kit y de los controles de cada laboratório)
PP PB BB BN NN REPETIR (ambos tests) Procedimientos con resultados obtenidos con dos tests convencionales para detección de infección por T. cruzi Suero Negativo Suero Positivo PP PB BB BN NN Sangre liberada No chagásico Excluir Sangre Indivíduo infectado 3o test 3o test P B NP B N 1) Descartar la sangue 2) No comunicar que está infectado (reacción cruzada?) 3) Enviar para Laboratorio de referencia o correlación clínica o tests parasitológicos (menos de 5% de las muestras)
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL DE LA ENF. CHAGAS DIAGNÓSTICO DE LA INFECCIÓN POR T. cruzi RESULTADOS INCONCLUSIVOS - Utilizando apenas serologia convencional (ELISA, IFI, HAI) - De 7.849 sueros, 4.800 (61,2%) reactivos y 2.194 no reaactivos - Apenas 133 (1,7%) inconclusivos - Un teste dudoso, uno negativo y un positivo o dos a tres dudosos - Detectadas las causas en 63 (47,5%) - Leishmaniosis en 26%, tratados en 14%, fase aguda en 3%, transferencia pasiva en 3% y hepatitis en 1,5%.
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi OBSERVAÇÕES DURANTE USO CORRETO DE TESTES CONVENCIONAIS - PROBLEMAS DE ESPECIFICIDADE SENSIBILIDADE - RESULTADOS DUVIDOSOS - DIMINUIÇÃO DE CUSTOS - DIMINUIÇÃO DE TEMPO DE REALIZAÇÃO - DISPENSA DE EQUIPAMENTO DE LEITURA - POSSIBILIDADE DE AUTOMAÇÃO
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi COMPARAÇÃO DE SOROLOGIA CONVENCIONAL, EPIDEMIOLOGIA E DADOS CLÍNICOS COM KITS DE ELISA DISPONÍVEIS. Soros Brasil (T. cruzi 2) TESTE Ag Suporte Tempo Sensib. Especif. ELISA CONVENCIONAL epi bruto placa 7 h 99,5% 92,5% ELISA BIOMANGUINHOS epi bruto placa 3 h 99,7% 97,0% BIOLAB epi bruto placa 2 h 99,4% 98,5%
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi SOLUCOES PARA PROBLEMAS IDENTIFICADOS - NA ESPECIFICIDADE: MELHORAR ANTIGENOS PURIFICADOS (90, 72, 25, 50) RECOMBINANTES (CRA, FRA, A13, H49, Ag1, JL7 ETC) PEPTIDIOS SINTÉTICOS - NA RAPIDEZ: SUPORTES GEL, MEMBRANAS NITROCELULOSE DISPENSA DE EQUIPAMENTO: LEITURA OLHO NU: COR, BANDA
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DIAGNOSTICO LABORATORIAL SOROLÓGICO Novos testes visando aumentar especificidade e/ou diminuir tempo: - Recombinantes, peptídios sintéticos - Suportes: polímeros, membranas - Testes rápidos de utilidade em serviços com pouca demanda - Nem todos automatizáveis, geralmente custo maior
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi TESTE IDEAL TESTE DIAGNÓSTICO IDEAL: SENSIBILIDADE 100% ESPECIFICIDADE 100% POUCOS PASSOS/ETAPAS RESULTADO EM TEMPO MINIMO: RAPIDO DISPENSA DE EQUIPAMENTO POSSIBILIDADE DE AUTOMAÇÃO CUSTO BAIXO
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi TESTES NAO CONVENCIONAIS ANTIGOS (1960-1985) PRECIPITACAO: BAIXA SENSIBILIDADE, SO FASE AGUDA LISE MCo: DIFICULDADE OPERACIONAL AGLUTINACAO PARTICULAS LATEX: BAIXA ESPECIFICIDADE FLOCULACAO: CUSTO ELEVADO RADIOIMUNOENSAIO: RIPA: DIFICULDADE RADIOISÓTÓPOS ALGUNS RAPIDOS (LATEX) NENHUM ATENDEU AO USUARIO
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi TESTES NÃO CONVENCIONAIS RECENTES NEM TODOS RÁPIDOS VÁRIOS PRECISAM EQUIPAMENTO DÍFICIL OBTENÇÃO FALTA DE DISPONIBILIDADE / COMERCIALIZAÇÃO EM GERAL CUSTOS MAIORES
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi ALGUNS EXEMPLOS DE NÃO CONVENCIONAIS A) NÃO COMERCIALIZADOS - NÃO DISPONÍVEIS - A&T: QUIMIOLUMINÔMETRO DE MICROPLACAS (CUSTO) Ag PURIFICADO, NÃO RAPIDO - CITOMETRIA DE FLUXO (CUSTO) Ag TRIPO DIFÍCIL OBTENÇÃO, NÃO RÁPIDO B) COMERCIALIZADOS: DIFICULDADE AUTOMAÇÃO - INNOLIA: NÃO RÁPIDO, CUSTO ELEVADO RESULTADOS DE DIFÍCIL INTERPRETAÇÃO - GADOR: - NÃO RÁPIDO, CUSTO ELEVADO
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi TESTES RÁPIDOS: DIFICULDADE DE AUTOMAÇÃO 1) CHEMBIO(USA): SENSIBILIDADE MENOR 10/20 MIN=RAPIDO, CUSTO 1 US$/TESTE 2) PaGIA(SUIÇA): SENSIBILIDADE MENOR, FALSOS POSITIVOS, 20 MIN = RÁPIDO, PRECISA CENTRIFUGA ESPECIAL(BS) 3) IMUNOCOMB (ISRAEL): SEMI-RÁPIDO: UMA HORA, DEDICAÇÃO TOTAL, POUCAS AMOSTRAS, SENSIBILIDADE/ESPECIFICIDADE OK 4) TESA-BLOT (BRASIL): SEMI-RÁPIDO: TRES HORAS, DEDICAÇÃO TOTAL, POUCAS AMOSTRAS, SENSIBILIDADE/ESPECIFICIDADE OK
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DESEMPENHO DE TESTE RÁPIDO PaGIA, DIAMED 3 Testes convencionais 3 Testes positivos 3 testes negativos total PaGIA positivo 2.750 50 2.800 PaGIA negativo 53 1.432 1.485 Total 2.803 1.482 4.285 Especificidade: 96,6% Sensibilidade: 98,1%
DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO T. cruzi NOVOS TESTES DESEMPENHO DE NOVOS TESTES EM COMPARAÇÃO COM SOROLOGIA CONVENCIONAL, SOROS COM EPIDEMIOLOGIA E MARCADOR CLÍNICO nome do teste antígeno suporte tempo sensib. especif LISE MCo tripo Neubauer 3 h variabilidade CITOMETRIA DE FLUXO tripo Citometria --- elev. elev. A&T purificado microplaca --- elev. elev. CRA-FRA recombinante ELISA 3 h elev. elev. BIOLAB purificado ELISA 2 h elev. elev. INNOLIA recombinantes membr.nitr --- elev. elev. QUALICODE recombinantes membr.nitr 3 h elev. elev. CHEMBIO recombinantes membr.nitr 10 m 97% 98% TESA-BLOT purificado membr.nitr 3 h elev. elev. PaGIA peptídios polim/gel 20 m 98% 97% IMUNOCOMB recombinantes membr.nitr 2 h elev. elev.
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DIAGNÓSTICO DA INFECÇÃO PELO T. cruzi EM CADA SITUAÇÃO 1)DIAGNÓSTICO DE PACIENTE - Encaminhado por médico, visando esclarecer etiologia - Interessa uso de testes de elevada especificidade - Evitar falso positivo, com consequencias médico-legais - Uso de dois testes de princípios diferentes, convencionais ou um convencional e outro rápido. - Se ambos positivos, em título elevado, liberar resultado
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DIAGNÓSTICO DA INFECÇÃO PELO T. cruzi EM CADA SITUAÇÃO 2) EXCLUSÃO DE DOADOR - Serviço de hemoterapia, objetivo: sangue de boa qualidade - Interessa uso de testes de elevada sensibilidade - Evitar falso negativo, com consequencias médico-legais - Uso de dois testes de princípios diferentes, convencionais: ELISA obrigatório + IFI ou HAI ou teste rápido - Uso de um teste, ELISA, só se controle de qualidade externo - Se ambos NEGATIVOS, liberar resultado
NEQAP – Process • Proficiency serological panels are produced and sent three times a year to all public blood banks for the markers: • Chagas Disease • Syphilis • Hepatitis B and C • HTLV-I and II • HIV-1 and 2
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DIAGNÓSTICO DA INFECÇÃO PELO T. cruzi EM CADA SITUAÇÃO 3)DIAGNÓSTICO DE TRANSMISSAO VERTICAL (CONGÊNITO) - Encaminhado por pediatra, visando esclarecer transmissão - Assegurar que mãe é infectada: sorologia prévia (pré-natal) ou, sorologia no sangue do cordão umbilical: se negativo, não é - Procurar parasito no recém nascido (micro-hematócrito) - Testes sorológicos positivos, apenas indicam a transferencia materna - IgM por IFI não dá segurança. Anti-SAPA não comercializável - O correto é advertir ao médico para nova coleta aos seis meses: - Se existe IgG, houve transmissão e deve ser tratado.
DOENÇA DE CHAGAS – TRIAGEM GESTANTES GOIAS Fluxo de gestantes diagnosticadas e confirmadas De abril 2004 a abril 2011 = 7 anos = 1.773 + 26 D 910 só confirmacao 1ª. Coleta soro no município 889 compareceram no lab. Chagas HC, UFG (49,4) 584 (65,7%) compareceram consulta Perfil: média idade: 29 anos ECG normal: 360 (61,6%) ECG inespecifico: 128 (21,9%) (ARV, EV, BS, TS) ECG card.leve: 93 (15,9%) (88 com BRD) ECG card. Grave: 0,5%)
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS SEROLOGIA EN LACTANTES DE MADRES INFECTADAS -RESULTADOS OBTENIDOS EN 56 LACTANTES - Suero del primer mes: títulos muy elevados, similares a los de la madre: (n=17) IFI 1.280 Elisa: 2,6 HAI 256 PaGIA pos - Suero del segundo mes: IFI 320 Elisa: 1,5 HAI 16 PaGIA variab - Suero del tercer mes: IFI 80 Elisa: 1,2 HAI 8 PaGIA variab - Suero del cuarto mes: IFI 40 Elisa: 0,6 HAI 4 PaGIA neg - Suero del 6o.mes(n=13):IFI 10 a 40 Elisa: 0,6 HAI <4 PaGia neg Suero del 7o. mes(n=9): IFI <10 Elisa 0,4 HAI <2 PaGIA neg Suero del 8o. mes(n=8): IFI<10 Elisa 0,4 HAI<2 PaGIA negativo
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DIAGNÓSTICO DA INFECÇÃO PELO T. cruzi EM CADA SITUAÇÃO 4) INQUÊRITO SOROEPIDEMIOLÓGICO - Visa aferir prevalência da infecção ou verificar sucesso de profilaxia - Suporte em papel-filtro: de boa qualidade - Interessa uso de testes de elevada sensibilidade - Em geral ELISA + IFI
CHAGAS DISEASE: SEROLOGICAL SURVEY EXAMPLE: NATIONAL SURVEY IN BRAZIL (2001-2008) - Purpose: effect of insecticide spraying from 1975-1986 Candidates: only born after 1985= less than 5 years old All rural municipalities of Brazil. Estimated sample size: 150.246. Nr.samples collected: 105.813. Validated: 104.954 Positive samples: 104 (0.1%) > collect sera child + mothers 1)41 only positive mothers: passive transmission 2)20 child and mother confirmed: congenital 3)11 only child: vector transmission (areas free of T.infestans) 4)1 mother dead. 18 not confirmed. 13 not found. CONCLUSION: wide success of insecticide. (Data project FUNASA/FUNEPU, coordination Prof. Aluisio Prata, published RSBMT, 2011)
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DIAGNÓSTICO DA INFECÇÃO PELO T. cruzi EM CADA SITUAÇÃO 5)DIAGNÓSTICO DE FASE AGUDA OU REATIVAÇÃO - Encaminhado por médico, visando esclarecer diagnóstico - Fase aguda vetorial, transfusional, via oral, Aids, transplante, acidente de laboratório. - Por definição, fase aguda ou reativação, tem parasitos - Procurar parasitos, se não houver, tentar IgM e IgG - Se imunosupressão intensa, pode haver parasitos no líquor.
SITUAÇÃO ATUAL DA DOENÇA DE CHAGAS DIAGNÓSTICO DA INFECÇÃO PELO T. cruzi EM CADA SITUAÇÃO 6) SEGUIMENTO DE INFECTADO TRATADO - Encaminhado por médico, visando cura - A cura é possível em 100% dos congênitos, 60% dos agudos e crianças e 25% dos adultos, após benzonidazol x 60 dias - O critério de cura é a ausência de anticorpos presentes antes da quimioterapia - O prazo da viragem é de meses em congênitos, anos em agudos/crianças e décadas em adultos - Por isso imprescindível conservar soros anteriores em glicerol - Proceder em paralelo com os soros anteriores e o atual