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遗传学实验. 实验九 姊妹染色单体分染技术 (3学时). 一、教学基本要求. 1 、 了解姊妹染色单体差别染色技术的原理 2 、 掌握制作SCE标本的方法。. 二、教学内容. 〖 目的和要求 〗 通过这一实验,要求学生了解姊妹染色单体差别染色技术的原理和制作SCE标本的方法,并通过SCE标本的观察,掌握SCE计数方法。. 〖 实验原理 〗.
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遗传学实验 实验九 姊妹染色单体分染技术 (3学时)
一、教学基本要求 1、了解姊妹染色单体差别染色技术的原理 2、掌握制作SCE标本的方法。
二、教学内容 〖目的和要求〗 通过这一实验,要求学生了解姊妹染色单体差别染色技术的原理和制作SCE标本的方法,并通过SCE标本的观察,掌握SCE计数方法。
〖实验原理〗 在DNA复制过程中,核苷的类似物5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)能代替胸腺嘧啶进入到新合成的DNA链中,植物根尖在含有适当BrdU的培养液中生长二个分裂周期后,中期染色体的两条染色单体在化学组成上有了差别,一条染色单体的两条DNA链均为新合成的,因此T位完全由BrdU代替,另一条染色单体的一条DNA链是新合成的,所以只有一条DNA中含有BrdU,这样的细胞经染色后,一条为深染,一条为淡染,所以称之为姊妹染色单体的差别染色。本实验运用这一原理,利用蚕豆根尖作为材料,经过适当处理制片,可观察到姊妹染色单体分染现象。
〖材料和方法〗 1、蚕豆发芽处理。 2、BrdU、青霉素中黑暗培养。 3、秋水仙素溶液预处理,卡诺氏液固定,HCL溶液离解,Schiff 试剂染色。 4、压片观察
〖作业〗 1、制所观察到的色差染色单体图象。 2、计算SCE的频率。 3、 思考:本实验的材料掺入BrdU时为什么要在全黑的条件下培养?