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第十六章 人体组织的检验. 一、毛发检验 毛发结构: 毛发是皮肤的一种特殊的附属器,是 皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。 毛尖- ----是毛干的游离末端,毛干向毛尖逐渐 变细而尖 毛干 -----是裸露于皮肤外部的部分,由角化上 皮细胞组成,中心向外可以分为: 毛小皮: 人----毛小皮花纹通常为细小波浪状。 毛皮质: 人----皮质发达, 毛髓质: 人---髓质不发达、而且髓质不连续 毛根 -----是埋在皮肤内的部分。 毛 球: 毛根起始端膨大和球状的部分
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一、毛发检验 毛发结构:毛发是皮肤的一种特殊的附属器,是 皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。 毛尖-----是毛干的游离末端,毛干向毛尖逐渐 变细而尖 毛干-----是裸露于皮肤外部的部分,由角化上 皮细胞组成,中心向外可以分为: 毛小皮:人----毛小皮花纹通常为细小波浪状。 毛皮质:人----皮质发达, 毛髓质:人---髓质不发达、而且髓质不连续 毛根-----是埋在皮肤内的部分。 毛 球:毛根起始端膨大和球状的部分 毛 囊:包裹毛根的一管状结构,内层为上皮 根鞘、外层为纤维组织鞘 毛乳头:毛球和毛囊末端膨大,底面内凹,含 毛细血管和神经的结缔组
法医意义: 1 毛发容易脱落,在凶杀、强奸、抢劫等 案件中均可遗留 2 毛发理化性质稳定,其主要成分为角蛋 白,不易腐蚀和毁坏,可长期保存 3 毛发可以进行个人识别 鉴定注意: 1 毛发容易丢失,检验时应该特别小心,最 好带口罩 2 选择合适的背景进行观察
毛小皮 毛皮质 毛髓质 形态 边缘 宽度 色素 宽度 连续性 末端 人毛 细而不规则花形 细锯齿状 较宽2/3 均匀 较窄1/4~1/5 不连续 部分缺如 动物毛 形状多变 粗锯齿状 较窄1/2~1/3 不均匀 较宽》1/3 连续 直至毛尖 毛发与其他纤维的鉴别 肉眼观:毛尖、毛干、毛根 显微镜:毛小皮、毛皮质、毛髓质 燃烧法:毛发由特殊的臭味----角蛋白中含有 3%~5%的硫 人毛与其他动物毛的鉴别
长度 直径 横断面 头发 ~2m 《0.1 圆形或椭圆形 胡须 ~30cm 0.15 钝的三角形 阴毛 3~6cm 0.1~0.2 长椭圆形 毛发部位的确定 毛发其他特征鉴别 5%~10%亚硝基铁氰化钠溶液 脱落----毛根完全角化,干燥萎缩,无根鞘附着, 根部色素少。染色不颜色反应 拔出----毛囊组织附着、毛球湿润,毛球下端开放 呈钩状,染色呈红色。 钝器损伤----钝器作用部位变宽扁平,皮质纤维分 离,部分或完全断裂 锐器损伤----断端平滑整齐、毛干不碎裂、皮质纤 维不分裂
毛发的个人识别 形态学检查:长度--- 色泽---黑色、浅褐色、灰色、白色---色素:白色、黑色、红色 形态---直发、波状发、卷发 断端---剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂 免疫学检查:ABO血型----解离试验 特征:1 血型物质含量少;2 毛小皮没有血型物质,只有皮质和髓质才有 方法:毛发洗净--乙醇脱色--充分压扁--加抗体吸收---涤、解离、RBC 注意:1 毛发压扁,原宽度地~4倍; 2 抗血清效价》128; 3吸收时间充分,过夜 4 毛发对照 生化学检查:有毛根和毛囊的毛发可以检测ESD、GLOI、PGM1、ORM等 分子生物学:带毛囊---DNA提取用chelex-100,STR基因座分析,性别基因鉴定 毛 干---线粒体DNA多态性分析 化学 分 析:微量元素的检测 应用:可以推测可能的生活环境、从事的职业、判断是否中毒 方法:原子发射光谱析、原子吸收分光光度、中子活性、气相色谱、质谱
二、软组织检验 1 种类鉴别 肉眼观察适合于组织块比较大的检材的识别 组织切片HE染色后,在显微镜下观察,鉴别 ***如果干燥组织可以用5%醋酸浸软组织以 恢复正常形态 皮肤----复层鳞状上皮细胞的表层结构+真皮层的 毛囊和皮脂腺,及皮下脂肪 脑组织----神经细胞和神经胶质细胞 肝 脏----肝细胞及胆管构成发肝小叶结构 肾 脏----肾小球、肾小管、 消化道----粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜
2 种属鉴定 免疫学方法:抗人血清---沉淀反应、凝集反应、酶免疫分析 **法医检验中的组织经常受各种因素的影响,变性或分解, 易产生误判。 分子生物学: Alu序列 含有AluI酶切位点 散在重复序列,由300bp重复单位,该序列为人类和灵长类特有-----种属特异性 PCR-AFLP:人类130bp的扩增产物 28srRNA rRNA=60s(28s+5.8s+5s+50多种多肽)+40 保守区中的可变区进化较快,种属之间差异很大 人类108、104、101、99bp,不同动物的扩增产物长度不同 细胞色素b基因 位于线粒体上的具有种属差异的遗传标记 人和哺乳类动物区别 AluI酶切位点--酶切片断的长度不同 人和鸟类的动物区别—NcoI酶切位点---人类不含有该酶切位点 SON基因
3 个人识别 检验基础:正常情况下,同一个体不同组织的血型、酶型、DNA分型结果相同 例外:癌变的组织;腐败组织----获得性B物质 影响因素:环境因素,干燥能保存,潮湿易破坏 温度、酸碱 烧熟(但未焦)的组织可以检出, 自溶和腐败 使组织的血型物质及其他的遗传标记更容易被破坏 送检注意:1 尽快送检--- 2 妥善保存---所有检材不宜用甲醛固定 3 合理选材---肝脏和脾脏中核酸分解酶丰富,蛋白质和DNA降解快,不宜首选,肌肉和脑是提取DNA较理想的检材
血型: ABO血型ABH抗原不仅分布于人类红细胞 上,也存在于人体各种上皮细胞、血管与淋巴管的内皮细胞、心内膜及神经组织的神经细胞及突触。 有些组织的ABH抗原发育较红细胞早 方法:吸收试验---凝集抑制试验 解离试验---热解离试验 混合凝集---红细胞粘连试验 免疫组化---酶标抗体的应用 基因分型---PASA、PCR-RFLP、ASO-PCR 酶 型测定检材处理:组织制成匀浆, DNA分析DNA提取:冷冻组织---常规有机溶剂,量少用Chelex-100 DNA分析STR或HLA基因分型
三、其他组织检验 1 指甲检验—由表皮细胞角化而成,由多层连接牢固的角化细胞构成,细胞内充满角质蛋白。 ABO血型 特点:ABH为水溶性血型物质,但不受分泌型的影响,存在于所有的个体。成人和新生儿指甲中的ABH含量无明显的差异。 方法:洗净---用肥皂水充分的洗涤,再用蒸馏水冲洗数次 软化---生理盐水中2小时,晾干 脱脂---丙酮或乙醇脱脂 压碎---加大抗血清接触的面积 mtDNA检测 测定mtDNA多态性的灵敏度比检测核DNA的多态性高 2 骨及牙检验-----人体最坚硬的组织,抵抗腐败,长期保存 检材处理:用手术刀刮净骨表面和牙齿表面的污垢物,用蒸馏水冲洗2次,紫外线照射1小时后,用锤子将牙齿砸碎成粉末,或用电钻取出骨粉 ABO血型:骨粉经乙醇脱脂后,分别粘在透明胶布上-----解离试验 DNA分析:常规提取以后,可以再用DNAclean-up纯化备用。